小鼠脑静脉血管平滑肌细胞提取物

小鼠脑静脉血管平滑肌细胞提取物【Mouse Brain: Normal Cerebral Venous Vascular Smooth Muscle Cells Derivatives】

小鼠脑静脉血管平滑肌细胞提取物是从小鼠原代脑静脉血管平滑肌细胞提取的，小鼠原代脑静脉血管平滑肌细胞从正常小鼠脑组织制备。所有的产品在发货之前均经过严格的QA/QC流程以确保其质量。这些产品可以直接用于基因克隆，表达图谱分析以及各种分子生物学实验的研究。

总RNA制备：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol试剂分离RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit进行纯化。生物科技提供的总RNA样品附有RNA样品总浓度、总含量、电泳照片、OD值测定结果等。
cDNA制备：纯化后的总RNA来合成cDNA第一链，以50ul总反应体系进行逆转录，体系中包括MMLV反转录酶和随机引物以及10mg总RNA。68℃反应10min 后终止RT反应。利用1x RT Buffer 运输cDNA，1 ul cDNA 足够做一次PCR反应。所有cDNA产品在订单发货之前都经过了严格的QA/QC分析，保证了产品的质量。
蛋白制备：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制备人关节软骨组织裂解液，离心去除组织碎片，通过Bio-Rad蛋白检测试剂盒测定蛋白浓度，组织蛋白稀释后用非还原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巯基乙醇及PMSF，-80度保存。

 实验要点及说明：

1．本方法适用于贴壁细胞培养，而不适用于悬浮细胞培养，悬浮细胞可使用滴片法；
2．所使用的盖玻片应该为优质玻璃，并经过铬酸洗液处理；
3．盖玻片非常薄，易碎，取放盖玻片时动作要轻；
4．如果需要更多生长状态一致的细胞，可以使用较大的培养皿，但不宜过大，以避免培养液的浪费和增加污染机率；
5．如果细胞贴壁生长能力较差，可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。

操作要点：

1）将培养基在37℃水浴锅预热；准备一个15mL无菌的离心管，加入8mL预热培养基。
2）将冻存细胞从液氮罐中取出，快速放入37℃水浴锅中复温（可准备一洁净的烧杯，装满37℃的水，细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内，再逐步转移到水浴锅中）。轻轻晃动冻存管，使细胞能在1~2min内*解冻，使细胞能尽快通过易受损的温度段（-5~0℃）。注意冻存管管口不能没入水中，BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内，将管内细胞转移至准备好的离心管内，轻轻吹打液体，使细胞均匀分散，降低DMSO浓度，吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次，均转移至离心管内。
4）800rpm离心5min，弃上清，加入新鲜的培养基，吹打制成细胞悬液。
5）将细胞悬液转移至T25细胞瓶内，补加适量的培养基，轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀，放入温箱内培养。
6）第二天观察细胞贴壁生长情况，换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养，待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代，细胞活力恢复后才能进行后续的实验。

卡那霉素 ELISA试剂盒96TMethylprednisolone hemisuccinate29217

乙氧基 ELISA试剂盒96TMethylprednisolone acetate536甲基泼尼松龙醋酸酯

四环素 ELISA试剂盒96TMethyl β-D-fructofuranoside1334甲基-β-D-呋喃果糖苷

雪卡毒素 ELISA试剂盒96TMethyl levulinate6245

磺胺喹恶啉 ELISA试剂盒96TMethyl chlorogenate2987绿原酸甲酯
Humanplasminogenactivatorinhibitor，PAIELISAKit人纤溶酶原激活物抑制因子(PAI)ELISA试剂盒规格：96T/48T  1-Methyl-3-nitrophthalate  中文名：  分子式：C9H7NO6 

Humanplasminogenactivator，PLGAELISAKit人纤溶酶原激活剂(PLGA)ELISA试剂盒规格：96T/48T  1-Methyl-5-nitro-1H-benzimidazole-2-butanoic acid ethyl ester  3543-72-4  中文名：  分子式：C14H17N3O4 

