人膀胱平滑肌细胞提取物说明书

人膀胱平滑肌细胞提取物【Human Bladder : Normal Bladder Smooth Muscle Cell Derivatives】

人膀胱平滑肌细胞提取物是从人膀胱平滑肌细胞提取的，人膀胱平滑肌细胞从正常人膀胱组织制备。正常人膀胱组织采集自各地方医院，采集工作根据IRB 和 HIPAA批准的方案进行。所有的产品在发货之前均经过严格的QA/QC流程以确保其质量。这些产品可以直接用于基因克隆，表达图谱分析以及各种分子生物学实验的研究。

总RNA制备：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol试剂分离RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit进行纯化。生物科技提供的总RNA样品附有RNA样品总浓度、总含量、电泳照片、OD值测定结果等。
cDNA制备：纯化后的总RNA来合成cDNA第一链，以50ul总反应体系进行逆转录，体系中包括MMLV反转录酶和随机引物以及10mg总RNA。68℃反应10min 后终止RT反应。利用1x RT Buffer 运输cDNA，1 ul cDNA 足够做一次PCR反应。所有cDNA产品在订单发货之前都经过了严格的QA/QC分析，保证了产品的质量。
蛋白制备：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制备人关节软骨组织裂解液，离心去除组织碎片，通过Bio-Rad蛋白检测试剂盒测定蛋白浓度，组织蛋白稀释后用非还原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巯基乙醇及PMSF，-80度保存。 

 实验要点及说明：

1．本方法适用于贴壁细胞培养，而不适用于悬浮细胞培养，悬浮细胞可使用滴片法；
2．所使用的盖玻片应该为优质玻璃，并经过铬酸洗液处理；
3．盖玻片非常薄，易碎，取放盖玻片时动作要轻；
4．如果需要更多生长状态一致的细胞，可以使用较大的培养皿，但不宜过大，以避免培养液的浪费和增加污染机率；
5．如果细胞贴壁生长能力较差，可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。

 运输和保存：

视天气状况和运输距离远近，公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。
1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中，置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输；收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养，如无法立刻进行复苏操作，冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。
2)T-25培养瓶充满*培养基后进行常温运输；收到细胞后请镜下观察细胞生长状态，如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作，如悬浮的细胞较多，请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。

操作要点：

1）将培养基在37℃水浴锅预热；准备一个15mL无菌的离心管，加入8mL预热培养基。
2）将冻存细胞从液氮罐中取出，快速放入37℃水浴锅中复温（可准备一洁净的烧杯，装满37℃的水，细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内，再逐步转移到水浴锅中）。轻轻晃动冻存管，使细胞能在1~2min内*解冻，使细胞能尽快通过易受损的温度段（-5~0℃）。注意冻存管管口不能没入水中，BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内，将管内细胞转移至准备好的离心管内，轻轻吹打液体，使细胞均匀分散，降低DMSO浓度，吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次，均转移至离心管内。
4）800rpm离心5min，弃上清，加入新鲜的培养基，吹打制成细胞悬液。
5）将细胞悬液转移至T25细胞瓶内，补加适量的培养基，轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀，放入温箱内培养。
6）第二天观察细胞贴壁生长情况，换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养，待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代，细胞活力恢复后才能进行后续的实验。

新霉素残留酶联免疫检测试剂盒Cleroindicin F1892647

莫能菌素残留酶联免疫检测试剂盒Cleroindicin E1651971

庆大霉素残留酶联免疫检测试剂盒Cleroindicin D1892645

林可霉素残留酶联免疫检测试剂盒Cleroindicin C1836268

玉米赤霉烯酮残留酶联免疫检测试剂盒Cleroindicin B73891
Nifuroxazide  中文名：硝呋酚  分子式：C12H9N3O5    小鼠P选择素(P-Selectin/CD62P)ELISAKit              

