ELISA试剂盒实验要求 1. 从ELISA试剂盒室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。 2. 设置标准品孔、样本孔和空白孔,空白孔什么都不加;标准品孔各加不同浓度的标准品50μL; 3. 待测样本孔先加待测样本10μL,再加样本稀释液40μL; 4. 随后标准品孔和样本孔中(空白孔不加)加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体50μL,,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。 5. 弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。 6. 所有孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。 7. 所有孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。 操作注意事项 1. 试剂盒保存在2-8℃,使用前室温平衡20分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶,这属于正常现象,水浴加热使结晶*溶解后再使用。 2. 实验中不用的板条应立即放回自封袋中,密封(低温干燥)保存。 3. 预处理后的样本无需稀释,直接取10μL加样即可。 4. 严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。 5. 所有液体组分使用前充分摇匀。 |