产品描述：
细胞名称 人胚胎膀胱组织来源细胞；CCC-HB-2说明书
形态特性上皮样 细胞培养操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）人胚胎眼巩膜成纤维细胞；HFSF说明书准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
产品描述：
细胞名称 人胚胎眼巩膜成纤维细胞；HFSF说明书
形态特性成纤维细胞样 生长特性贴壁生长 特征特性北京眼科研究所建系。 培养条件DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBS 传代方法1:2~1:3传代；3~4天1次。 传代情况P5 冻存条件基础培养基+5%DMSO+20%FBS 支原体检测培养法（-） STRAmelogenin：X，Y；CSF1PO：10，12；D13S317：10，11；D16S539：9，13；D18S51：17，18；D19S433：13，14；D21S11：31，32.2；D2S1338：18，19；D3S1358：15；D5S818：10，12；D7S820：11；D8S1179：10，16；FGA：18，22；TH01：7，10；TPOX：8；vWA：14； 同工酶 染色体
注意事项：
1.一般客户拿到人胚胎眼巩膜成纤维细胞；HFSF说明书后，应该注意什么？
客户收到细胞先不开盖，放在培养箱静置若干小时后（看细胞密度而定）在倒置显微镜下观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照（建议受收细胞时的培养基拍一张照片，观察培养基的颜色和是否有漏液情况，显微镜下拍细胞100X，200X各一张），排除细胞本身污染的情况；收到细胞未开封，出现污染状况我们负责免费发送一株细胞。
收到细胞时如无异常情况，请在显微镜下观察细胞密度，如为贴壁细胞，未超过80%汇合度时，将培养瓶中培养液吸出，留下10ml培养液继续培养；超过80%汇合度时，请按细胞培养条件传代培养。如为悬浮细胞，吸出培养液、1000转/分钟离心2分钟，吸出上清，管底细胞用新鲜培养基悬浮细胞后移回培养瓶。
细胞出现问题，不予以重发的情况有哪些？
（1）客户造成细胞污染，不重发；
（2）客户不正确操作致细胞状态不好，不重发；
（3）非推荐细胞培养体系致的细胞状态不好，不重发；
（4）细胞状态不好，未提供细胞培养前3天照片的，不重发；
（5）细胞培养时经其它处理的，不重发；
（6）细胞收到2天内，未告知，不重发；
（7）视具体情况而定。
sLR*小鼠可溶性瘦素受体规格48T/96T sRANKL*小鼠可溶性核因子κB受体活化因子配基规格48T/96T B7-2/sCD86*小鼠可溶性白细胞分化抗原86规格48T/96T sCD40L*小鼠可溶性白细胞分化抗原40配体规格48T/96T sCD30L*小鼠可溶性白细胞分化抗原30配体规格48T/96T sCD30*小鼠可溶性白细胞分化抗原30规格48T/96T sP-selectin*小鼠可溶性P选择素规格48T/96T sE-selectin*小鼠可溶性E选择素规格48T/96T ENG/sCD105*小鼠可溶性Endoglin规格48T/96T Gzms-B*小鼠颗粒酶B规格48T/96T
人胚胎眼巩膜成纤维细胞；HFSF说明书C型钠尿肽抗原CNP/CNPase(2',3'-cyclic-nucleotide3'-phosphodiesterase)C型钠尿肽抗原0.5mgCNP/CNPase(2',3'-cyclic-nucleotide3'-phosphodiesterase 睫状神经营养因子抗原CNTF(CiliaryNeurotrophicFactor)睫状神经营养因子抗原0.5mgCNTF(CiliaryNeurotrophicFactor I型胶原蛋白CollagenI(Anti-CollagenTypeI)I型胶原蛋白0.5mgCollagenI(Anti-CollagenTypeI CollagenIII(Anti-CollagenTypeIII)抗Ⅲ型胶原抗原(CollagenⅢⅢ型胶原)0.5mgCollagenIII(Anti-CollagenTypeIII CollagenIII(Anti--CollagenTypeIII)Ⅲ型胶原抗原(CollagenⅢⅢ型胶原)0.5mgCollagenIII(Anti--CollagenTypeIII CollagenIVIV型胶原(CollagenⅣⅣ型胶原)0.5mgCollagenIVIV型胶原(CollagenⅣⅣ型胶原 CollagenV(Anti--CollagenTypeV)Ⅴ型胶原(多肽)0.5mgCollagenV(Anti--CollagenTypeV COMP软骨寡聚基质蛋白抗原COMP软骨寡聚基质蛋白抗原0.5mgCOMP软骨寡聚基质蛋白抗原
冷冻保存细胞之方法：
