PCR扩增后的DNA片段在后续实验(如电泳检测、克隆、测序)中需保持完整性和浓度稳定。不同的保存温度会影响DNA的化学结构完整性与酶活性残留,进而影响实验结果可靠性 9。综合现有信息,可以从短期、中期和长期三个维度评估不同温度下的稳定性表现。 不同保存温度对PCR产物稳定性的影响对 
(补充说明)虽然搜索结果中没有直接针对“不同温度梯度"的系统性实验数据,但根据分子生物学常规实践及文献推断,低温是维持DNA稳定的核心条件 9。例如,在4℃下存放超过48小时可能导致非特异性扩增或假阴性结果;而-20℃以下则能大幅减缓水解反应和氧化损伤。 此外: 纯化状态有影响:纯化的PCR产物若溶于Tris缓冲液可在-20℃保存1–2个月,但不可用纯水溶解,以防pH不稳定导致降解 。 反复冻融加剧破坏:即使在-20℃保存,频繁取出使用也会因温度波动造成累积性损伤,因此建议分装保存 。 为确保PCR产物在不同温度下保持稳定性: 短期使用存4℃:计划在24–48小时内使用的样品可暂存4℃; 长期保存务必冷冻:超过一周不用应立即分装并存于-20℃或-80℃; 避免热循环冲击:从低温取出后应快速操作并在冰上进行,解冻后尽快重新冷冻; 选用合适溶剂:优先使用TE缓冲液而非ddH₂O溶解纯化产物,以增强稳定性
|