细胞培养操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）人骨肉瘤细胞；U-2 OS [U2OS；U2-OS；U-2OS]准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
我司常期代理ATCC Acris abcam cst Biorbyt santa Novus sigma lifespan NEB roche ABI R&D millipore BD Qiagen Cayman Jackson Life GeneTex Bio-Rad DSHB tocris peprotech 等品牌；部分产品现货，超低比价，人骨肉瘤细胞；U-2 OS [U2OS；U2-OS；U-2OS]货期短，价格优，售后齐点击进入了解更多肿瘤细胞。 产品描述：
细胞名称 人骨肉瘤细胞；U-2 OS [U2OS；U2-OS；U-2OS]
形态特性上皮细胞 生长特性贴壁生长 特征特性J.PontenandE.这株细胞(原名2T)源自15岁女孩的胫骨中等分化的肉瘤。与WI-38共培养或CF检测SV40，RSV或腺病毒时未检测到病毒。1972年发现支原体污染并去除。 培养条件RPMI1640(w/oHepes)热灭活马血清，10%；优质胎牛血清，5% 传代方法消化3-5分钟。1:2。3天内可长满。 传代情况PN5 冻存条件*培养基+8%DMSO 支原体检测阴性 STRAmelogenin:X；CSF1PO:13；D13S317:13；D16S539:11,12；D18S51:14；D19S433:15；D21S11:31；D2S1338:20,24；D3S1358:16；D5S818:11；D7S820:11,12；D8S1179:12,14；FGA:20；TH01:6,9.3；TPOX:11,12；vWA:14,18 同工酶 染色体
注意事项：
1.一般客户拿到人骨肉瘤细胞；U-2 OS [U2OS；U2-OS；U-2OS]后，应该注意什么？
客户收到细胞先不开盖，放在培养箱静置若干小时后（看细胞密度而定）在倒置显微镜下观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照（建议受收细胞时的培养基拍一张照片，观察培养基的颜色和是否有漏液情况，显微镜下拍细胞100X，200X各一张），排除细胞本身污染的情况；收到细胞未开封，出现污染状况我们负责免费发送一株细胞。
收到细胞时如无异常情况，请在显微镜下观察细胞密度，如为贴壁细胞，未超过80%汇合度时，将培养瓶中培养液吸出，留下10ml培养液继续培养；超过80%汇合度时，请按细胞培养条件传代培养。如为悬浮细胞，吸出培养液、1000转/分钟离心2分钟，吸出上清，管底细胞用新鲜培养基悬浮细胞后移回培养瓶。
细胞出现问题，不予以重发的情况有哪些？
（1）客户造成细胞污染，不重发；
（2）客户不正确操作致细胞状态不好，不重发；
（3）非推荐细胞培养体系致的细胞状态不好，不重发；
（4）细胞状态不好，未提供细胞培养前3天照片的，不重发；
（5）细胞培养时经其它处理的，不重发；
（6）细胞收到2天内，未告知，不重发；
（7）视具体情况而定。
*Anti-AEV/FITC荧光素标记禽脑脊髓炎病毒抗体IgG规格：0.2ml *Anti-AEBP1/FITC荧光素标记脂肪细胞增强结合蛋白1抗体IgG规格：0.2ml *Anti-AF6/Afadin/FITC荧光素标记兔抗人、大、小鼠丝状肌动蛋白结合蛋白抗体IgG规格：0.2ml *Anti-phospho-Afadin(Ser1718)/FITC荧光素标记兔抗人、大、小鼠磷酸化丝状肌动蛋白结合蛋白抗体IgG规格：0.2ml *Anti-AGER/RAGE/FITC荧光素标记晚期糖基化终末产物特异性受体抗体IgG规格：0.2ml *Anti-AGEs/FITC荧光素标记晚期糖基化终末产物抗体IgG规格：0.2ml *Anti-AGER/RAGE/Cy3荧光素Cy3标记晚期糖基化终末产物特异性受体抗体IgG规格：0.2ml *Anti-Aggrecan/FITC荧光素标记软骨蛋白聚糖/可聚蛋白多糖抗体IgG规格：0.2ml *Anti-Aggrecan2/ADAMTS-5/FITC荧光素标记软骨蛋白聚糖抗体IgG规格：0.2ml *Anti-Agrin/FITC荧光素标记聚集蛋白抗体IgG规格：0.2ml
人骨肉瘤细胞；U-2 OS [U2OS；U2-OS；U-2OS]*Anti-proCNP/NPPC促尿钠排泄肽前体C抗体规格：0.2ml *Anti-Nonylphenol任基酚抗体规格：0.2mg *Anti-NPM核仁磷酸蛋白抗体规格：0.2ml *Anti-Phospho-NPM(Ser4)磷酸化核仁磷酸蛋白抗体规格：0.1ml *Anti-Phospho-NPM(Thr95)磷酸化核仁磷酸蛋白抗体规格：0.1ml *Anti-Phospho-NPM(Thr199)磷酸化核仁磷酸蛋白抗体规格：0.1ml *Anti-NPY神经肽Y抗体规格：0.1ml *Anti-NPY2R神经肽Y受体2抗体规格：0.2ml *Anti-NPY1R神经肽Y1受体抗体规格：0.2ml *Anti-NQO1醌氧化还原酶抗体规格：0.2ml
冷冻保存细胞之方法：
人骨肉瘤细胞；U-2 OS [U2OS；U2-OS；U-2OS]冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ （-20 ℃30 分钟*） → -80 ℃16~18 小时（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 长期储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 ℃不可超过1 小时， 以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。 |
