肺上皮细胞和肿瘤原代细胞提取物

肺上皮细胞和肿瘤原代细胞提取物【Human Lung MatchPair: Normal Pulmonary Epithelial Cell Derivatives and Primary Tumor Cell Derivatives】

人肺上皮细胞和肿瘤原代细胞提取物是从人原代肺上皮细胞和肿瘤细胞中提取的，人原代肺上皮细胞和肿瘤细胞分别从正常人肺组织和肿瘤组织中制备。正常人肺组织和肿瘤组织采集自各地方医院，采集工作根据IRB 和 HIPAA批准的方案进行。所有的产品在发货之前均经过严格的QA/QC流程以

总RNA制备：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol试剂分离RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit进行纯化。生物科技提供的总RNA样品附有RNA样品总浓度、总含量、电泳照片、OD值测定结果等。
cDNA制备：纯化后的总RNA来合成cDNA第一链，以50ul总反应体系进行逆转录，体系中包括MMLV反转录酶和随机引物以及10mg总RNA。68℃反应10min 后终止RT反应。利用1x RT Buffer 运输cDNA，1 ul cDNA 足够做一次PCR反应。所有cDNA产品在订单发货之前都经过了严格的QA/QC分析，保证了产品的质量。
蛋白制备：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制备人关节软骨组织裂解液，离心去除组织碎片，通过Bio-Rad蛋白检测试剂盒测定蛋白浓度，组织蛋白稀释后用非还原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巯基乙醇及PMSF，-80度保存。

我司常期代理ATCC Acris  abcam  cst  Biorbyt  santa  Novus  sigma  lifespan  NEB  roche  ABI  R&D millipore   BD  Qiagen Cayman  Jackson Life  GeneTex   Bio-Rad DSHB  tocris   peprotech 等品牌；部分产品现货，超低比价，产品名称货期短，价格优，售后齐全。

细胞培养方法：
1、细胞传代：细胞密度达到80-90%时即可传代
①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%胰酶（T25瓶），使胰酶覆盖整个瓶或皿，盖好放入培养箱消化；
③1-2min后，显微镜下观察细胞，若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入*培养基终止消化；若细胞还是贴壁，放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止；
④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清；
⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中，T25培养瓶加6-8ml培养基；
⑥悬浮细胞直接离心收集，细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。
2、细胞复苏：
①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化，时间1min左右，加入4-5ml培养基混匀。
②在1000RPM左右条件下离心4min，弃上清,加1-2ml培养基吹匀，将细胞悬液加入培养瓶中，补加适量培养基。
3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种
①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次，加入1mL 0.25%胰蛋白酶（T25瓶）
②1-2min后，显微镜下观察细胞，大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入*培养基终止消化；
③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清，加1ml冻存液重悬细胞；
④将冻存管放入程序降温盒，放入-80℃冰箱，4小时后将冻存管转入液氮罐储存。

实验事项：

1. 试剂准备：所有试剂都必须在使用前达到室温，使用后请立即按照说明书要求保存试剂。  实验操作中请使用一次性的吸头，避免交叉污染。
2.   加样：加样或加试剂时，请注意在吸取标本 / 标准品，酶结合物或底物时，前一个孔与后一个孔加样之间的时间间隔如果太大，将会导致不同的“预孵育"时间，从而明显地影响到测量值的准确性及重复性。一次加样时间(包括标准品及所有样品)好控制在10分钟内，如标本数量多，推荐使用多道移液器加样。
3.   孵育：为防止样品蒸发，试验时将反应板放于铺有湿布的密闭盒内，酶标板加上盖或覆膜，以避免液体蒸发；洗板后应尽快进行下步操作，任何时侯都应避免酶标板处于干燥状态;同时应严格遵守给定的孵育时间和温度。
4.   洗涤：洗涤过程中反应孔中残留的洗涤液应在滤纸上充分拍干，勿将滤纸直接放入反应孔中吸水，同时要消除板底残留的液体和手指印，避免影响后的酶标仪读数。
5.  试剂配制：Detection A及Detection B在使用前请手甩几下或少时离心处理，以使管壁或瓶盖的液体沉积到管底。标准品、检测溶液A工作液、检测溶液B工作液请依据所需的量配置使用，并使用相应的稀释液配制，不能混淆。请确配置标准品及工作液，尽量不要微量配置(如吸取检测溶液A时，一次不要小于10μl)，以避免由于不准确稀释而造成的浓度误差；请勿重复使用已稀释过的标准品、检测溶液A工作液或检测溶液B工作液。
6.  反应时间的控制：加入底物后请定时观察反应孔的颜色变化(比如，每隔10分钟)，如颜色较深，请提前加入终止液终止反应，避免反应过强从而影响酶标仪光密度读数。
7.  底物：底物请避光保存，在储存和温育时避免强光直接照射。
    建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。
    如标本中待测物质含量过高，请先稀释后再测定，计算时请后乘以稀释倍数。

注意事项：

1. 接收到，肉眼观察细胞培养基颜色，显微镜观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照（建议收到时的培养瓶拍一张照片，显微镜拍收到时的细胞100X,200X各一张）。
2.用75%的酒精消毒（建议配置75%的酒精的水是灭菌过的）。
3.严格无菌操作，打开细胞培养瓶。
4.将细胞培养瓶内的培养基用吸管*吸出（严禁直接倾倒），放入另一无菌容器中（建议换新的培养基培养细胞）。
5.用PBS 2-3ml/次轻轻洗细胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,显微镜下观察细胞变圆，轻轻拍打培养瓶直到细胞脱落，加入终止液终止。
6.1000rpm，5min离心，重悬细胞。
7.换新的细胞培养瓶，37℃，5%CO2培养。 

