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产品描述：
细胞名称 狗肾细胞；Super Tube图片
形态特性上皮细胞 生长特性贴壁生长 特征特性从表观正常的成年雌性可卡犬中建立了细胞株MDCK(ATCCCCL-34)，从中克隆建立了狗上皮样细胞株SuperTube。当维持高细胞浓度时，Supertube 成大量的小管(据报道，24孔板的每孔铺7x105细胞，３天内就能 成小管)。要 成小管，细胞需要每天两次换液以提供足够养分。与原始细胞株相比，SuperTube的c-AMP的检测水平低得多，在forskolin刺激下读出的腺苷环化酶水平也低；它的跨上皮抗性也比SuperDome(ATCCCRL-2286)和 培养条件DMEM/F12(1:1):Ham'sF12/DMEMedium(DMEH-16/F-1250%Mixturew/oHEPES,withNEAAMedium)优质胎牛血清，10% 传代方法消化3-5分钟。1:2。3天内可长满。 传代情况PN5 冻存条件*培养基+8%DMSO 支原体检测阴性 STR 同工酶 染色体
冷冻保存细胞之方法：
狗肾细胞；Super Tube图片冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ （-20 ℃30 分钟*） → -80 ℃16~18 小时（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 长期储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 ℃不可超过1 小时， 以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
细胞培养操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）狗肾细胞；Super Tube图片准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
MiaPaCa-2, 人胰腺癌细胞 CD40LG Others Mouse 小鼠 CD40L / CD154 / TNFSF5 人细胞裂解液 (阳性对照) 大鼠神经元细胞*培养基 100mL OK负鼠肾细胞 OK opossum kidney cells MEM培养基(GIBCO)+10%FBS IFNA14 Protein Mouse 重组小鼠 IFNA14 / Ierferon alpha-14 蛋白 (Fc 标签) MS751(人子宫颈表皮癌细胞) 5×106cells/瓶×2 Ana-1(巨噬细胞)
狗肾细胞；Super Tube图片CL-0338G1(发绿色荧光的小鼠胚胎干细胞)5×106cells/瓶×2 ESAM Others Mouse 小鼠 ESAM / Endothelial Cell Adhesion Molecule 人细胞裂解液 (阳性对照) 小鼠肺大动脉内皮细胞*培养基 100mL Eca-109人食管癌细胞 Human esophageal cancer cell line Eca-109. 1640+10% FBS IL1B Protein Rat 重组大鼠 IL-1 beta / IL1B 蛋白 (mature form) NCI-H524(人非小细胞肺癌细胞) 5×106cells/瓶×2 HUVEC(人脐静脉血管内皮细胞)
注意事项：
1.一般客户拿到狗肾细胞；Super Tube图片后，应该注意什么？
客户收到细胞先不开盖，放在培养箱静置若干小时后（看细胞密度而定）在倒置显微镜下观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照（建议受收细胞时的培养基拍一张照片，观察培养基的颜色和是否有漏液情况，显微镜下拍细胞100X，200X各一张），排除细胞本身污染的情况；收到细胞未开封，出现污染状况我们负责免费发送一株细胞。
收到细胞时如无异常情况，请在显微镜下观察细胞密度，如为贴壁细胞，未超过80%汇合度时，将培养瓶中培养液吸出，留下10ml培养液继续培养；超过80%汇合度时，请按细胞培养条件传代培养。如为悬浮细胞，吸出培养液、1000转/分钟离心2分钟，吸出上清，管底细胞用新鲜培养基悬浮细胞后移回培养瓶。
细胞出现问题，不予以重发的情况有哪些？
（1）客户造成细胞污染，不重发；
（2）客户不正确操作致细胞状态不好，不重发；
（3）非推荐细胞培养体系致的细胞状态不好，不重发；
（4）细胞状态不好，未提供细胞培养前3天照片的，不重发；
（5）细胞培养时经其它处理的，不重发；
（6）细胞收到2天内，未告知，不重发；
（7）视具体情况而定。 |