HumanPlasminogen，PlgELISAKit人纤溶酶原(Plg)ELISA试剂盒规格：96T/48T  1-Methyl-aminomethyl naphthalene  中文名：  分子式：C12H13N 

Humanplasmin-aiplasmincomplex,PAPELISAKit人纤溶酶抗纤溶酶复合物(PAP)ELISA试剂盒规格：96T/48T  1-Hydroxy-2-methylanthraquinone  中文名：1-羟基-2-甲基蒽醌  分子式：C15H10O3 

Humanplasmin/fibrinolysin,PL/FbnELISAKit人纤溶酶/纤维蛋白溶酶(PL/Fbn)ELISA试剂盒规格：96T/48T  1-Ethyl-3-nitrophthalate  16533-45-2  中文名：  分子式：C10H9NO6
西替利嗪  Cetirizine 2HCl  质量规格：>98%，进口分装 *化学封闭溶液10毫升

醋酸西曲瑞克  Cetrorelix Acetate  质量规格：>98%,BR 超声化鲑鱼精单链DNA10毫升

白屈菜红碱  Chelerythrine  质量规格：>98%,分析标准品 超氧化物歧化酶(SOD)标准曲线测定试剂盒5

醋酸氯己定  Chlorhexidine Acatate  质量规格：>98% 超氧化物歧化酶(SOD)标准曲线测定试剂盒5

氟伐他汀钠  Fluvastatin  salt  质量规格：>99%,BR 超氧化物歧化酶(SOD)红细胞裂解样品制备试剂盒50

氟伐他汀钠(标准品)  Fluvastatin  salt  质量规格：>99%,BR 超氧化物歧化酶(SOD)红细胞裂解样品制备试剂盒50

克林沙星  Clinafloxacin  质量规格：>98.5% 超氧化物歧化酶(SOD)活性检测试剂盒(附标准样)50

盐酸左旋咪唑  Levamisole HCl  质量规格：>98%,BR 超氧化物歧化酶(SOD)活性检测试剂盒50

盐酸左旋咪唑（标准品）  Levamisole HCl  质量规格：UV法含量测定 超氧化物歧化酶(SOD)活性检测试剂盒50

米帕明/丙咪嗪  Clomipramine HCL   质量规格：>99%,BR 超氧化物歧化酶(SOD)活性酶动力比色法定量检测试剂盒(含标准样)50
小鼠脑静脉血管平滑肌细胞提取物柠檬酸（CA）含量测试盒   可见分光光度法   50管/48样              Rizatriptan benzoate  145202-66-0  中文名：苯甲酸利扎曲坦  分子式：C22H25N5O2 

镍快速测试盒   Nickel rapid test case  Ranitidine  66357-35-5  中文名：雷尼替丁  分子式：C13H22N4O3S  度：98.0%  关键词： 

镍测试盒   Nickel test case  4-[2-(2-Amino-4,7-dihydro-4-oxo-1H-pymol[2,3-d]pyrimodin-5-yl)ethyl]benzoic acid methyl ester  中文名：  分子式：C16H16N4O3  度：98.0%

尿酸含量测试盒   可见分光光度法   50管/48样              Tropisetron hydrochloride  105826-92-4  中文名：盐酸托烷司琼  分子式：C17H21ClN2O2 

尿激酶型纤溶酶原激活因子受体 (uPA-R)   作用：   ELISA   规格：   48T/96T   进口分装     O-Benzyl-L-tyrosine  16652-64-5  中文名：O-苄基-L-酪氨酸  分子式：C16H17NO3

运输和保存：
视天气状况和运输距离远近，公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。
1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中，置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输；收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养，如无法立刻进行复苏操作，冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。
2)T-25培养瓶充满*培养基后进行常温运输；收到细胞后请镜下观察细胞生长状态，如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作，如悬浮的细胞较多，请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。