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大鼠elisa试剂盒间接法成功的关键
点击次数:1122 更新时间:2018-06-04
 

大鼠elisa试剂盒间接法成功的关键在于抗原的纯度。虽然有时用粗提抗原包被也能取得实际有效的结果,但应尽可能予以纯化,以提高试验的特异性。特别应注意除去能与一般健康人血清发生反应的杂质,例如以E.Coli为工程酶的重组抗原,如其中含有E.Coli成份,很可能与受过E.Coli感染者血甭中的抗E.Coli抗体发生反应。抗原中也不能含有与酶标抗人Ig反应的物质,例如来自人血浆或人体组织的抗原,如不将其中的Ig去除,试验中也发生假阳性反应。另外如抗原中含有无关蛋白,也会因竟争吸附而影响包被效果。

间接法中另一种干扰因素为正常血清中所含的高浓度的非特异性。病人血清中受检的特异性IgG只占总IgG中的一小部分。IgG的吸附性很强,非特异IgG可直接吸附到固相载体上,有时也可吸附到包被抗原的表面。因此在间接法中,抗原包被后一般用无关蛋白质(例如牛血清蛋白)再包被一次,以封闭(blocking)固相上的空余间隙。另外,在检测过程中标本须先行稀释(1:40~1:200),以避免过高的阴性本底影响结果的判断。当抗原材料中的干扰物质不易除去,或不易得到足够的纯化抗原时,ELISA试剂盒可用此法检测特异性抗体。

其原理为标本中的抗体和一定量的酶标抗体竞争与固相抗原结合。标本中抗体量越多,结合在固相上的酶标抗体愈少,因此阳性反应呈色浅于阴性反应。如抗原为高纯度的,可直接包被固相。如抗原中会有干扰物质,直接包被不易成功,可采用捕获包被法,即先包被与固相抗原相应的抗体,然后加入抗原,形成固相抗原。大鼠elisa试剂盒洗涤除去抗原中的杂质,然后再加标本和酶标抗体进行竞争结合反应。竞争法测抗体有多种模式,可将标本和酶标抗体与固相抗原竞争结合,抗HBcELISA试剂盒一般采用此法。另一种模式为将标本与抗原一起加入到固相抗体中进行竞争结合,洗涤后再加入酶标抗体,与结合在固相上的抗原反应。抗HBe的检测一般采用此法。

小鼠转化生长因子α(TGF-α)ELISA试剂盒 ,英文名: TGF-α ELISA Kit

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小鼠主要组织相容性复合体Ⅲ类(MHC-Ⅲ/H-2Ⅲ)ELISA试剂盒 ,英文名: MHC-Ⅲ/H-2Ⅲ ELISA Kit

小鼠主要组织相容性复合体Ⅱ类(MHC-Ⅱ/H-2Ⅱ)ELISA试剂盒 ,英文名: MHC-Ⅱ/H-2ⅡELISA Kit

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小鼠肿瘤特异生长因子/肿瘤相关因子(TSGF)ELISA试剂盒 ,英文名: TSGF ELISA Kit

小鼠肿瘤特异生长因子/肿瘤相关因子(TGSF)ELISA试剂盒 ,英文名: TGSF ELISA Kit

小鼠肿瘤坏死因子样细胞凋亡弱诱导因子(TWEAK)ELISA试剂盒 ,英文名: TWEAK ELISA Kit
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