在现在的小鼠elisa试剂盒商品试剂盒中，血清样本的加入几乎是*的要使用微量加样器加入样本的步骤。使用微量加样器加样必须注意的关键点是：加样不可太快，要避免加在孔壁上部，不可溅出和产生气泡。加样太快，无法保证微量加样的准确性和均一性。加在孔壁上部的非包被区，易导致非特异吸附。溅出会对邻近孔产生污染。出现气泡则反应液界面有差异。试剂的加入在国产试剂盒中基本上均是从滴瓶中滴加，除了要注意滴加的角度外，滴加的速度也很重要，滴加太快，很容易出现重复滴加或加在两孔之间的现象，这样就会在孔内的非包被区出现非特异吸附，从而引起非特异显色。所以，有时候一份标本用相同的试剂盒这次测定为阳性，下次测定为阴性，往往就是上述加样及试剂的错误所致。四、温育温育是ELISA测定中影响测定成败zui为关键的一个因素。ELISA作为一种固相免疫测定，抗原抗体的结合反应在固相上进行，要使液相中的抗原或抗体与固相上的特异抗体或抗原*结合，必须在一定的温度条件下反应一定的时间。温育所需时间与温度成反比，即温度越高，则所需时间相对较短。zui为常用的温育温度有37℃和室温，其次是43℃和2～8℃。
    温育这一步是临床ELISA测定中。通常目前国内ELISA商品试剂盒的反应温育时间为37℃30分钟～1小时，进口ELISA试剂盒则通常为37℃1～2小时才能有较*的结合，低于1小时，可能会影响测定下限。因此，关于温育，在实际测定操作中一定要注意以下几点：要保证在设定的温度下有足够的反应时间。一般来说，加完样本和/或反应试剂后，将微孔板从室温拿至水浴箱或温箱中时，孔内温度从室温升至37℃，需要一定的时间，尤其是在室温比较低以及非水浴的状态下，这段升温时间可能还比较长，而在临床实验室中，很少有人注意这个问题，通常是将微孔板一放入温箱即开始计时，这样就很容易造成实际测定中温育时间不够，弱阳性样本测不出来的问题。曾有一地处南方的血站同行提出了一个问题，就是在每一年的冬季总有那么一个多月的时间，在做HBsAg测定的室内质控中，测定由卫生部临床检验中心供应的1ng/ml弱阳性样本时，小鼠elisa试剂盒总是测不出来，不知原因为何？这可能就与南方冬天室内温度较低有关，此时微孔板转入温箱后37℃温育时间不够，以致弱阳性样本测定为阴性。

 蛋白质精氨酸甲基转移酶1IgG 兔子转化生长因子β1(TGF-β1)

 蛋白质酪氨酸激酶JAK-1IgG 兔子主要组织相容性复合体Ⅲ类(MHCⅢ/RLAⅢ)

 蛋白质酪氨酸激酶JAK-2IgG 兔子肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体3(TRAIL-R3)

 蛋白质磷酸酶-2AIgG 兔子肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体3(TRAIL-R3)

 蛋白质磷酸酶-2AIgG 兔子肿瘤坏死因子α(TNF-α)  

 低分子量神经丝蛋白IgG 兔子中性粒弹性蛋白酶(NE)

 低分子质量蛋白7IgG 兔子脂联素(ADP)

 低密度脂蛋白IgG 兔子脂蛋白磷脂酶A2(Lp-PL-A2)

 低密度脂蛋白受体IgG 兔子孕激素/孕酮(PROG)

 低密度脂蛋白受体相关蛋白6IgG 兔子胰岛素样生长因子2(IGF-2)
小鼠elisa试剂盒