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人桩蛋白(Pax)Elisa试剂盒使用方法
点击次数:61 发布时间:2022-06-29

人桩蛋白(Pax)Elisa试剂盒使用方法:


1. 标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。


5号标准品


150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液


4号标准品


150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液


3号标准品


150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液


2号标准品


150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液


1号标准品


150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液


 2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品终稀释度为5倍)。加样将样品加于         酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。


3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。   


4. 配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用


5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30后弃去,如此重复5次,拍干。


6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。


7. 温育:操作同3。


8. 洗涤:操作同5。


9. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.


10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。


11. 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。

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