产品名称 | 人体角膜成纤维细胞提取物 | 英文名称 | Human Eye: Normal Corneal Cells Derivatives | 货号 | EYX99075 |
人体角膜成纤维细胞提取物【Human Eye: Normal Corneal Cells Derivatives】 人角膜成纤维细胞分离自正常人角膜结缔组织,主要功能:(1)成纤维细胞是结缔组织中见的一种细胞。(2)可在角膜创伤后修复组织。所有的产品在发货之前均经过严格的QA/QC流程以确保其质量。这些产品可以直接用于基因克隆,表达图谱分析以及各种分子生物学实验的研究。 总RNA制备:利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol试剂分离RNA,然后用Qiagen RNA Clean Kit进行纯化。生物科技提供的总RNA样品附有RNA样品总浓度、总含量、电泳照片、OD值测定结果等。 cDNA制备:纯化后的总RNA来合成cDNA第一链,以50ul总反应体系进行逆转录,体系中包括MMLV反转录酶和随机引物以及10mg总RNA。68℃反应10min 后终止RT反应。利用1x RT Buffer 运输cDNA,1 ul cDNA 足够做一次PCR反应。所有cDNA产品在订单发货之前都经过了严格的QA/QC分析,保证了产品的质量。 蛋白制备:利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制备人关节软骨组织裂解液,离心去除组织碎片,通过Bio-Rad蛋白检测试剂盒测定蛋白浓度,组织蛋白稀释后用非还原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巯基乙醇及PMSF,-80度保存。 
实验要点及说明: 1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法; 2.所使用的盖玻片应该为优质玻璃,并经过铬酸洗液处理; 3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻; 4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率; 5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
 操作要点: 1)将培养基在37℃水浴锅预热;准备一个15mL无菌的离心管,加入8mL预热培养基。 2)将冻存细胞从液氮罐中取出,快速放入37℃水浴锅中复温(可准备一洁净的烧杯,装满37℃的水,细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内,再逐步转移到水浴锅中)。轻轻晃动冻存管,使细胞能在1~2min内*解冻,使细胞能尽快通过易受损的温度段(-5~0℃)。注意冻存管管口不能没入水中,BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。 3)用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内,将管内细胞转移至准备好的离心管内,轻轻吹打液体,使细胞均匀分散,降低DMSO浓度,吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次,均转移至离心管内。 4)800rpm离心5min,弃上清,加入新鲜的培养基,吹打制成细胞悬液。 5)将细胞悬液转移至T25细胞瓶内,补加适量的培养基,轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀,放入温箱内培养。 6)第二天观察细胞贴壁生长情况,换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养,待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代,细胞活力恢复后才能进行后续的实验。 鼠源性成分快速鉴别试剂盒 PCR法测/盒Dronedarone hydrochloride1416253盐酸决奈达隆 鱼源性成分快速鉴别试剂盒 PCR法测/盒Dromostanolone propionate5212屈他雄酮酯 牦牛源性成分快速鉴别试剂盒 PCR法测/盒Drevogenin A1633 海狸鼠源性成分快速鉴别试剂盒 PCR法测/盒Dregeoside Ga1986656 兔源性成分快速鉴别试剂盒 PCR法测/盒Dregeoside Da1986655 N-Acetyl-5-hydroxytryptamine 中文名:N-乙酰基-5-羟基色胺 分子式:C12H14N2O2 度:99.0% 小鼠αN已酰基葡糖苷酶elisa试剂盒 小鼠αN已酰基葡糖苷酶试剂盒 规格型号:96T/48T 小鼠αN已酰基葡糖苷酶试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:elisa试剂盒(进口分装),产品别名:小鼠αN已酰基葡糖苷酶试剂盒、小鼠αN已酰基葡糖苷酶eisa试剂盒 保存条件:2-8℃ 保质期:6个月。 2-Amino-2',5-dichlorobenzophenone 中文名:2-氨基-2',5-二氯二苯酮 分子式:C13H9Cl2NO 度:99.0% 小鼠αL岩藻糖苷酶elisa试剂盒 小鼠αL岩藻糖苷酶试剂盒 规格型号:96T/48T 小鼠αL岩藻糖苷酶试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:elisa试剂盒(进口分装),产品别名:小鼠αL岩藻糖苷酶试剂盒、小鼠αL岩藻糖苷酶eisa试剂盒 保存条件:2-8℃ 保质期:6个月。 