冷冻保存细胞之方法：
人非小细胞肺癌细胞；NCI-H358说明书冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ （-20 ℃30 分钟*） → -80 ℃16~18 小时（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 长期储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 ℃不可超过1 小时， 以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
产品描述：
细胞名称 人非小细胞肺癌细胞；NCI-H358说明书
形态特性上皮细胞样 生长特性贴壁生长 特征特性1981年从一位开始化疗之前的患者的肿瘤组织中分离建株。超微结构研究表明细胞质中有Clara细胞的特征结构细胞表达主要的肺表面结合蛋白SP-A的蛋白和RNA。不表达SP-B和SP-C。他们在软琼脂中的克隆 成效率为0.83%。 培养条件RPMI1640(w/oHepes)优质胎牛血清，10% 传代方法消化3-5分钟。1:2。3天内可长满。 传代情况P(121+5) 冻存条件*培养基+8%DMSO 支原体检测阴性 STRAmelogenin:X,Y；CSF1PO:11，12；D13S317:8，12；D16S539:12，13；D18S51:14；D19S433:13，14；D21S11:28，30；D2S1338:17，23；D3S1358:14，18；D5S818:10,12；D7S820:10，11；D8S1179:13，14；FGA:20,21；TH01:6；TPOX:8，9；vWA:17 同工酶 染色体
细胞培养操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）人非小细胞肺癌细胞；NCI-H358说明书准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
注意事项：
1.一般客户拿到人非小细胞肺癌细胞；NCI-H358说明书后，应该注意什么？
客户收到细胞先不开盖，放在培养箱静置若干小时后（看细胞密度而定）在倒置显微镜下观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照（建议受收细胞时的培养基拍一张照片，观察培养基的颜色和是否有漏液情况，显微镜下拍细胞100X，200X各一张），排除细胞本身污染的情况；收到细胞未开封，出现污染状况我们负责免费发送一株细胞。
收到细胞时如无异常情况，请在显微镜下观察细胞密度，如为贴壁细胞，未超过80%汇合度时，将培养瓶中培养液吸出，留下10ml培养液继续培养；超过80%汇合度时，请按细胞培养条件传代培养。如为悬浮细胞，吸出培养液、1000转/分钟离心2分钟，吸出上清，管底细胞用新鲜培养基悬浮细胞后移回培养瓶。
细胞出现问题，不予以重发的情况有哪些？
（1）客户造成细胞污染，不重发；
（2）客户不正确操作致细胞状态不好，不重发；
（3）非推荐细胞培养体系致的细胞状态不好，不重发；
（4）细胞状态不好，未提供细胞培养前3天照片的，不重发；
（5）细胞培养时经其它处理的，不重发；
（6）细胞收到2天内，未告知，不重发；
（7）视具体情况而定。
*Anti-CD105/Endoglin/TGF-Betareceptor/RBITC红色荧光素罗丹明(RBITC)标记CD105/转化生长因子β受体抗体IgG规格：0.2ml *Anti-CD107a/LAMP-1/FITC荧光素标记溶酶体相关膜蛋白1抗体IgG规格：0.2ml *Anti-CD107a/LAMP-1/PE荧光素PE标记溶酶体相关膜蛋白1抗体IgG规格：0.2ml *Anti-nectin2/CD112/FITC荧光素标记细胞黏附分子CD112抗体IgG规格：0.2ml *Anti-CD117/FITC荧光素标记CD117抗体IgG规格：0.2ml *Anti-CD133Anti-gen/FITC荧光素标记造血干细胞抗原CD133抗体IgG规格：0.2ml *Anti-OX40/CD134/TNFRSF4/FITC荧光素标记CD134抗体IgG规格：0.2ml *Anti-IL-7Ra/CD127/PE荧光素PE标记兔抗人、大、小鼠、马、兔白细胞介素-7受体a抗体IgG规格：0.2ml *Anti-CD137/TNFRSF9/FITC荧光素标记CD137抗体IgG规格：0.2ml *Anti-CD133antigen/PE荧光素藻红蛋白标记兔抗人、大、小鼠和果蝇CD133抗体IgG规格：0.2ml
人非小细胞肺癌细胞；NCI-H358说明书*Anti-RXRAlpha/RXRA核受体RXRα抗体规格：0.2ml *Anti-RXRgamma维甲酸受体G抗体规格：0.2ml *Anti-RUNX1/AML1急性髓细胞白血病1蛋白抗体规格：0.2ml *Anti-phospho-RUNX1/AML1(Ser249)磷酸化急性髓细胞白血病1蛋白抗体规格：0.1ml *Anti-phospho-RUNX1(Ser303)磷酸化急性髓细胞白血病1蛋白抗体规格：0.1ml *Anti-Runx3Runx3抗体规格：0.1ml *Anti-S6PDH6-磷酸山梨醇脱氢酶抗体规格：1ml *Anti-S100BS100B蛋白抗体规格：0.1ml *Anti-S100A1S100A1抗体规格：0.1ml *Anti-S100A13S100A13抗体规格：0.1ml
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