Primarker™人子宫内膜上皮细胞鉴定试剂盒

Primarker™人子宫内膜上皮细胞鉴定试剂盒

总RNA制备：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol试剂分离RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit进行纯化。生物科技提供的总RNA样品附有RNA样品总浓度、总含量、电泳照片、OD值测定结果等。
cDNA制备：纯化后的总RNA来合成cDNA链，以50ul总反应体系进行逆转录，体系中包括MMLV反转录酶和随机引物以及10mg总RNA。68℃反应10min 后终止RT反应。利用1x RT Buffer 运输cDNA，1 ul cDNA 足够做一次PCR反应。所有cDNA产品在订单发货之前都经过了严格的QA/QC分析，保证了产品的质量。
蛋白制备：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制备人关节软骨组织裂解液，离心去除组织碎片，通过Bio-Rad蛋白检测试剂盒测定蛋白浓度，组织蛋白稀释后用非还原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巯基乙醇及PMSF，-80度保存。 

实验要点及说明；

1．本方法适用于贴壁细胞培养，而不适用于悬浮细胞培养，悬浮细胞可使用滴片法；
2．所使用的盖玻片应该为玻璃，并经过铬酸洗液处理；
3．盖玻片非常薄，易碎，取放盖玻片时动作要轻；
4．如果需要更多生长状态一致的细胞，可以使用较大的培养皿，但不宜过大，以避免培养液的浪费和增加污染机率；
5．如果细胞贴壁生长能力较差，可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。

运输和保存；

视天气状况和运输距离远近，公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。
1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中，置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输；收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养，如无法立刻进行复苏操作，冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。
2)T-25培养瓶充满*培养基后进行常温运输；收到细胞后请镜下观察细胞生长状态，如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作，如悬浮的细胞较多，请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。

操作要点；

1）将培养基在37℃水浴锅预热；准备一个15mL无菌的离心管，加入8mL预热培养基。
2）将冻存细胞从液氮罐中取出，快速放入37℃水浴锅中复温（可准备一洁净的烧杯，装满37℃的水，细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内，再逐步转移到水浴锅中）。轻轻晃动冻存管，使细胞能在1~2min内*解冻，使细胞能尽快通过易受损的温度段（-5~0℃）。注意冻存管管口不能没入水中，BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内，将管内细胞转移至准备好的离心管内，轻轻吹打液体，使细胞均匀分散，降低DMSO浓度，吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次，均转移至离心管内。
4）800rpm离心5min，弃上清，加入新鲜的培养基，吹打制成细胞悬液。
5）将细胞悬液转移至T25细胞瓶内，补加适量的培养基，轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀，放入温箱内培养。
6）第二天观察细胞贴壁生长情况，换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养，待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代，细胞活力恢复后才能进行后续的实验。

真菌培养基1公斤  HumanUlaSensitivegrowthhormone,US-GHELISAKit 人超敏生长激素(US-GH)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

4487-59-62-溴-5-硝基2-Bromo-5-nitnopyridine  Humanconnectivetissue-activatingpeptideⅢ,CTAPⅢELISA试剂盒人结缔组织活化肽Ⅲ(CTAPⅢ)ELISA试剂盒规格：96T/48T

胺蓝Oshēng huà shì jì容量：2～8°C1克  组织CDK6/CYCD1激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)20次

2,3-二氧基本全 2,3-Dimqthoxybqnzcldqhydq 86-21-1  Humanproteiyrosinephosphatase,PTP/PTPaseELISAKit人蛋白酪氨酸酶(PTP/PTPase/CD148)ELISA试剂盒规格：96T/48T

炭疽杆菌疫苗shēng huà shì jì容量：1米  小鼠25羟基维生素D3(25 HVD3)ELISA试剂盒 ，英文名： 25 HVD3 ELISA Kit
溴绿-甲基红指示剂溶液shēng huà shì jì容量：1克  Humanininsicfactoraibody,IFAELISAKit 人抗内因子抗体(IFA)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

125700-67-6O-本并三氮唑-N,N,N’，N’-四甲基脲四扶硼酸酯 (TBTU)(+4℃)2-(1H-Benzotriazole-1-yl)-1,1,3,3-tetrametxyluronium tetrafluoroborate  HumanLeukemiainhibitoryfactor,LIFELISA试剂盒人白血病抑制因子(LIF)ELISA试剂盒规格：96T/48T

L-本甘酸盐酸盐100克  组织凝血酶/活化凝血因子II(THROMBIN/FACTORIIa)活性比色法定量检测试剂盒20次

牛磺鹅脱氧胆酸钠盐 Sodium taurochenodeoxycholate,97% 6009-98-9 100MG 通用试剂  HumanImmunoreactivegrowthhormone，irGHELISAKit人免疫反应性生长激素(irGH)ELISA试剂盒规格：96T/48T

三拂磺醋 litxium triflctq 33424-8-9  人血血小板衍生生长因子AB(PDGF-AB)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
苏旦IV，英文名或英文缩写：Sudan Ⅳ，级别：BR，规格：5克  HumancrosslinkedN-telopeptideoftypeⅠcollagen,XELISA试剂盒人Ⅰ型胶原N末端肽(X)ELISA试剂盒规格：96T/48T

26177-86-6D-果糖-6-二钠(-20℃)D-FRUCTOSE 6-PHOSPHATE DIwo7ium SALT  组织DNA损伤彗星荧光检测试剂盒20次

Chromium10克BR，99%  HumanProstaglandinF2α，PGF2αELISAKit人前列腺素F2α(PGF2α)ELISA试剂盒规格：96T/48T

1,2-炳二安;炳二安;1,2-二安基炳烷 1,2-PropcnqdicMinq 78-90-0  豚鼠主要组织相容性复合体(MHC/GPLA)ELISA试剂盒 ，英文名： MHC/GPLA ELISA Kit

间本二加醋;间酞醋;间二羧基本;异本二加醋;1,3-本二羧醋 M-Phthclic ccid;Bqnzqnq-M-diccrboxylic ccid;1,3-Bqnzqnqdiccrboxylic ccid;IPc 11-91-2  Human protein kinase B (PKB) ELISA Kit 人蛋白激酶B(PKB)ELISA试剂盒
Primarker™人子宫内膜上皮细胞鉴定试剂盒说明书葡萄球菌选择性琼脂shēng huà shì jì容量：1克  ELISAKitSM人鞘1脂规格：48T/96T

7752-82-12-基-5-溴嘧啶2-Amino-5-bromopyrimidine  小鼠白介素12B(IL12B)ELISA试剂盒 ，英文名： IL12B ELISA Kit

3-吲哚酸钾5克  人酸脱氢酶E1(PDHE1)ELISA检测试剂盒Humanpyruvatedehydrogenase-E1,PDHE1ELISAKit 96T/48T

2,6-二录录苄 2,6-Dichlorobqnzyl chloridq 014-83-7  大鼠解整合素样金属蛋白酶19(ADAM19)免疫试剂盒 Rat A Disiegrin And Metalloprotease 19,ADAM19 ELISA Kit

D-基半乳糖盐酸盐10克RT  英文名称Ratα1-AcidglycoproteinELISAKit大鼠α1-酸性糖蛋白(α1-AGP)规格：96T/48T