3-Allylrhodanine 中文名:3-烯丙基罗丹宁 分子式:C6H7NOS2 度:99.0% 小鼠αL艾杜糖苷酸酶elisa试剂盒 小鼠αL艾杜糖苷酸酶试剂盒 规格型号:96T/48T 小鼠αL艾杜糖苷酸酶试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:elisa试剂盒(进口分装),产品别名:小鼠αL艾杜糖苷酸酶试剂盒、小鼠αL艾杜糖苷酸酶eisa试剂盒 保存条件:2-8℃ 保质期:6个月。 Nandrolone laurate 中文名:月桂酸诺龙 分子式:C30H48O3 度:98.0% 小鼠α半乳糖基抗体(Gal)ELISA试剂盒 Androst-5-ene-3β,17β-diol 3,17-diacetate 中文名:雄甾-5-烯-3β,17β-二醇 3,17-二乙酸酯 分子式:C23H34O4 度:98.0% 小鼠αN已酰基葡糖苷酶(αNAG)ELISA试剂盒 乙基betaD吡喃葡萄糖苷 HPLC≥98% 5mg RaeceptoractivatorofnuclearfactorkappaBligand,RANKLELISA试剂盒大鼠核因子κB受体活化因子配基(RANKL)ELISA试剂盒规格:96T/48T 乙酸(肉)桂酯 HPLC≥98% 5mg RaegulatedonactivationinnormalT-cellexpressedandsecreted,RAESELISAKit大鼠正常T细胞表达和分泌因子(RAES/CCL5)ELISA试剂盒规格:96T/48T 乙酸Delta香树精酯 HPLC≥98% 5mg RaegulatedonactivationinnormalT-cellexpressedandsecreted,RAESELISA试剂盒大鼠正常T细胞表达和分泌因子(RAES/CCL5)ELISA试剂盒规格:96T/48T 乙酸茶酸酯 HPLC≥98% 5mg RaeninELISAKit大鼠肾素(Renin)ELISA试剂盒规格:96T/48T 乙酸东莨菪素酯 HPLC≥98% 5mg RaeninELISA试剂盒大鼠肾素(Renin)ELISA试剂盒规格:96T/48T 乙酸二聚松柏酯 HPLC≥98% 5mg raesistinELISAKit大鼠抵抗素(Resistin)ELISA试剂盒规格:96T/48T 乙酸六棱菊亭酯 HPLC≥98% 5mg raesistinELISA试剂盒大鼠抵抗素(Resistin)ELISA试剂盒规格:96T/48T 乙酸维生素E HPLC≥98% 20mg Raetinol-bindingprotein,RBPELISAKit大鼠视黄醇结合蛋白(RBP)ELISA试剂盒规格:96T/48T 乙酰胺 HPLC≥98% 5mg Raetinol-bindingprotein,RBPELISA试剂盒大鼠视黄醇结合蛋白(RBP)ELISA试剂盒规格:96T/48T 乙酰基异柏烯酸 HPLC≥98% 5mg Raetinolbindingprotein4,RBP-4ELISAKit大鼠视黄醇结合蛋白4(RBP-4)ELISA试剂盒规格:96T/48T 人体角膜成纤维细胞提取物Trazodone hydrochloride 中文名:盐酸曲唑酮 分子式:C19H23Cl2N5O GuanidineHydrochloride 500g trans-4-Aminocyclohexanol 中文名: 分子式:C6H13NO 月桂酰基麦芽糖苷 1g Tranexamic acid 中文名:凝血酸 分子式:C8H15NO2 N-Dodecyl-β-Maltoside Torososide A 中文名: 分子式:C38H32O15 新霉素 5g Topiramate 中文名:托吡酯 分子式:C12H21NO8S NeomycinSulfate 25g 运输和保存: 视天气状况和运输距离远近,公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。 1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中,置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输;收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养,如无法立刻进行复苏操作,冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。 2)T-25培养瓶充满*培养基后进行常温运输;收到细胞后请镜下观察细胞生长状态,如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作,如悬浮的细胞较多,请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。 一.培养基及培养冻存条件准备: 1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。 2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。 3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。 |