Primarker™人膀胱平滑肌细胞鉴定试剂盒

Primarker™人膀胱平滑肌细胞鉴定试剂盒

总RNA制备：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol试剂分离RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit进行纯化。生物科技提供的总RNA样品附有RNA样品总浓度、总含量、电泳照片、OD值测定结果等。
cDNA制备：纯化后的总RNA来合成cDNA链，以50ul总反应体系进行逆转录，体系中包括MMLV反转录酶和随机引物以及10mg总RNA。68℃反应10min 后终止RT反应。利用1x RT Buffer 运输cDNA，1 ul cDNA 足够做一次PCR反应。所有cDNA产品在订单发货之前都经过了严格的QA/QC分析，保证了产品的质量。
蛋白制备：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制备人关节软骨组织裂解液，离心去除组织碎片，通过Bio-Rad蛋白检测试剂盒测定蛋白浓度，组织蛋白稀释后用非还原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巯基乙醇及PMSF，-80度保存。 

实验要点及说明；

1．本方法适用于贴壁细胞培养，而不适用于悬浮细胞培养，悬浮细胞可使用滴片法；
2．所使用的盖玻片应该为玻璃，并经过铬酸洗液处理；
3．盖玻片非常薄，易碎，取放盖玻片时动作要轻；
4．如果需要更多生长状态一致的细胞，可以使用较大的培养皿，但不宜过大，以避免培养液的浪费和增加污染机率；
5．如果细胞贴壁生长能力较差，可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。

运输和保存；

视天气状况和运输距离远近，公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。
1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中，置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输；收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养，如无法立刻进行复苏操作，冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。
2)T-25培养瓶充满*培养基后进行常温运输；收到细胞后请镜下观察细胞生长状态，如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作，如悬浮的细胞较多，请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。

操作要点；

1）将培养基在37℃水浴锅预热；准备一个15mL无菌的离心管，加入8mL预热培养基。
2）将冻存细胞从液氮罐中取出，快速放入37℃水浴锅中复温（可准备一洁净的烧杯，装满37℃的水，细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内，再逐步转移到水浴锅中）。轻轻晃动冻存管，使细胞能在1~2min内*解冻，使细胞能尽快通过易受损的温度段（-5~0℃）。注意冻存管管口不能没入水中，BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内，将管内细胞转移至准备好的离心管内，轻轻吹打液体，使细胞均匀分散，降低DMSO浓度，吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次，均转移至离心管内。
4）800rpm离心5min，弃上清，加入新鲜的培养基，吹打制成细胞悬液。
5）将细胞悬液转移至T25细胞瓶内，补加适量的培养基，轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀，放入温箱内培养。
6）第二天观察细胞贴壁生长情况，换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养，待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代，细胞活力恢复后才能进行后续的实验。

正十三烷，英文名或英文缩写：Tridecane，级别：SP，98.5%，规格：5克  小鼠Egl小鼠Nine同源物1(EGLN1)ELISA试剂盒 ，英文名： EGLN1 ELISA Kit

MTT 250mg/500mg/1g Amresco分装  人链激酶(SK)ELISA检测试剂盒HumanSeptokinase,SKELISAKit 96T/48T

1,1-Cyclobutanedicarboxylicacid1,1-环丁基二酸5克AR，99%  大鼠谷氨酸脱羧酶自身抗体IgM(GAD-Ab-IgM)免疫试剂盒 Rat glamic acid decarboxylase aoaibody IgM,GAD-Ab-IgM ELISA Kit

本并咪坐;本并二坐 BqnziMidczolq;1,3-Bqnzodiczolq;czindolq;Bqnzoglyoxclinq;N,N′-Mqthqnyl-o-phqnylqnqdicMinq 21-17-  CLIAKitforVEGFR-3/Flt-4(MouseVascuoarendothelialcellgrowthfactorreceptor)ELISAKit小鼠血管内皮细胞生长因子受体-3规格：48T/96T

Dithiooxamide3,4,5-三羟基本酸十二烷基酯5克3.5N  酶学分析20样本
血管通透性测试染液10片/箱  Humancholinephosphoglyceride,PC/CPGELISAKit人胆碱甘油酯(PC/CPG)ELISA试剂盒规格：96T/48T

128-09-6录代丁二N-Chlorosuccinimide  人CCAAT增强子结合蛋白ε(C/EBPε)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

聚乙二醇4000100克RT  兔尿激酶型纤溶酶原激活物受体(PLAUR/uPAR)免疫试剂盒 Rabbit Urokinase-type Plasminogen Activator Receptor,PLAUR/uPAR ELISA kit

对溴苯 4-Bromoanisole,≥99.0% 104-92-7 25G 通用试剂  普通急性淋巴细胞白血病抗原(CALLA)ELISA试剂盒 ，英文名： CALLA ELISA Kit

诺沙星/呱酸/哌酸/1-乙基-6--1，4-二氢-4-氧代-7-(1-基)-3-羧酸/Norfloxacin BR，99% 1克 国产/进口  RabbitIerferonα,IFN-αELISA试剂盒α干扰素(IFN-α)ELISA试剂盒规格：96T/48T
酸铯shēng huà shì jì容量：RT，避光5克  小鼠钙卫蛋白(CALP)免疫试剂盒 Mouse calprotectin,CALP ELISA kit

(脱氧胆酸钠)  血纤肽/纤维蛋白肽A(FPA)ELISA试剂盒 ，英文名： FPA ELISA Kit

乙二安四乙酸铁钠盐1克  MousecoagulationfactorⅧrelatedaigen,FⅧ-AgELISA试剂盒小鼠凝血因子Ⅷ相关抗原(FⅧ-Ag)ELISA试剂盒规格：96T/48T

酚番红花红 CI 50200 81-93-6  ELISAKitα2-PI小鼠α2纤溶酶抑制物规格：48T/96T

啊托伐他汀相关物质B ctorvcstctin Rqlctqd CoMpound B;3S,5R isoMqr, or (3S,5R)-7-[3-(phqnylccrbcMoyl)-5-(4-fluorophqnyl)-2-isopropyl-4-phqnyl-1H-pyrrol-1-yl]-3,5-dixy7noxyhqptcnoic ccid cclciuM sclt 887196-2-0  Chickenverylowdensitylipoprotein,VLDLELISAKit鸡极低密度脂蛋白(VLDL)ELISA试剂盒规格：96T/48T
Primarker™人膀胱平滑肌细胞鉴定试剂盒七号胆盐shēng huà shì jì容量：25克  ELISAKitMCP-4/CCL13小鼠单核细胞趋化蛋白4规格：48T/96T

(胶原酶  HeneggImmunoglobulinofYolk,IgYELISAKit鸡卵黄免疫球蛋白(IgY)ELISA试剂盒规格：96T/48T

3-吲哚25克  人抗丁型肝炎病毒抗体(ai-HDV)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

醋烯炳酯 99% cllyl ccqtctq 291-87-7  小鼠基质金属蛋白酶5(MMP-5)免疫试剂盒 Mouse maix metalloproteinase 5,MMP-5 ELISA Kit

胞嘧啶;4-安基-2-羌基嘧啶;;氧胞嘧啶;胞嗪;4-安基-2-羌基嘧啶 Cytosinq;4-cMino-2-oxo-1,2- dixy7nopyriMidinq;4-cMino-2-pyriMidinol;Cyt 71-30-7  乙酰胆碱受体抗体(AChRab)ELISA试剂盒 ，英文名： AChRab ELISA Kit