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产品描述：
细胞名称 人组织细胞淋巴瘤细胞；U937 [U-937]说明书
形态特性单核细胞 生长特性悬浮生长 特征特性U-937细胞系由Sundstrom和Nilsson在1974年建立，取材于患组织细胞淋巴瘤病人的胸水。研究表明：U-937细胞能被人混合淋巴细胞培养上清，佛波脂、维生素D3、γ干扰素、肿瘤坏死因子和维甲酸诱导终末单核细胞分化。该细胞免疫球蛋白产物和EB病毒表达为阴性。该细胞表达Fas抗原且对TNF和抗-Fas抗体敏感。此细胞系从美国收集而来。 培养条件RPMI1640(w/oHepes)优质胎牛血清，10% 传代方法1:2。3天内可长满。 传代情况PN5 冻存条件*培养基+8%DMSO 支原体检测阴性 STRAmelogenin:X；CSF1PO:12；D13S317:10,12；D16S539:12；D18S51:13,14；D19S433:14,16；D21S11:27,29；D2S1338:17,20；D3S1358:16；D5S818:12；D7S820:9,11；D8S1179:12,13；FGA:22,25；TH01:6,9.3；TPOX:8,11；vWA:14,15 同工酶 染色体
冷冻保存细胞之方法：
人组织细胞淋巴瘤细胞；U937 [U-937]说明书冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ （-20 ℃30 分钟*） → -80 ℃16~18 小时（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 长期储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 ℃不可超过1 小时， 以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
细胞培养操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）人组织细胞淋巴瘤细胞；U937 [U-937]说明书准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
*Anti-CD14/FITC荧光素标记CD14蛋白抗体IgG规格：0.2ml *Anti-CD17/FITC荧光素标记CD17抗体IgG规格：0.2ml *Anti-CD18/LFA-1/FITC荧光素标记白细胞粘附蛋白抗体IgG规格：0.2ml *Anti-CD19/FITC荧光素标记CD19抗体IgG规格：0.2ml *Anti-Phospho-CD19(Tyr531)/FITC荧光素标记兔抗人、大、小鼠磷酸化CD19抗体IgG规格：0.2ml *Anti-CD19/PE荧光素PE标记CD19抗体IgG规格：0.2ml *Anti-CD20/FITC荧光素标记CD20抗体IgG规格：0.2ml *Anti-CD20/Biotin生物素化CD20抗体IgG规格：0.2ml *Anti-CD20/MS4A1/PE荧光素PE标记CD20抗体IgG规格：0.2ml *Anti-CD25/IL-2RA/PE-Cy5荧光素PE-Cy5标记兔抗人、大、小鼠白介素2受体a链抗体IgG规格：0.2ml
人组织细胞淋巴瘤细胞；U937 [U-937]说明书*Anti-Phospho-PTEN(Ser380/Thr382/Thr383)磷酸化肿瘤抑制基因PTEN抗体规格：0.1ml *Anti-PGE2前列腺素E2抗体规格：0.1ml *Anti-PTGEs前列腺素E合成酶抗体规格：0.2ml *Anti-PTHrP/PTHLH甲状旁腺激素相关蛋白抗体规格：0.1ml *Anti-PTN多效生长因子抗体规格：0.2ml *Anti-PTP/PTPase/CD148蛋白酪氨酸磷酸酶CD148抗体规格：0.2ml *Anti-PTP-1B蛋白酪氨酸磷酸酶-1B规格：0.1ml *Anti-Parvalbumin细小清蛋白抗体规格：0.1ml *Anti-PTTG垂体肿瘤转化基因抗体规格：0.2ml *Anti-PeptideYY/PYY酪酪肽抗体规格：0.2ml
注意事项：
1.一般客户拿到人组织细胞淋巴瘤细胞；U937 [U-937]说明书后，应该注意什么？
客户收到细胞先不开盖，放在培养箱静置若干小时后（看细胞密度而定）在倒置显微镜下观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照（建议受收细胞时的培养基拍一张照片，观察培养基的颜色和是否有漏液情况，显微镜下拍细胞100X，200X各一张），排除细胞本身污染的情况；收到细胞未开封，出现污染状况我们负责免费发送一株细胞。
收到细胞时如无异常情况，请在显微镜下观察细胞密度，如为贴壁细胞，未超过80%汇合度时，将培养瓶中培养液吸出，留下10ml培养液继续培养；超过80%汇合度时，请按细胞培养条件传代培养。如为悬浮细胞，吸出培养液、1000转/分钟离心2分钟，吸出上清，管底细胞用新鲜培养基悬浮细胞后移回培养瓶。
细胞出现问题，不予以重发的情况有哪些？
（1）客户造成细胞污染，不重发；
（2）客户不正确操作致细胞状态不好，不重发；
（3）非推荐细胞培养体系致的细胞状态不好，不重发；
（4）细胞状态不好，未提供细胞培养前3天照片的，不重发；
（5）细胞培养时经其它处理的，不重发；
（6）细胞收到2天内，未告知，不重发；
（7）视具体情况而定。 |
