人17-羟皮质类固醇(17-OHCS)Elisa试剂盒操作步骤：

1、准备：从冰箱取出试剂盒，室温复温平衡30分钟。

2、配液：用蒸馏水将20倍浓缩洗涤液稀释成原倍的洗涤液。

3、加标准品和待测样本：取足够数量的酶标包被板，固定于框架上，分别设置标准品孔、待测样本孔和空白对照孔，记录各孔位置，在标准品孔中加入标准品50μL；待测样本孔中先加入待测样本10μL，再加样本稀释液40μL(即样本稀释5倍)；空白对照孔不加。

4、温育：37℃水浴锅或恒温箱温育30min。

5、洗板：弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板4次(也可用洗板机按说明书操作洗板)。

6、加酶标工作液：每孔加入酶标工作液50μL，空白对照孔不加。

7、温育：37℃水浴锅或恒温箱温育30min。

8、洗板：弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板4次(也可用洗板机按说明书操作洗板)。

9、显色：每孔先加入显色剂A 液50μL，再加入显色剂B液 50μL，平板混匀器混匀30s(或用手轻轻震荡混匀30s)，37℃避光显色15min。

10、终止：取出酶标板，每孔加终止液50μL，终止反应(颜色由蓝色立转黄色)。

11、测定：以空白孔调零，在终止后15分钟内，用450nm波长测量各孔的吸光值(OD值)。

12、计算：根据标准品的浓度及对应的OD值，计算出标准曲线的直线回归方程，再根据样本的OD值，在回归方程上计算出对应的样品浓度，也可以使用各种应用软件来计算。最终浓度为实际测定浓度乘以稀释倍数。

巨噬细胞趋化蛋白-1（MCP-1）

肿瘤坏死因子-a（TNF-a）

可溶性细胞间黏附因子-1（sICAM-1）

可溶性血管间粘附因子-1（VCAM-1）

白介素-6（IL-6）

白介素-8（IL-8）

高敏C-反应蛋白（hs-CRP）

内皮素（ET）

一氧化氮（NO）

血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）

血管紧张素I (肾素、AngI)

醛固酮（ALD）

基质金属蛋白酶-9（MMP-9）

基质金属蛋白酶抑制剂-1（TIMP-1）

 氧化低密度脂蛋白(ox_LDL)

可溶性细胞表面分化抗原40配体（sCD40L）

脂联素(adiponectin)

组织型纤溶酶原激活剂（t-PA）

纤溶酶原激活物抑制因子-1（PAI-1）

E-选择素（E-Selectin）

P-选择素 CDp62 血小板活化

同型半胱氨酸

血管紧张素转换酶（ACE）