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腺病毒D型探针法荧光定量PCR试剂盒检测方法
点击次数:571 更新时间:2022-03-29

腺病毒D型探针法荧光定量PCR试剂盒检测方法包括以下步骤:

(1)将参照基因与待测目的基因片段等比例连接,克隆到同一个质粒载体上,构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品,并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线;

(2)待测样本与步骤(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后,目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数,计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值,即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。

其中步骤(1)为:将参照基因与待测目的基因片段等比例连接,克隆到同一个质粒载体上,构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品,并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线。

其中所述参照基因为本领域常规参照基因,较佳地管家基因,优选地为RPPH1的扩增区域,其中所述质粒载体为本领域常规质粒载体,较佳地为PCR克隆载体,优选地为TA cloning载体,所述TA cloning载体较佳地为pMD18-T载体。其中所述标准品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例较佳地为1:1。由于标准品中待测目的基因与参照基因的比例为1:1,解决了目前相对标准曲线法应用中目的基因与参照基因的浓度比例关系难以控制的问题,提高HER2基因扩增检测的可靠性。

步骤(2)为:待测样本与步骤(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后,目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数,计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值,即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。

其中所述待测目的基因为本领域常规待测目的基因,较佳地为肿瘤或者疾病的特异性基因,更佳地为HER2基因的扩增区域,所述荧光定量PCR扩增为本领域常规荧光定量PCR扩增方法,所述荧光定量PCR扩增方法较佳地为多通道荧光定量PCR扩增,更佳地为双通道荧光定量PCR扩增。

人α1酸性糖蛋白(α1-AGP)酶联免疫吸附测定试剂盒Human α1-AGP (Alpha-1-Acid Glycoprotein) ELISA Kit

人血管紧张素转化酶 (ACE)酶联免疫吸附测定试剂盒Human ACE (Angiotensin I Converting Enzyme) ELISA Kit

人激活素A(ACVA)酶联免疫吸附测定试剂盒Human ACVA (Activin A) ELISA Kit

人脂联素(ADP/Acrp30)酶联免疫吸附测定试剂盒Human ADP/Acrp30 (Adiponectin) ELISA Kit

人Agouti相关蛋白(AgRP)酶联免疫吸附测定试剂盒Human AgRP (Agouti Related Protein) ELISA Kit

人血管生成素(ANG)酶联免疫吸附测定试剂盒Human ANG (Angiogenin) ELISA Kit

人促血管生成素1(ANG1)酶联免疫吸附测定试剂盒Human ANG1 (Angiopoietin 1) ELISA Kit

人促血管生成素2(ANG2)酶联免疫吸附测定试剂盒Human ANG2 (Angiopoietin 2) ELISA Kit

人B细胞活化因子 (BAFF/CD257)酶联免疫吸附测定试剂盒 Human BAFF/CD257 (B-Cell Activating Factor) ELISA Kit

人脑源性神经因子(BDNF)酶联免疫吸附测定试剂盒 Human BDNF (Brain Derived Neurotrophic Factor) ELISA Kit

人骨成型蛋白2 (BMP-2)酶联免疫吸附测定试剂盒 Human BMP-2 (Bone Morphogenetic Protein 2) ELISA Kit

人骨成型蛋白4 (BMP-4)酶联免疫吸附测定试剂盒 Human BMP-4 (Bone Morphogenetic Protein 4) ELISA Kit

人骨成型蛋白7 (BMP-7)酶联免疫吸附测定试剂盒 Human BMP-7 (Bone Morphogenetic Protein 7) ELISA Kit

人上皮型钙黏蛋白 (E-Cad)酶联免疫吸附测定试剂盒 Human E-Cad (E-Cadherin) ELISA Kit

人碳酸酐酶IX (CA9)酶联免疫吸附测定试剂盒Human CA9 (Carbonic Anhydrase IX) ELISA Kit

人胱天蛋白酶1(CASP1)酶联免疫吸附测定试剂盒Human CASP1 (Caspase 1) ELISA Kit

人半胱天冬酶3(CASP3)酶联免疫吸附测定试剂盒Human CASP3 (Caspase 3) ELISA Kit

人组织蛋白酶B(CTSB)酶联免疫吸附测定试剂盒Human CTSB (Cathepsin B) ELISA Kit

人组织蛋白酶V(CTSV)酶联免疫吸附测定试剂盒Human CTSV (Cathepsin V) ELISA Kit

人单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)酶联免疫吸附测定试剂盒Human MCP-1 (Monocyte Chemotactic Protein 1) ELISA Kit

人巨噬细胞炎性蛋白1α(MIP-1α)酶联免疫吸附测定试剂盒Human MIP-1α (Macrophage Inflammatory Protein 1 Alpha) ELISA Kit 

人巨噬细胞炎性蛋白1β(MIP-1β)酶联免疫吸附测定试剂盒 Human MIP-1β (Macrophage Inflammatory Protein 1 Beta) ELISA Kit 

人调节正常T细胞表达和分泌因子(RANTES)酶联免疫吸附测定试剂盒 Human RANTES (Regulated On Activation, Normal T-Cell Expressed and Secreted) ELISA Kit 

人单核细胞趋化蛋白3(MCP-3)酶联免疫吸附测定试剂盒Human MCP-3 (Monocyte Chemotactic Protein 3) ELISA Kit

人嗜酸粒细胞趋化因子(ECF/CCL11)酶联免疫吸附测定试剂盒Human ECF/CCL11 (Eosinophil Chemotactic Factor) ELISA Kit

人胸腺激活调节趋化因子(TARC)酶联免疫吸附测定试剂盒Human TARC (Thymus Activation Regulated Chemokine) ELISA Kit

人巨噬细胞炎性蛋白3α(MIP-3α)酶联免疫吸附测定试剂盒Human MIP-3α (Macrophage Inflammatory Protein 3 Alpha) ELISA Kit 


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