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影响大鼠elisa试剂盒结果的干扰因素有哪些
点击次数:1080 更新时间:2018-03-09
 

大鼠elisa试剂盒实验测定中,存在众多的干扰因素及影响实验结果的判断,这给实验者在一定程度上带来了极大的困扰,今天小编在这里为大家分析下ELISA实验过程中内源性的干扰因素。内源性干扰因素一般包括类风湿因子、补体、高浓度的非特异免疫球蛋白、异嗜性抗体、某些自身抗体、因使用鼠抗体治疗或诊断诱导的抗鼠Ig抗体、交叉反应物质等。在日常的临床血清(浆)标本中,有相当比例不同程度的含有上述各种干扰物质,从而导致测定结果的假阳性。

1、稀释标本:这在判断急性病原体感染的特异IgM抗体如抗HAVIgM,抗HBclgM, TORCH的IgM抗体检验等尤为有用。因为感染时,血循环中特异的IgM抗体滴度通常很高,而RF滴度通常相对要低得多。因此,在测定前对标本进行稀释,特异的IgM因高滴度存在仍可检出,而非特异的RF则会因为稀释变成非常低的滴度,从而对测定几乎不产生干扰。现在,有些特异IgM检测elisa试剂盒不要求稀释标本,直接检测,这样虽然方便了实验室技术人员的操作,但容易出现假阳性结果,并且由于某些感染,如HBV的感染,血循环中抗HBelgM可持续以一定的滴度存在,标本不做稀释即进行检测,即可出现阳性结果,从而失去抗HBclgM用于HBV感染的诊断价值。因此,在临床实验室,一定要使用要求对标本做1:1000稀释的试剂盒进行检验,从而保证相应检测项目结果的可靠性及临床应用价值。

2、改变酶标抗体:由于RF结合的是IgG的Fc片段,如果将待酶标的抗体的F,片段酶切夫除,仅留下具有特异结合功能的F(ab’)2部分标记酶,则在测定中即可避免RF的干扰。

3、标本中RF用变性IgG预先封闭:将经热变性(63℃,10min)的动物如兔、羊等的IgG加入到标本稀释液中,或是将该变性IgG连接至一颗粒固相如聚苯乙烯微球或微孔,然后加入临床血清标本,反应后,再吸出标本进行检测。此外,在测定特异IgM时,也可使用抗人IgG去除临床标本中RF和IgG。

4、大鼠elisa试剂盒测定抗原时,可在标本中加入可使RF降解的还原剂:如2—巯基乙醇。2—巯基乙醇等还原剂可使抗体内的巯基裂解,因而可以去除RF的干扰,但只适用于抗原测定。

5、包被或酶标二抗使用特异的鸡抗体IgY:RF不与鸡IgY反应,如果包被和酶标二抗均为鸡IgY抗体,则不受标本中RF的干扰。
100mg    Hexacosanol    506-52-5     二十六碳醇标准品
100mg    Guanine     29110-48-3     鸟嘌呤标准品
100mg    Goserelin Acetate    145781-92-6     醋酸戈舍瑞林标准品
100mg    Glutamine     56-85-9     谷氨酰胺标准品
100mg    Formoterol Fumarate     183814-30-4     富马酸福莫特罗标准品
100mg    Fluticasone Propionate     80474-14-2     氟替卡松丙酸酯标准品
100mg    Flurandrenolide     1524-88-5     氟氢缩松标准品
100mg    Fluocinonide     356-12-7     醋酸氟轻松标准品
100mg    Fluocinolone Acetonide     67-73-2     醋酸肤轻松标准品
100mg    Fludeoxyglucose     29702-43-0     2-脱氧-2-氟-D-葡萄糖标准品
100mg    Fenbendazole     43210-67-9     苯硫咪唑标准品
大鼠elisa试剂盒

 

 
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