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大鼠elisa试剂盒实验中蛋白质的分离纯化 |
点击次数:924 更新时间:2018-03-05 |
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大鼠elisa试剂盒实验由于各种蛋白质分子颗粒巨细、亲水程度不同,故盐析所需的盐浓度也不一样,因此调理混合蛋白质溶液中的中性盐浓度可使各种蛋白质分段沉积。 影响盐析的要素有: 温度:除对温度灵敏的蛋白质在低温(4度)操作外,通常可在室温中进行。 蛋白质盐析常用的中性盐,主要有硫酸铵、硫酸镁、硫酸钠、氯化钠、磷酸钠等。 通常温度低蛋白质溶介度下降。但有的蛋白质(如血红蛋白、肌红蛋白、清蛋白)在较高的温度(25度)比0度时溶解度低,更简单盐析。 pH值:大多数蛋白质在等电点时在浓盐溶液中的溶介度zui低。 ELISA试剂盒实验盐析前血清要加等量生理盐水稀释,使蛋白质含量在2.5-3.0%。 蛋白质浓度:蛋白质浓度高时,欲别离的蛋白质常常夹杂着别的蛋白质地一同沉积出来(共沉现象)。 其中使用zui多的硫酸铵,它的长处是温度系数小而溶解度大(25度时饱满溶液为4.1M,即767克/升;0度时饱满溶解度为3.9M,即676克/升),在这一溶解度范围内,很多蛋白质和酶都可以盐析出来; 硫酸铵分段盐析作用也比别的盐好,不易导致蛋白质变性。硫酸铵溶液的pH常在4.5-5.5之间,当用别的pH值进行盐析时,需用硫酸或氨水调理。 蛋白质在用盐析沉积别离后,需要将蛋白质中的盐除掉,常用的方法是透析,即把蛋白质溶液装入秀析袋内(常用的是玻璃纸),用缓冲液进行透析,并不断的替换缓冲液,因透析所需时刻较长,所以在低温中进行。 大鼠elisa试剂盒实验葡萄糖凝胶G-25或G-50过柱的方法除盐,所用的时刻就比较短。 22373-78-0 Monensin Sodium 莫能菌素钠盐标准品 200mg 22298-29-9 Betamethasone Benzoate 苯甲酸倍他米松标准品 200mg 22204-53-1 Naproxen 萘普生标准品 200mg 22199-08-2 Silver Sulfadiazine 磺胺嘧啶银标准品 200mg 22189-32-8 Spectinomycin Hydrochloride 盐酸大观霉素标准品 200mg 22071-15-4 Ketoprofen 酮洛芬标准品 200mg 22059-60-5 Disopyramide Phosphate 磷酸丙吡胺标准品 200mg 219861-08-2 Escitalopram Oxalate 草酸艾司西酞普兰对照品标准品 200mg 21645-51-2 Dried Aluminum Hydroxide Gel 氢氧化铝胶体标准品 200mg 2152-44-5 Betamethasone Valerate 戊酸倍他米松标准品 200mg 大鼠elisa试剂盒 |
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