关于抗体长期保存,核心就两点:分装防冻融和低温加保护剂。我来给你捋一捋具体怎么做: 一、分装保存,避免反复冻融 按需分装:把抗体分成小份(比如50-100μl/管),用一次解冻一管,别反复冻融,否则蛋白容易变性失活。 选对容器:用无菌、耐低温的冻存管或离心管,密封要好,防止污染或水分蒸发。 短期保存:解冻后如果一周内还要用,可以放4℃冷藏,但别超过1-2周,时间长了活性会下降。 二、低温储存,加保护剂 短期保存:放4℃冷藏,适合3-6个月内要用的抗体。 长期保存:加50%甘油或乙二醇,存-20℃或-80℃,能放1-2年甚至更久。 超长期保存:条件允许的话,用液氮快速冷冻,存-80℃或液氮,能限度保持活性。 三、加保护剂和防腐剂 保护剂:加甘油、蔗糖、BSA等,能减少冰晶损伤,稳定蛋白结构。 防腐剂:加0.02%叠氮钠或0.01%硫柳汞,防细菌污染。 四、控制冻存条件 快速冷冻:用液氮快速冷冻,减少冰晶对蛋白的伤害。 缓慢解冻:放冰上或4℃冰箱慢慢解冻,别用高温水浴,避免温度骤变。 五、其他注意事项 避光:光照可能让抗体失活,尽量避光保存。 定期检查:每3-6个月看看抗体有没有沉淀、浑浊或分层,有异常及时处理。 高浓度保存:抗体浓度高于1mg/ml,稀的容易失活。 六、不同抗体的保存方法 多克隆抗体:加50%甘油存-20℃,或直接存-20℃。 单克隆抗体:加50%甘油存-20℃,或加饱和硫酸铵存4℃/-20℃。 酶标抗体:对冻融特别敏感,一定要分装,避免反复冻融。 七、冻干保存 原理:低温低气压下让水分升华,得到冻干粉,能放2年以上。 适用情况:研究价值高、不易制备或需长期留样的抗体。 八、实验验证 设计实验:比较不同保护剂、缓冲液和冻存条件的效果,选方案。 定期检测:用ELISA、中和试验等方法定期测抗体活性,确保质量。
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