转基因大豆EPSPS基因核酸检测试剂盒标准操作步骤:
1.液氮充分研磨样品。
2.收集研磨成粉末的50mg样品,置于1.5ml离心管中。
3.加入350μl65℃预热的缓冲液IL,并加入20μl蛋白酶K剧烈地漩涡振荡,确保所有的组织团都分散均匀。
4.65℃水浴20-30min。水浴期间颠倒样品数次。
5.加入350μl,充分混匀,12,000 rpm(~13,400×g)离心5分钟。
6.小心地把上清液吸至另一新的1.5ml离心管中。注意确保不要打散沉淀团或把组织碎片也一起转移。
7.加入4μl RNase A,涡旋混匀。室温放置2min。
8.加入二分之一上清体积的缓冲液IB与等体积的无水乙醇,充分混匀。如:向300μl上清中加入150μl缓冲液IB与300μl无水乙醇。
9.把上述混匀的液体转移到吸附柱上。10,000×g离心1 min以结合DNA,弃去滤出液体。纯化柱*容量为750μl,如果混合液大于750μl,请分两次过柱。
10.将吸附柱重新套回收集管中,加入500μl缓冲液WB至柱子中,10,000×g离心1min,倒弃流出液;
11.将吸附柱重新套回收集管中,加入600μl DNA Wash Buffer至柱子中,10,000×g离心1min,倒弃流出液;
注意:DNA Wash Buffer使用前须按要求用无水乙醇稀释。如果放入冰箱中,使用前须恢复到室温。
12.再加入600μl DNA Wash Buffer至柱子中,8,000×g离心1min,弃去流出液;
13.将吸附柱重新套回2ml收集管中,转速(>13000×g)离心空结合柱1min以干燥柱子的基质;这一步对下面的洗脱步骤至关重要。
14.将柱子置于1.5ml灭菌离心管,加入50-150μl65℃预热的洗脱缓冲液EB至柱子的膜中央。室温静置5min; 15. 室温下,离心(>13000)1min,以洗脱DNA。保留含DNA的流出液。将DNA储于-20℃。
产品仅用于科研如非指出,所有离心步骤均为使用台式离心机在室温下离心。 血管生成素相关蛋白6抗体 Muellerian缪勒管激素抑制因子抗体 酪氨酸蛋白激酶受体A8抗体 脂肪酰辅酶A家族成员1抗体 芳香烃受体核转录蛋白样2抗体 磷酸化芳香胺N-乙酰化转移酶抗体 肌动蛋白结合蛋白1抗体 粘附分子IgG样结构域蛋白2抗体 肌动蛋白结合蛋白DOC6抗体 AFG3样蛋白2/脊髓小脑共济失调蛋白28抗体 激活素受体相互作用蛋白1抗体 醛固酮类还原酶家族7成员A2抗体 蛋白激酶AKT1,2,3抗体 帕金森病相关蛋白ATP13A2抗体 肌侧索硬化蛋白2抗体 磷酸化毛细血管扩张性共济失调症突变蛋白抗体 酰基辅酶A脱氢酶长链抗体 细胞分裂周期蛋白5抗体 β淀粉样肽/Aβ42抗体 ADCK4蛋白抗体 抑癌蛋白AIMP3抗体 蛋白激酶A锚定蛋白6抗体 肺α/β水解酶蛋白1抗体 水解酶结构域蛋白13抗体 水解酶结构域蛋白14B抗体 水解酶结构域蛋白15抗体 肺α/β水解酶蛋白3抗体
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