剥离硅烷   0ml 4-Chlorodehydromethyltestosterone244634-氯去氢甲基睾酮

超低分子量蛋白电泳试剂盒   次/4-Chloro-iodoquinazoline985561

蛋白浓缩试剂盒   次 4-Bromomethyl-cyanobiphenyl1147724

乙酰胺溶液   ×0.6ml 4-Biphenylcarboxylic acid9224-苯基苯甲酸

非变性PAGE凝胶制备及电泳试剂盒   次 4-Benzyloxyindole28964-苄氧基吲哚
Falcarinol  中文名：  分子式：C17H24O  度：%  兔子睾(T)ELISA试剂盒           

2-C-Methyl-D-erythro,4-lactone  中文名：  分子式：C5H8O4  度：98.0%  兔子肝细胞生长因子elisa试剂盒   兔子肝细胞生长因子试剂盒   规格型号：96T/48T   兔子肝细胞生长因子试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：兔子肝细胞生长因子试剂盒、兔子肝细胞生长因子试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。

Tetrahydrolachnophyllum lactone  中文名：  分子式：C10H14O2  度：90.0%  兔子皮质elisa试剂盒   兔子皮质试剂盒   规格型号：96T/48T   兔子皮质试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：兔子皮质试剂盒、兔子皮质elisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。

(Z)-Lachnophyllum lactone  中文名：  分子式：C10H10O2  度：%  兔子皮质醇elisa试剂盒   兔子皮质醇试剂盒   规格型号：96T/48T   兔子皮质醇试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：兔子皮质醇试剂盒、兔子皮质醇elisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。

Araliadiol  中文名：  分子式：C15H20O2  度：%  兔子脑素elisa试剂盒   兔子脑素试剂盒   规格型号：96T/48T   兔子脑素试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：兔子脑素试剂盒、兔子脑素elisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。
石蜡油  Paraffin oil, light fraction  质量规格：分子生物学级,PCR Grade 大鼠转化生长因子β1(TGF-β1)试剂盒 Rat ansforming Growth Factor β1,TGF-β1 ELISA kit

乙酸钾  Potassium acetate  质量规格：>99%,分子生物学级 大鼠转化生长因子β1受体(TGF-β1R)试剂盒 Rat ansforming Growth factor β1 receptor,TGF-β1R ELISA kit

无水乙酸钠   acetate, anhydrate  质量规格：>99%,分子生物学级 大鼠转化生长因子β2(TGF-β2)试剂盒 Rat ansforming Growth factor β2,TGF-β2 ELISA kit

低熔点琼脂糖；具有低凝胶温度的琼脂糖  Agarose, low gelling temperature  质量规格：BR;具有低凝胶温度 大鼠转化生长因子β2受体(TGF-β2R)试剂盒 Rat ansforming growth factor β2 receptor,TGF-β2R ELISA Kit

无水二氢钾  Potassium phosphate, monobasic, anhydrous  质量规格：>99%,分子生物学级 大鼠转化生长因子β3(TGF-β3)试剂盒 Rat ansforming Growth factor β3,TGF-β3 ELISA Kit

6-苄氨基嘌呤  6-Benzylamino purine  质量规格：>99% 大鼠转化生长因子β刺激蛋白22(TSC22)试剂盒 Rat ansforming growth factor-beta-stimulated Protein clone-22,TSC22 ELISA Kit

水(HPLC grade)  Water  质量规格：HPLC grade 大鼠转甲状腺素蛋白(T)试剂盒 Rat ansthyretin,T ELISA Kit

马来酸,顺丁烯二酸  Maleic acid  质量规格：AR,HPLC>99% 大鼠转铁蛋白受体(TFR/CD71)ELISA检测试剂盒Ratansferrieceptor,TFRELISAKit 96T/48T

硫酸铵  Ammonium sulfate  质量规格：>99%,分子生物学级 大鼠转移抑制基因KISS1蛋白(KISS1/Kisspeptin 1)试剂盒 Rat Kisspeptin 1,KISS1 ELISA Kit

氯化铯  Cesium chloride  质量规格：>99%,分子生物学级 大鼠组胺(HIS)ELISA检测试剂盒RatHistamine,HISELISAKit 96T/48T
肺上皮细胞和肿瘤原代细胞提取物兔2型胶原交联C末端肽   英文名称：   Rabbit C.terminal Telopeptides of type II collagen   规格：   48T/96T   英文缩写：   CTX-2  4β-Hydroxywithanolide E  54334-04-2  中文名：4β-羟基醉茄内酯E  分子式：C28H38O8 

兔(rabbit NO)   作用：   ELISA   规格：   48T/96T   进口分装  5-Hydroxymethyl-2-furoic acid  6338-41-6  中文名：5-羟甲基-2-糠酸  分子式：C6H6O4  度：%  关键词：  抗肿瘤; 对照品; 标准品; 微生物代谢产物; 天然产物; 天然产物库

兔(NO)ELISAKit     5-Chlorothiophene-2-carboxylic acid  24065-33-6  中文名：  分子式：C5H3ClO2S 

吐温80   100ml  4-Aminobutyric acid  1956/12/2  中文名：4-氨基丁酸  分子式：C4H9NO2  度：98.0%  关键词： 

土壤总0/有机0/无机0含量测试盒   可见分光光度法   50管/48样  4-Amino-3-hydroxy-1-naphthalenesulfonic acid  116-63-2  中文名：4-氨基-3-羟基-1-萘磺酸  分子式：C10H9NO4S