小鼠elisa试剂盒中的酶标二抗和显色液做，阳性值却很高OD 1.4，这样看来我的抗原应该没问题，好像问题出在酶标二抗上，根据客户留言在网上问题解答如下：

    先要确定两种酶标二抗使用的是不是同一批包被的板，因为虽然是相同的抗原，可能两次包被不一样。

    如果是同一批板，出现这种情况只能说明你的酶标二抗失活了，买新的二抗，按说明书上的稀释倍数稀释；阴性对照有颜色很可能是没封闭好。阳性值是由你的抗原抗体间亲和力决定的，增加抗原抗体用量，或提高二抗浓度，但灵敏度可能会降低，你可以重新摸下工作浓度；

    阴性值降低，你可以采用BSA封闭2小时看看，好像没听说有人用FCS封闭的，你可以尝试采用其他的封闭液，据我了解，用BSA封闭不是很好，可以试试脱脂奶粉；再就是TMB本身时间长了就会略显色，你可以调整显色时间。

Elisa试剂盒说明：

1．检测原理：采用双抗体夹心ABC-ELISA法

2．试剂盒保存：-20℃(较长时间不用时)；2-8℃(频繁使用时)。

3．浓洗涤液低温保存会有盐析出，稀释时可在水浴中加温助溶。

4．小鼠elisa试剂盒中、英文说明书可能会有不一致之处，请以英文说明书为准。

5．刚开启的酶联板孔中可能会含有少许水样物质，此为正常现象，不会对实验结果造成任何影响。

 生物素化CD14IgG 人P27蛋白(P27)

 生物素化CD20IgG 人OJ/抗异亮氨酰tRNA合成酶(OJ/IleRS) 

 生物素化CD4IgG 人N-乙酰基-丝氨酰-天门冬酰-赖氨酰-脯氨酸(AcSDKP)

 生物素化C-反应蛋白IgG 人N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)

 生物素化癌胚抗原IgG 人N钙黏蛋白/神经钙黏蛋白(N-Cad) 

 生物素化促甲状腺素IgG 人N端中段骨钙素(N-MID-OT)

 生物素化瓜氨酸环肽 人N端外显肽(Ext-N)

 生物素化脑钠肽 人N端前脑钠素(NT-proBNP)
小鼠elisa试剂盒