人肾系膜细胞提取物

人肾系膜细胞提取物【Human Kidney : Normal Renal Mesangial Cell Derivatives】

人肾系膜细胞提取物是从人肾系膜细胞提取的，人肾系膜细胞从正常人肾组织制备。正常人肾组织采集自各地方医院，采集工作根据IRB 和HIPAA批准的方案进行。所有的产品在发货之前均经过严格的QA/QC流程以确保其质量。这些产品可以直接用于基因克隆，表达图谱分析以及各种分子生物学实验的研究。

总RNA制备：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol试剂分离RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit进行纯化。生物科技提供的总RNA样品附有RNA样品总浓度、总含量、电泳照片、OD值测定结果等。
cDNA制备：纯化后的总RNA来合成cDNA第一链，以50ul总反应体系进行逆转录，体系中包括MMLV反转录酶和随机引物以及10mg总RNA。68℃反应10min 后终止RT反应。利用1x RT Buffer 运输cDNA，1 ul cDNA 足够做一次PCR反应。所有cDNA产品在订单发货之前都经过了严格的QA/QC分析，保证了产品的质量。
蛋白制备：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制备人关节软骨组织裂解液，离心去除组织碎片，通过Bio-Rad蛋白检测试剂盒测定蛋白浓度，组织蛋白稀释后用非还原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巯基乙醇及PMSF，-80度保存。

 实验要点及说明：

1．本方法适用于贴壁细胞培养，而不适用于悬浮细胞培养，悬浮细胞可使用滴片法；
2．所使用的盖玻片应该为优质玻璃，并经过铬酸洗液处理；
3．盖玻片非常薄，易碎，取放盖玻片时动作要轻；
4．如果需要更多生长状态一致的细胞，可以使用较大的培养皿，但不宜过大，以避免培养液的浪费和增加污染机率；
5．如果细胞贴壁生长能力较差，可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。

操作要点：

1）将培养基在37℃水浴锅预热；准备一个15mL无菌的离心管，加入8mL预热培养基。
2）将冻存细胞从液氮罐中取出，快速放入37℃水浴锅中复温（可准备一洁净的烧杯，装满37℃的水，细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内，再逐步转移到水浴锅中）。轻轻晃动冻存管，使细胞能在1~2min内*解冻，使细胞能尽快通过易受损的温度段（-5~0℃）。注意冻存管管口不能没入水中，BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内，将管内细胞转移至准备好的离心管内，轻轻吹打液体，使细胞均匀分散，降低DMSO浓度，吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次，均转移至离心管内。
4）800rpm离心5min，弃上清，加入新鲜的培养基，吹打制成细胞悬液。
5）将细胞悬液转移至T25细胞瓶内，补加适量的培养基，轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀，放入温箱内培养。
6）第二天观察细胞贴壁生长情况，换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养，待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代，细胞活力恢复后才能进行后续的实验。

新布尼亚病毒单重荧光PCR检测试剂盒48Nicorandil651416尼可地尔

麻疹病毒/风疹病毒双重荧光PCR检测试剂盒48Dronedarone hydrochloride1416253盐酸决奈达隆

东部/西部/委内瑞拉马脑炎病毒三重荧光PCR检测试剂盒48Bisoprolol fumarate43443富马酸比索洛尔

登革热Ⅰ/Ⅱ/Ⅲ/Ⅳ病毒四重荧光PCR检测试剂盒484-[2-[(3-Ethyl-methyl-oxo-pyrrolin-yl)carboxamido]ethyl]benzenesulfonamide11189

小反刍兽疫病毒单重荧光PCR检测试剂盒48Minoxidil3841米诺地尔
Nifedipine  21829-25-4  中文名：硝苯地平  分子式：C17H18N2O6  度：98.0%  关键词：    小鼠纤溶抑制因子/凝血酶激活的纤溶抑制物(TAFI)ELISA试剂盒           

Nicorandil  65141-46-0  中文名：尼可地尔  分子式：C8H9N3O4  度：98.0%  关键词：    小鼠小鼠透明质酸   英文名称：   Mouse Hyaluronic Acid   规格：   48T/96T   英文缩写：   HA

Nicarbazin  330-95-0  中文名：尼卡巴嗪  分子式：C19H18N6O6  度：99.0%      小鼠低氧诱导因子1a   英文名称：   Hypoxia Inducible Factor 1a   规格：   48T/96T   英文缩写：   HIF-1α

Nevirapine  129618-40-2  中文名：奈伟拉平  分子式：C15H14N4O  度：98.0%      小鼠热休克蛋白60   英文名称：   Heat shock protein 60   规格：   48T/96T   英文缩写：   Hsp-60

Neutral berberine sulfate  316-41-6  中文名：硫酸黄连素  分子式：C20H20NO8S  度：98.0%      小鼠组胺   英文名称：   Histamine   规格：   48T/96T   英文缩写：   HIS
异银杏双黄酮 HPLC≥98% 20mg MAPK蛋白共沉淀分析试剂盒5

异泽兰黄素 HPLC≥98% 20mg MAYER苏木素复染试剂盒50

异紫花前胡内酯 HPLC≥98% 10mg McCOY’S5A培养基1/10升(片剂)

异紫堇定碱 HPLC≥98% 20mg MEM培养基1/10升(片剂)

益母草苷 HPLC≥98% 20mg MGMT基因甲基化程度定量分析试剂盒20

薏苡素 HPLC≥98% 20mg MHCELISA试剂盒鱼类主要组织相容性复合体规格：96T/48T

茵芋苷 HPLC≥98% 20mg MHPG高效液相色谱电化学定量检测试剂盒20

茵芋碱 HPLC≥98% 20mg Michel固着液50毫升

羊藿苷I HPLC≥98% 20mg MLH1基因甲基化程度定量分析试剂盒20

羊藿素 HPLC≥98% 20mg MMLV(H点突变)2500U
人肾系膜细胞提取物Terbinafine hydrochloride  78628-80-5  中文名：盐酸特比萘芬  分子式：C21H26ClN  度：98.0%  关键词：    小鼠乙型肝炎e抗体(HBeAb)ELISA试剂盒  

Terbinafine  91161-71-6  中文名：特比萘芬  分子式：C21H25N  度：98.0%  关键词：    小鼠乙酰胆碱转移酶（CHAT）ELISA试剂盒           

Tenuifoliside A  139726-35-5  中文名：远志蔗糖酯A  分子式：C31H38O17  度：95.0%  关键词：  抗抑郁; 远志; 蔗糖; 中药对照品; 中药标准品; 植物提取物; 天然产物; 天然产物库  小鼠乙型肝炎e抗体(HBeAb)ELISAKit  

Tenofovir  147127-20-6  中文名：泰诺福韦  分子式：C9H14N5O4P  度：98.0%  关键词：    小鼠乙型肝炎e抗原(HBeAg)ELISAKit  

Tenacissoside I  191729-44-9  中文名：通关藤苷I  分子式：C44H62O14  度：%  关键词：  通关藤; 孕甾烷; 植物提取物; 天然产物; 天然产物库  小鼠乙型肝炎表面抗体(HBsAb)ELISAKit

 运输和保存：
视天气状况和运输距离远近，公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。
1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中，置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输；收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养，如无法立刻进行复苏操作，冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。
2)T-25培养瓶充满*培养基后进行常温运输；收到细胞后请镜下观察细胞生长状态，如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作，如悬浮的细胞较多，请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。