其他elisa试剂盒的操作因固相载体的形成不同而有所差异,国内医学检验一般均用板式点。本文将叙述板式ELISA各个操作步骤的注意要点,珠式、管式及磁性球ELSIA,国外试剂均与特殊仪器配合应用,严格遵照规定操作,必能得出准确的结果。 可用作ELISA测定的标本十分广泛,体液(如血清)、分泌物(唾液)和排泄物(如尿液、粪便)等均可作标本以测定其中某种抗体或抗原成份。有些标本可直接进行测定(如血清、尿液),有些则需经预处理(如粪便和某些分泌物)。大部分ELISA检测均以血清为标本。血浆中除尚含有纤维蛋白原和抗凝剂外,其他成份均同等于血清。制备血浆标本需借助于抗凝剂,而血清标本只要待血清自然凝固后即可取得。除特殊情况外,在医学检验中均以血清作为检测标本。在ELISA中血浆和血清可同等应用。 血清标本可按常规方法采集,应注意避免溶血,红细胞溶解时会释放出具有过氧化物酶活性的物质,以HRP为标记的ELISA测定中,溶血标本可能会增加非特异性显色。 血清标本宜在新鲜时检测。如有细菌污染,菌体中可能含有内源性HRP,也会产生假阳性反应。如在冰箱中保存过久,其中的可发生聚合,在间接法ELISA中可使本底加深。 一般说来,在5天内测定的血清标本可放置于4℃,超过一周测定的需低温冰存。冻结血清融解后,蛋白质局部浓缩,分布不均,应充分混匀宜轻缓,避免气泡,可上下颠倒混和,不要在混匀器上强烈振荡。混浊或有沉淀的血清标本应先离心或过滤,澄清后再检测。其他elisa试剂盒反复冻融会使抗体效价跌落,所以测抗体的血清标本如需保存作多次检测,宜少量分装冰存。保存血清自采集时就应注意无菌操作,也可加入适当防腐剂。 辣根过氧化物酶标记肿瘤坏死因子IgG 人卵清蛋白特异性IgE(OVA sIgE) 辣椒素受体IgG 人卵泡抑素(FS) 赖氨酸缺陷型蛋白激酶1IgG 人卵巢癌标志物CA125 赖氨酸缺陷型蛋白激酶1IgG 人绿脓杆菌外毒素A(PEA) 酪氨酸蛋白激酶Fyn(同步原癌基因)IgG 人硫氧还蛋白还原酶(TrxR) 酪氨酸蛋白激酶受体A4IgG 人硫氧化还原蛋白(Trx) 酪氨酸蛋白激酶受体B2IgG 人流行性乙型脑炎IgG(JE IgG) 酪氨酸蛋白激酶受体B6IgG 人流行性腮腺炎(EP) 其他elisa试剂盒 |