冷冻保存细胞之方法：
人结直肠腺癌细胞；LoVo图片冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ （-20 ℃30 分钟*） → -80 ℃16~18 小时（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 长期储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 ℃不可超过1 小时， 以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
产品描述：
细胞名称 人结直肠腺癌细胞；LoVo图片
形态特性上皮细胞 生长特性贴壁生长 特征特性LoVo建自1971年，从诊断为结肠腺癌的56岁男性白人的一个转移到左锁骨上区的肿瘤结节建系。癌基因Ｃ-myc,K-ras,H-ras,N-ras,Myb,sis和fos的表达呈阳性。癌基因N-myc的表达未做检测。它在裸鼠中能成瘤。与107细胞联合皮下接种５只裸鼠21天后全部成瘤。表达肿瘤特异的核基质蛋白蛋白CC-3和CC-4。 培养条件F12K优质胎牛血清，10% 传代方法消化3-5分钟。1:2。3天内可长满。 传代情况P(29+5) 冻存条件*培养基+8%DMSO 支原体检测阴性 STRAmelogenin:X,Y；CSF1PO:10,11,13,14；D13S317:8,10,11；D16S539:9,12；D18S51:13,18；D19S433:14,15；D21S11:29,31.3；D2S1338:17,18；D3S1358:14,16,17,18；D5S818:11,13；D7S820:9.3,10,11；D8S1179:10；FGA:18,20；TH01:9.3；TPOX:8,9；vWA:17,18 同工酶 染色体
细胞培养操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）人结直肠腺癌细胞；LoVo图片准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
注意事项：
1.一般客户拿到人结直肠腺癌细胞；LoVo图片后，应该注意什么？
客户收到细胞先不开盖，放在培养箱静置若干小时后（看细胞密度而定）在倒置显微镜下观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照（建议受收细胞时的培养基拍一张照片，观察培养基的颜色和是否有漏液情况，显微镜下拍细胞100X，200X各一张），排除细胞本身污染的情况；收到细胞未开封，出现污染状况我们负责免费发送一株细胞。
收到细胞时如无异常情况，请在显微镜下观察细胞密度，如为贴壁细胞，未超过80%汇合度时，将培养瓶中培养液吸出，留下10ml培养液继续培养；超过80%汇合度时，请按细胞培养条件传代培养。如为悬浮细胞，吸出培养液、1000转/分钟离心2分钟，吸出上清，管底细胞用新鲜培养基悬浮细胞后移回培养瓶。
细胞出现问题，不予以重发的情况有哪些？
（1）客户造成细胞污染，不重发；
（2）客户不正确操作致细胞状态不好，不重发；
（3）非推荐细胞培养体系致的细胞状态不好，不重发；
（4）细胞状态不好，未提供细胞培养前3天照片的，不重发；
（5）细胞培养时经其它处理的，不重发；
（6）细胞收到2天内，未告知，不重发；
（7）视具体情况而定。
*Anti-AMPKbeta-1(phosphoSer182)/FITC荧光素标记兔抗人、大、小鼠磷酸化腺苷单磷酸活化蛋白激酶β1抗体IgG规格：0.2ml *Anti-AMPKBeta1/FITC荧光素标记腺苷单磷酸活化蛋白激酶β1抗体IgG规格：0.2ml *Anti-Amylin/FITC荧光素标记兔抗糖尿病相关肽/胰岛淀粉样肽抗体IgG规格：0.2ml *Anti-Ang-II/FITC荧光素标记血管紧张素II抗体IgG规格：0.2ml *Anti-ANG-2/FITC荧光素标记血管生成素-2抗体IgG规格：0.2ml *Anti-AnkyrinG/ANK-3/ankyrin3/FITC荧光素标记锚定蛋白G抗体IgG规格：0.2ml *Anti-ANGPTL1/ANG-1/FITC荧光素标记血管位蛋白样1/血管生成素样蛋白-1抗体IgG规格：0.2ml *Anti-ANGPTL2/ANG-2/FITC荧光素标记血管位蛋白样2/血管生成素样蛋白-2抗体IgG规格：0.2ml *Anti-ANGPTL4/ANG-4/FITC荧光素标记血管位蛋白样4/血管生成素样蛋白-4抗体IgG规格：0.2ml *Anti-AnnexinI/FITC荧光素标记人、大、小鼠膜粘连蛋白I抗体IgG规格：0.2ml
人结直肠腺癌细胞；LoVo图片*Anti-NT-3神经营养因子-3抗体规格：0.1ml *Anti-NT-4/NT-5神经生长因子4/5抗体规格：0.1ml *Anti-MT-ND1NADH复合体1抗体规格：0.2ml *Anti-NTCP钠离子/牛磺胆酸共转运蛋白规格：0.2ml *Anti-Neurturin神经生长因子抗体规格：0.1ml *Anti-Ntn1轴突导向因子1抗体规格：0.2ml *Anti-Nur77/GFRP孤儿核受体蛋白Nur77抗体规格：0.2ml *Anti-Phospho-Nur77(Ser351)磷酸化孤儿核受体蛋白Nur77抗体规格：0.1ml *Anti-NuMA核有丝分裂器NuMA蛋白抗体规格：0.2ml *Anti-Phospho-NuMA(Ser395)磷酸化核有丝分裂器NuMA蛋白抗体规格：0.1ml
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