确保标准曲线重复性的准确性,核心在于标准溶液配制、仪器操作、数据测量与处理这三个环节的严格把控。 一、标准溶液配制:精准是基础 选对标准物质:纯度要高、稳定性好,且化学性质与待测物尽量接近,这是准确性的前提。 浓度范围要合理:覆盖待测样品的可能浓度,通常设5-7个梯度点(低、中、高浓度),避免范围过窄或过宽影响精度。 配制过程要规范:用精确的计量器具(如容量瓶、移液管),严格按规程操作,避免污染和误差。 二、仪器操作:稳定是关键 充分预热仪器:一般预热15-30分钟,让光源和检测器达到稳定状态,减少测量误差。 选准测量波长:根据待测物的吸收特性,选择吸收波长,提高灵敏度和准确性。 正确使用比色皿:石英比色皿用于紫外-可见光区,玻璃比色皿用于可见光区,确保清洁无划痕,测量时位置和方向保持一致。 设置好参比溶液:通常用去离子水或空白溶液,消除背景吸收和仪器噪声,测量前记得调零。 三、数据测量与处理:严谨是保障 重复测量取平均:每个标准溶液测3-5次,取平均值作为吸光度值,减少随机误差。 准确记录数据:浓度和吸光度值都要记录完整,确保数据可追溯。 注意基质干扰:标准系列和待测样品的基体要尽量一致,必要时用标准加入法或Youden曲线分析干扰。 定期核查曲线:每天或每批样品测前,用中间浓度点验证斜率和截距的稳定性,确保曲线可靠。 总之,从配制到测量再到数据处理,每一步都严格按规范操作,标准曲线的重复性就能得到保障。
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