细胞培养操作规程: 一.培养基及培养冻存条件准备: 1)SV-40转化肺成纤维细胞;WI38/VA13价格准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。 2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。 3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。 二.细胞处理: 1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。 2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。 对于悬浮细胞,传代可参考以下方法: 方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 产品描述: 细胞名称 SV-40转化肺成纤维细胞;WI38/VA13价格 形态特性上皮细胞样 生长特性贴壁生长 特征特性该细胞1964年建系,源自3个月胎龄的女性胚胎的肺成纤维细胞,经SV-40转化。 培养条件MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)10%FBS 传代方法1:2~1:10传代,每周换液2次 传代情况C2 冻存条件基础培养基+8%DMSO+20%FBS 支原体检测培养法(-) STR 同工酶 染色体45~89
注意事项: 1.一般客户拿到SV-40转化肺成纤维细胞;WI38/VA13价格后,应该注意什么? 客户收到细胞先不开盖,放在培养箱静置若干小时后(看细胞密度而定)在倒置显微镜下观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议受收细胞时的培养基拍一张照片,观察培养基的颜色和是否有漏液情况,显微镜下拍细胞100X,200X各一张),排除细胞本身污染的情况;收到细胞未开封,出现污染状况我们负责免费发送一株细胞。 收到细胞时如无异常情况,请在显微镜下观察细胞密度,如为贴壁细胞,未超过80%汇合度时,将培养瓶中培养液吸出,留下10ml培养液继续培养;超过80%汇合度时,请按细胞培养条件传代培养。如为悬浮细胞,吸出培养液、1000转/分钟离心2分钟,吸出上清,管底细胞用新鲜培养基悬浮细胞后移回培养瓶。 细胞出现问题,不予以重发的情况有哪些? (1)客户造成细胞污染,不重发; (2)客户不正确操作致细胞状态不好,不重发; (3)非推荐细胞培养体系致的细胞状态不好,不重发; (4)细胞状态不好,未提供细胞培养前3天照片的,不重发; (5)细胞培养时经其它处理的,不重发; (6)细胞收到2天内,未告知,不重发; (7)视具体情况而定。 ANP*小鼠心钠肽规格48T/96T 小鼠心肌转录因子GATA4ELISAKit,48T/96T*小鼠心肌转录因子GATA4ELISAKit,48T/96T规格48T/96T CT-1*小鼠心肌营养素1规格48T/96T cTn-Ⅰ*小鼠心肌肌钙蛋白Ⅰ规格48T/96T cTn-Ⅰ*小鼠心肌肌钙蛋白Ⅰ规格48T/96T TAFI*小鼠纤溶抑制因子规格48T/96T PAI-1*小鼠纤溶酶原激活物抑制因子1规格48T/96T PAI*小鼠纤溶酶原激活物抑制因子规格48T/96T PAP*小鼠纤溶酶抗纤溶酶复合物规格48T/96T FN*小鼠纤连蛋白规格48T/96T SV-40转化肺成纤维细胞;WI38/VA13价格CREB结合蛋白抗原CBP(CREB-bindingprotein)CREB结合蛋白抗原0.5mgCBP(CREB-bindingprotein CBX3/HP1gamma染色盒同源物3抗原CBX3/HP1gamma染色盒同源物3抗原0.5mgCBX3/HP1gamma染色盒同源物3抗原 CBX5(ChromoboxHomolog5)CBX5(多肽)0.5mgCBX5(ChromoboxHomolog5 抗原CC16(Claracellprotein16)peptide克拉拉细胞蛋白(Clara细胞分泌蛋白)抗原0.5mgCC16(Claracellprotein16 CCK8(Cholecystokinin-8)胆囊收缩素/缩胆囊素(八肽)0.5mgCCK8(Cholecystokinin-8 CCL1/TCA3/I-309嗜酸粒细胞趋化蛋白CCL1抗原CCL1/TCA3/I-309嗜酸粒细胞趋化蛋白CCL1抗原0.5mgCCL1/TCA3/I-309嗜酸粒细胞趋化蛋白CCL1抗原 单核细胞趋化蛋白5抗原CCL12/MCP-5(C-Cmotifchemokine12)单核细胞趋化蛋白5抗原0.5mgCCL12/MCP-5(C-Cmotifchemokine12 嗜酸粒细胞趋化蛋白14抗原CCL14/HCC-1(C-Cmotifchemokine14)嗜酸粒细胞趋化蛋白14抗原0.5mgCCL14/HCC-1(C-Cmotifchemokine14 冷冻保存细胞之方法: SV-40转化肺成纤维细胞;WI38/VA13价格冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ (-20 ℃30 分钟*) → -80 ℃16~18 小时(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 长期储存。 冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 ℃不可超过1 小时, 以防止冰晶过大,造成细胞大量死亡,亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。 |