冷冻保存细胞之方法：
C3H/An小鼠结缔组织细胞（L929-TK-）；LTK-培养冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ （-20 ℃30 分钟*） → -80 ℃16~18 小时（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 长期储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 ℃不可超过1 小时， 以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
产品描述：
细胞名称 C3H/An小鼠结缔组织细胞（L929-TK-）；LTK-培养
形态特性成纤维细胞样 生长特性贴壁生长 特征特性该细胞派源自于L-M(TK-)，表达5HT1Dβ受体。 培养条件DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBS 传代方法1:4~1:8传代；每周2次换液。 传代情况 冻存条件基础培养基+5%DMSO+20%FBS 支原体检测培养法（-） STR- 同工酶 染色体
细胞培养操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）C3H/An小鼠结缔组织细胞（L929-TK-）；LTK-培养准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
注意事项：
1.一般客户拿到C3H/An小鼠结缔组织细胞（L929-TK-）；LTK-培养后，应该注意什么？
客户收到细胞先不开盖，放在培养箱静置若干小时后（看细胞密度而定）在倒置显微镜下观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照（建议受收细胞时的培养基拍一张照片，观察培养基的颜色和是否有漏液情况，显微镜下拍细胞100X，200X各一张），排除细胞本身污染的情况；收到细胞未开封，出现污染状况我们负责免费发送一株细胞。
收到细胞时如无异常情况，请在显微镜下观察细胞密度，如为贴壁细胞，未超过80%汇合度时，将培养瓶中培养液吸出，留下10ml培养液继续培养；超过80%汇合度时，请按细胞培养条件传代培养。如为悬浮细胞，吸出培养液、1000转/分钟离心2分钟，吸出上清，管底细胞用新鲜培养基悬浮细胞后移回培养瓶。
细胞出现问题，不予以重发的情况有哪些？
（1）客户造成细胞污染，不重发；
（2）客户不正确操作致细胞状态不好，不重发；
（3）非推荐细胞培养体系致的细胞状态不好，不重发；
（4）细胞状态不好，未提供细胞培养前3天照片的，不重发；
（5）细胞培养时经其它处理的，不重发；
（6）细胞收到2天内，未告知，不重发；
（7）视具体情况而定。
*Anti-Phospho-MKK7(Ser271/Thr275)/FITC荧光素标记磷酸化丝裂原活化蛋白激酶MKK7抗体IgG规格：0.2ml *Anti-MKP-1/DUSP1/FITC荧光素标记丝裂原活化蛋白激酶磷酸酶-1抗体IgG规格：0.2ml *Anti-Phospho-MKP1(Ser359)/FITC荧光素标记磷酸化丝裂原活化蛋白激酶磷酸酶-1抗体IgG规格：0.2ml *Anti-Phospho-MKP1(Ser296+Ser318)/FITC荧光素标记磷酸化丝裂原活化蛋白激酶磷酸酶-1抗体IgG规格：0.2ml *Anti-MKP-2/DUSP4/FITC荧光素标记丝裂原活化蛋白激酶磷酸酶-2抗体IgG规格：0.2ml *Anti-MLK3/FITC荧光素标记丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶MLK3抗体IgG规格：0.2ml *Anti-Phospho-MLK3(Thr277/Ser281)/FITC荧光素标记磷酸化丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶MLK3抗体IgG规格：0.2ml *Anti-MLCK/FITC荧光素标记肌球蛋白轻链激酶抗体IgG规格：0.2ml *Anti-MyosinPhosphatase/FITC荧光素标记肌球蛋白磷酸酶抗体IgG规格：0.2ml *Anti-Phospho-MYPT1(Ser507)/FITC荧光素标记磷酸化肌球蛋白磷酸酶抗体IgG规格：0.2ml
C3H/An小鼠结缔组织细胞（L929-TK-）；LTK-培养*Anti-CXCR6/FITC荧光素标记细胞表面趋化因子受体6抗体IgG规格：0.2ml *Anti-CXCR7/RDC1/FITC荧光素标记细胞表面趋化因子受体7抗体IgG规格：0.2ml *Anti-CXorf36/FITC荧光素标记脱羧酶蛋白体36抗体IgG规格：0.2ml *Anti-CXorf36/FITC荧光素标记脱羧酶蛋白体36抗体IgG规格：0.2ml *Anti-CyclinA/FITC荧光素标记周期素A抗体IgG规格：0.2ml *Anti-CyclinB1/FITC荧光素标记周期素B1抗体IgG规格：0.2ml *Anti-Phospho-CyclinB1(Ser147)/FITC荧光素标记兔抗人、大、小鼠磷酸化周期素B1抗体IgG规格：0.2ml *Anti-Phospho-CyclinB1(Ser133)/FITC荧光素标记兔抗人、大、小鼠磷酸化周期素B1抗体IgG规格：0.2ml *Anti-CyclinC/FITC荧光素标记周期素C抗体IgG规格：0.2ml *Anti-CyclinD1/FITC荧光素标记周期素D1蛋白抗体规格：0.2ml
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