ELISA试剂盒检测前准备工作 1. 请提前20分钟从冰箱中取出试剂盒,平衡至室温。 2. 将浓缩洗涤液用双蒸水稀释(1:25)。ELISA试剂盒未用完的放回4℃。从冰箱中取出的浓缩洗涤液可能有结晶,属于正常现象,可用40℃水浴微加热使结晶*溶解后再配制洗涤液。(加热温度不要超过50℃)使用时洗涤液应为室温。 3. 标准品: 加入标准品&标本稀释液1.0ml至冻干标准品中,ELISA试剂盒静置10分钟,待其充分溶解后,轻轻混匀(浓度为5000 pg/ml)。然后根据需要进行倍比稀释(注:不要直接在板中进行倍比稀释)。建议配制成以下浓度: 2500、1250、625、312.5、156.2、78.1、39.05、0 pg/ml。样品稀释液直接作为空白孔 0 pg/ml。ELISA试剂盒如配制2500pg/ml标准品:取0.5ml (不要少于0.5ml )5000pg/ml的上述标准品加入含有0.5ml样品稀释液的EP管中,混匀即可,其余浓度以此类推。 4. 生物素化抗体工作液:ELISA试剂盒实验前计算当次实验所需用量(以100μl/孔计),实际配制时应多配制100-200μl。使用前15分钟,以生物素化抗体稀释液稀释浓缩生物素化抗体(1:100)成工作浓度。当日使用。 5. 酶结合物工作液:ELISA试剂盒实验前计算当次实验所需用量(以100μl/孔计),实际配制时应多配制 100-200μl。使用前15分钟,以生物素化抗体稀释液稀释浓缩生物素化抗体(1:100)成工作浓度。当日使用。 |