Nifedipine  中文名：硝苯地平  分子式：C17H18N2O6    中性蛋白酶测试盒   可见分光光度法   50管/24样

Nicorandil  中文名：尼可地尔  分子式：C8H9N3O4    碱性蛋白酶测试盒   可见分光光度法   50管/24样

Nicarbazin  中文名：尼卡巴嗪  分子式：C19H18N6O6    胰蛋白酶测试盒   紫外分光光度法   50管/48样

Nevirapine  中文名：奈伟拉平  分子式：C15H14N4O    胃蛋白酶测试盒   可见分光光度法   50管/24样
抑霉唑（标准品）   Imazalil  质量规格：分析标准品 牛(EPI)试剂盒 Bovine Epinephrine/Adrenaline,EPI ELISA Kit

春雷霉素盐酸盐（标准品）  Kasugamycin hydrochloride  质量规格：分析标准品,≥90% (HPLC) 牛(NO)试剂盒 Bovine Niic Oxide,NO ELISA Kit

标准溶液（10μg/ml,u=4%）  Kitazine solution  质量规格：10μg/ml,u=4% 牛0酸甘油酸酯激酶2(PGK2)试剂盒 Bovine Phosphoglycerate kinase 2,PGK2 ELISA kit

利谷隆（标准品）   Linuron  质量规格：分析标准品 牛0酸果糖激酶(PFK)ELISA检测试剂盒BovinePhosphofructokinase,PFKELISAKit 96T/48T

苯噻草胺（标准品）  Mefenacet  质量规格：分析标准品,98.5% 牛0酸果糖激酶(PFK)试剂盒 Bovine Phosphofructokinase,PFK ELISA Kit

甲磺隆标准溶液（10μg/ml,u=4%）  Metsulfuron-methyl solution  质量规格：10μg/ml,u=4% 牛0酸化腺苷酸活化蛋白激酶(pAMPK)试剂盒 Bovine pAMPK ELISA Kit

甲霜灵（标准品）  Metalaxyl  质量规格：分析标准品,98% 牛0酸烯醇式酸羧激酶(PCK)ELISA检测试剂盒Bovinephosphoenolpyruvatecarboxykinase,PCKELISAKit 96T/48T

甲氧隆（标准品）  Metoxuron  质量规格：分析标准品 牛0酸烯醇式酸羧激酶(PCK)试剂盒 Bovine phosphoenolpyruvate carboxykinase,PCK ELISA Kit

灭草隆（标准品）  Monuron  质量规格：分析标准品 牛1试剂盒 Bovine Coisone ELISA Kit

烟嘧磺隆（标准品）  Nicosulfuron  质量规格：分析标准品 牛ELISA试剂盒
人膀胱平滑肌细胞提取物说明书Tenuifoliside A  中文名：远志蔗糖酯A  分子式：C31H38O17  度：95.0%  兔子内皮型合成酶3(eNOS-3)ELISAKit  

3,3-Dimethylacrylic acid  中文名：千里光酸  分子式：C5H8O2  度：98.0%  兔子胆固醇酯转移蛋白(CETP)ELISAKit              

Campsiketalin  中文名：  分子式：C10H20O4  度：95.0%  兔子内皮抑素elisa试剂盒   兔子内皮抑素试剂盒   规格型号：96T/48T   兔子内皮抑素试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：兔子内皮抑素试剂盒、兔子内皮抑素elisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。

Macranthoin G  中文名：灰毡毛忍冬素G  分子式：C26H26O12  度：97.0%  兔子甲状腺素elisa试剂盒   兔子甲状腺素试剂盒   规格型号：96T/48T   兔子甲状腺素试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：兔子甲状腺素试剂盒、兔子甲状腺素elisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。

5-O-Ethylcleroindicin D  中文名：  分子式：C10H16O4  度：%  兔子凝血因子Ⅱelisa试剂盒   兔子凝血因子Ⅱ试剂盒   规格型号：96T/48T   兔子凝血因子Ⅱ试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：兔子凝血因子Ⅱ试剂盒、兔子凝血因子Ⅱ elisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。