冷冻保存细胞之方法：
人肾皮质近曲小管上皮细胞；HK-2图片冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ （-20 ℃30 分钟*） → -80 ℃16~18 小时（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 长期储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 ℃不可超过1 小时， 以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
产品描述：
细胞名称 人肾皮质近曲小管上皮细胞；HK-2图片
形态特性上皮细胞样 生长特性贴壁生长 特征特性该细胞属源于正常肾的近曲小管细胞，通过导入HPV-16E6/E7基因而获得永生化。将含有HPV-16E6/E7基因的重组的逆转录病毒载体pLXSN16E6/E7转染外生包装细胞Psi-2，Psi-2细胞产生的病毒再去感染兼嗜性包装细胞系PA317，后将PA317产生的病毒颗粒导入正常的肾皮质近曲小管细胞。尽管pLXSN16E6/E7中含有新霉素抗性，但未用G418筛选转导克隆。Southern和FISH分析显示HK-2细胞来源于单克隆。PCR检测证实HK-2细胞基因组中含有E6/E7基因。 培养条件DMEM/F12(1:1):Ham'sF12/DMEMedium(DMEH-16/F-1250%Mixturew/oHEPES,withNEAAMedium)10%FBS 传代方法1:4传代；2~3天换液1次。 传代情况P9 冻存条件基础培养基+5%DMSO+20%FBS 支原体检测培养法（-） STRAmelogenin：X；CSF1PO：13；D13S317：9；D16S539：11，12；D18S51：12；D19S433：15，15.2；D21S11：28，30；D2S1338：17，25；D3S1358：16，17；D5S818：12；D7S820：10，11；D8S1179：10，14；FGA：20，22；TH01：9；TPOX：8，9；vWA：17，18； 同工酶 染色体57~60
细胞培养操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）人肾皮质近曲小管上皮细胞；HK-2图片准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
注意事项：
1.一般客户拿到人肾皮质近曲小管上皮细胞；HK-2图片后，应该注意什么？
客户收到细胞先不开盖，放在培养箱静置若干小时后（看细胞密度而定）在倒置显微镜下观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照（建议受收细胞时的培养基拍一张照片，观察培养基的颜色和是否有漏液情况，显微镜下拍细胞100X，200X各一张），排除细胞本身污染的情况；收到细胞未开封，出现污染状况我们负责免费发送一株细胞。
收到细胞时如无异常情况，请在显微镜下观察细胞密度，如为贴壁细胞，未超过80%汇合度时，将培养瓶中培养液吸出，留下10ml培养液继续培养；超过80%汇合度时，请按细胞培养条件传代培养。如为悬浮细胞，吸出培养液、1000转/分钟离心2分钟，吸出上清，管底细胞用新鲜培养基悬浮细胞后移回培养瓶。
细胞出现问题，不予以重发的情况有哪些？
（1）客户造成细胞污染，不重发；
（2）客户不正确操作致细胞状态不好，不重发；
（3）非推荐细胞培养体系致的细胞状态不好，不重发；
（4）细胞状态不好，未提供细胞培养前3天照片的，不重发；
（5）细胞培养时经其它处理的，不重发；
（6）细胞收到2天内，未告知，不重发；
（7）视具体情况而定。
OVAsIgE*小鼠卵清蛋白特异性IgE规格48T/96T 小鼠卵巢癌标志物CA125ELISAKit，48T/96T*小鼠卵巢癌标志物CA125ELISAKit，48T/96T规格48T/96T TrxR*小鼠硫氧还蛋白还原酶规格48T/96T Trx*小鼠硫氧化还原蛋白规格48T/96T PIAb-IgG/IgM*小鼠磷脂酰肌醇抗体IgG/IgM规格48T/96T PL-A2*小鼠磷脂酶A2规格48T/96T PI3K*小鼠磷酸肌醇3激酶规格48T/96T pERK*小鼠磷酸化细胞外信号调节激酶规格48T/96T P-PKC*小鼠磷酸化蛋白激酶C规格48T/96T 小鼠淋巴细胞因子ELISAKit，48T/96T*小鼠淋巴细胞因子ELISAKit，48T/96T规格48T/96T
人肾皮质近曲小管上皮细胞；HK-2图片细胞角蛋白5抗原CK5(Cytokeratin5)细胞角蛋白5抗原0.5mgCK5(Cytokeratin5 CK7细胞角蛋白7CK7细胞角蛋白70.5mgCK7细胞角蛋白7 human细胞角蛋白7抗原CK7(Cytokeratin7)human细胞角蛋白7抗原0.5mgCK7(Cytokeratin7 CK8(Cytokeratin8)细胞角蛋白8（多肽）0.5mgCK8(Cytokeratin8 酪蛋白激酶2相互作用蛋白1抗原CKIP-1(caseinkinase2interactionprotein1)酪蛋白激酶2相互作用蛋白1抗原0.5mgCKIP-1(caseinkinase2interactionprotein1 CKLF1趋化素样蛋白CKLF1趋化素样蛋白0.5mgCKLF1趋化素样蛋白 CKR-L2(Gprotein-coupledreceptor-2)G蛋白偶联受体-2(抗原)0.5mgCKR-L2(Gprotein-coupledreceptor-2 Claudin-11peptide少突胶质细胞跨膜蛋白抗原Claudin-11peptide少突胶质细胞跨膜蛋白抗原0.5mgClaudin-11peptide少突胶质细胞跨膜蛋白抗原 |
