ELISA试剂盒试验中呈现负值
A：1）ELISA试剂盒血清中有些细胞因子的检出率很低，血清中又富含许多大分子杂蛋白，在血清浓度较高时简单隐瞒抗原的表位，因此在测血清原液时常呈现负值。这即是在咱们的阐明书中主张检查血清时做1:2稀释的因素。除TGF-B1、sICAM-1、MMP-9、TIMP-1等要做高倍稀释外，其它一些细胞因子都要做1:2稀释（这在咱们的阐明书中有提示）。做法是：先在样本孔中加50ul试剂稀释液（试剂盒中已备），再加50ul样本。求出样本含量后需求乘上稀释倍数2。
2）ELISA试剂盒试验假如按上诉办法处理后检查仍有负值，则处理数据时可以采纳2个办法：
a：规范曲线只取规范曲线的下面4~5个点，即125，62.5，31.25，15.625，7.8，0，或62.5，31.25，15.625，7.8、3.9、0。原则是把样本的OD值全包含，规范曲线又能至少有4个点。也即是把规范曲线的下端（即样本含量会集的这一段）扩大，求出的数据更牢靠。
b：ELISA试剂盒人为的把“0”pg/ml点OD值下降。原则是把“0”OD值降到比zui低的样本OD略低一点，尽可能使样本的含量满是正值，一起确保变化“0”OD值后的规范曲线的相关系数（r）＞0.98。这样变化后，通常样本都能得到数据，低的样本出来了，高的样本含量也会高一些。因为计算时是相对含量的对比，所以不会影响ELISA试剂盒试验计算成果。 |