人胚胎眼巩膜成纤维细胞；HFSF说明书冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ （-20 ℃30 分钟*） → -80 ℃16~18 小时（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 长期储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 ℃不可超过1 小时， 以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。 生长特性贴壁生长 特征特性取材自引产的11周男性胚胎组织，由中国医学科学院基础医学研究所细胞资源中心建立。 培养条件DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)20%FBS 传代方法1:3传代；3~4天1次。 传代情况P5 冻存条件基础培养基+5%DMSO+20%FBS 支原体检测培养法（-） STRAmelogenin：X，Y；CSF1PO：10，12；D13S317：9，11；D16S539：11，13；D18S51：12，13；D19S433：13，14；D21S11：29；D2S1338：17，23；D3S1358：16；D5S818：9，11；D7S820：10，12；D8S1179：10，13；FGA：21，25；TH01：7，9；TPOX：8，11；vWA：14，16； 同工酶 染色体
冷冻保存细胞之方法：
人胚胎膀胱组织来源细胞；CCC-HB-2说明书冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ （-20 ℃30 分钟*） → -80 ℃16~18 小时（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 长期储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 ℃不可超过1 小时， 以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
细胞培养操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）人胚胎膀胱组织来源细胞；CCC-HB-2说明书准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
BDNF*小鼠脑源性神经营养因子规格48T/96T BNP*小鼠脑钠素/脑钠尿肽规格48T/96T NGB*小鼠脑红蛋白规格48T/96T BGP/Gehrelin*小鼠脑肠肽规格48T/96T visfatin*小鼠内脂素/内脏脂肪素规格48T/96T vaspin*小鼠内脏脂肪特异性丝氨酸蛋白酶抑制剂规格48T/96T EL*小鼠内皮脂肪酶规格48T/96T ES*小鼠内皮抑素规格48T/96T eNOS-3*小鼠内皮型一氧化氮合成酶3规格48T/96T eNOS*小鼠内皮型一氧化氮合成酶规格48T/96T
人胚胎膀胱组织来源细胞；CCC-HB-2说明书ChRM2(MuscarinicAcetylcholinereceptorM2)毒蕈碱型乙酰胆碱受体M2（抗原）0.5mgChRM2(MuscarinicAcetylcholinereceptorM2 ChRM2(MuscarinicAcetylcholinereceptorM2)毒蕈碱型乙酰胆碱受体（抗原）0.5mgChRM2(MuscarinicAcetylcholinereceptorM2 ChRM3peptide毒蕈碱型乙酰胆碱受体M3抗原ChRM3peptide毒蕈碱型乙酰胆碱受体M3抗原0.5mgChRM3peptide毒蕈碱型乙酰胆碱受体M3抗原 CHRNA7(Nicotinic-Acetylcholinereceptoralpha7)烟碱型乙酰胆碱受体α7(多肽)0.5mgCHRNA7(Nicotinic-Acetylcholinereceptoralpha7 CIDEBpeptideCIDEB抗原CIDEBpeptideCIDEB抗原0.5mgCIDEBpeptideCIDEB抗原 C-jun/AP-1(OncoproteinC-jun：activeprotein1)原癌基因蛋白（活化蛋白1）（抗原）0.5mgC-jun/AP-1(OncoproteinC-jun：activeprotein1 peptide细胞角蛋白1/8/19抗原CK1/8/19(Cytokeratin1/8/19;Keratin1/8/19)peptide细胞角蛋白1/8/19抗原0.5mgCK1/8/19(Cytokeratin1/8/19;Keratin1/8/19 CK14/17/42/10peptide细胞角蛋白14抗原CK14/17/42/10peptide细胞角蛋白14抗原0.5mgCK14/17/42/10peptide细胞角蛋白14抗原
注意事项：
1.一般客户拿到人胚胎膀胱组织来源细胞；CCC-HB-2说明书后，应该注意什么？
客户收到细胞先不开盖，放在培养箱静置若干小时后（看细胞密度而定）在倒置显微镜下观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照（建议受收细胞时的培养基拍一张照片，观察培养基的颜色和是否有漏液情况，显微镜下拍细胞100X，200X各一张），排除细胞本身污染的情况；收到细胞未开封，出现污染状况我们负责免费发送一株细胞。
收到细胞时如无异常情况，请在显微镜下观察细胞密度，如为贴壁细胞，未超过80%汇合度时，将培养瓶中培养液吸出，留下10ml培养液继续培养；超过80%汇合度时，请按细胞培养条件传代培养。如为悬浮细胞，吸出培养液、1000转/分钟离心2分钟，吸出上清，管底细胞用新鲜培养基悬浮细胞后移回培养瓶。
细胞出现问题，不予以重发的情况有哪些？
（1）客户造成细胞污染，不重发；
（2）客户不正确操作致细胞状态不好，不重发；
（3）非推荐细胞培养体系致的细胞状态不好，不重发；
（4）细胞状态不好，未提供细胞培养前3天照片的，不重发；
（5）细胞培养时经其它处理的，不重发；
（6）细胞收到2天内，未告知，不重发；
（7）视具体情况而定。 |
