人巨噬细胞可从外周血或经斑蝥激发的皮疱液中获取，也可从肺灌洗液或患者腹膜透析液中分离，但操作烦琐，得量不多。许多实验室在进行基础或配合临床研究巨噬细胞功能及其与疾病的关系、或筛检免疫增强药物和探讨其作用机制时，常选用小鼠腹腔巨噬细胞为研究对象。

(一)鼠腹腔巨噬细胞制备

1．用无菌注射器吸取3％硫代乙醇酸钠3ml，注射于小鼠腹腔内。

2．四日后，注射羊红细胞(1％悬液)lml于小鼠腹腔内。

3．注射1h后，将小鼠用颈椎脱臼法处死，解剖暴露腹腔，于腹腔靠上部位，用镊子轻轻夹起腹膜，将腹膜剪一小口，用尖吸管注入5ml预温的PBS，同时用手反复揉搓腹腔约1～2min，以便尽可能多地冲洗出小鼠腹腔的吞噬细胞

4．用尖吸管吸取腹腔液，置一洁净试管内。

5．用尖吸管将腹腔液吹打均匀(尽量避免产生气泡)，吸取一滴滴于载玻片上，加盖玻片镜检。

(二)炭粒廓清试验

    正常小鼠肝中库普弗细胞可吞噬清除90％炭粒，脾巨噬细胞约吞噬清除10％炭粒，据此给小鼠定量静脉注射印度墨汁(炭粒悬液)，间隔一定时间反复取静脉血。测定血中炭粒的浓度，根据血流中炭粒被廓清的速度，判断巨噬细胞的功能。

(三)吞噬功能的检测

1．鸡红细胞(CRBC)悬液的制备取鸡血l～2ml，阿氏液抗凝。试验前用无菌生理盐水冲洗3次，然后配成5％CRBC悬液。

2．吞噬试验取皮疱渗出液O．5ml，加上述CRBC悬液0．01 ml混匀，置37℃水浴中30min，每隔10min轻轻摇动1次。1000r／mln离心5min，弃上清液。留少许液体将细胞充分混匀．涂片，甲醇固定，吉姆萨染色，油镜下观察并计数100～200个巨噬细胞。

3．结果观察

(1)吞噬细胞百分率：即100个巨噬细胞中吞噬有CRBC的细胞数。

(2)吞噬指数：将100个巨噬细胞所吞噬的CRBC的总和除以100，所得每个巨噬细胞吞噬CRBC的平均数，即吞噬指数。