细胞培养操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）人急性早幼粒细胞白血病细胞；HL-60说明书准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
我司常期代理ATCC Acris abcam cst Biorbyt santa Novus sigma lifespan NEB roche ABI R&D millipore BD Qiagen Cayman Jackson Life GeneTex Bio-Rad DSHB tocris peprotech 等品牌；部分产品现货，超低比价，人急性早幼粒细胞白血病细胞；HL-60说明书货期短，价格优，售后齐全。点击进入了解更多肿瘤细胞。 产品描述：
细胞名称 人急性早幼粒细胞白血病细胞；HL-60说明书
形态特性髓样 生长特性悬浮 特征特性该细胞含有myc+致癌基因，受体表达：补体Fc；致瘤性：阳性。 培养条件IMDM:Iscove'sModiefiedDulbecco'sMedium20%FBS 传代方法每2-3天换液一次，细胞接种密度为1E+05/ml,不要超过1E+06/ml。 传代情况完成目录中显示细胞污染废弃 冻存条件 支原体检测 STR 同工酶 染色体
注意事项：
1.一般客户拿到人急性早幼粒细胞白血病细胞；HL-60说明书后，应该注意什么？
客户收到细胞先不开盖，放在培养箱静置若干小时后（看细胞密度而定）在倒置显微镜下观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照（建议受收细胞时的培养基拍一张照片，观察培养基的颜色和是否有漏液情况，显微镜下拍细胞100X，200X各一张），排除细胞本身污染的情况；收到细胞未开封，出现污染状况我们负责免费发送一株细胞。
收到细胞时如无异常情况，请在显微镜下观察细胞密度，如为贴壁细胞，未超过80%汇合度时，将培养瓶中培养液吸出，留下10ml培养液继续培养；超过80%汇合度时，请按细胞培养条件传代培养。如为悬浮细胞，吸出培养液、1000转/分钟离心2分钟，吸出上清，管底细胞用新鲜培养基悬浮细胞后移回培养瓶。
细胞出现问题，不予以重发的情况有哪些？
（1）客户造成细胞污染，不重发；
（2）客户不正确操作致细胞状态不好，不重发；
（3）非推荐细胞培养体系致的细胞状态不好，不重发；
（4）细胞状态不好，未提供细胞培养前3天照片的，不重发；
（5）细胞培养时经其它处理的，不重发；
（6）细胞收到2天内，未告知，不重发；
（7）视具体情况而定。
*TAb(MouseThyroxineantibody)ELISAKit小鼠甲状腺素抗体规格：48T *TRAb(Mousethyroidstimulatinghormonereceptorantidoby)ELISAKit小鼠抗促甲状腺素受体抗体规格：48T *CA(Mousecatecholamine)ELISAKit小鼠儿茶酚胺规格：48T *IL-27(MouseInterleukin27)ELISAKit小鼠白介素27规格：48T *IL-23(MouseInterleukin23)ELISAKit小鼠白介素23规格：48T *CT-1(Mousecardiotrophln1)ELISAKit小鼠心肌营养素1规格：48T *Alpha-FodrinIgG/IgA(Mouseanti-alpha-FodrinIgG/IgA)ELISAKit小鼠抗α-胞衬蛋白抗体IgG/IgA规格：48T *AT-III(MouseAnti-ThrombinIII)ELISAKit小鼠抗凝血酶Ⅲ抗体规格：48T *NP-Y(MouseneuropeptideY)ELISAKit小鼠神经肽Y规格：48T *GHRP(MouseGrowthHormoneReleasingPeptide)ELISAKit小鼠生长激素释放多肽规格：48T
人急性早幼粒细胞白血病细胞；HL-60说明书*Anti-Phospho-Lyn(Tyr396)磷酸化膜相关蛋白酪氨酸激酶Lyn抗体规格：0.1ml *Anti-Phospho-Lyn(Tyr497)磷酸化膜相关蛋白酪氨酸激酶Lyn抗体规格：0.1ml *Anti-LYVE-1淋巴管内皮透明质酸受体抗体规格：0.1ml *Anti-M2-PK/PKM2丙酮酸激酶-M2抗体规格：0.1ml *Anti-Phospho-PKM2(Tyr105)磷酸化丙酮酸激酶M2抗体规格：0.1ml *Anti-M2-PK(pyruvateKinaseM2)丙酮酸激酶-M2规格：0.1ml *anti-IntegrinalphaE2整合素alphaE2抗体规格：0.1ml *Anti-IntegrinalphaL/CD11a整合素αL抗体规格：0.1ml *Anti-CD11b/CD49d整合素αM/巨噬细胞表面分子抗体规格：0.1ml *Anti-IntegrinAlphaX/CD11c整合素αX抗体规格：0.1ml
冷冻保存细胞之方法：
人急性早幼粒细胞白血病细胞；HL-60说明书冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ （-20 ℃30 分钟*） → -80 ℃16~18 小时（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 长期储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 ℃不可超过1 小时， 以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。 |
