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产品描述：
细胞名称 大耳山羊肺细胞；LDG-1说明书
形态特性成纤维细胞样 生长特性贴壁生长 特征特性该细胞系来源于一雄性大耳山羊的肺组织。1990年由中国科学院昆明细胞库建立。 培养条件M-199:withEarle'sBalancedSaltsSolution(EBSS)15%NBS 传代方法1：2传代；3-4天一次 传代情况P4 冻存条件基础培养基+5%DMSO+20%FBS 支原体检测荧光法（-） STR- 同工酶 染色体
 冷冻保存细胞之方法：
大耳山羊肺细胞；LDG-1说明书冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ （-20 ℃30 分钟*） → -80 ℃16~18 小时（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 长期储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 ℃不可超过1 小时， 以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
细胞培养操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）大耳山羊肺细胞；LDG-1说明书准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
SV40转化的非洲绿猴肾细胞;COS-1 SIGLEC6 Others Human 人 SIGLEC6 / CD327 人细胞裂解液 (阳性对照) 外周血白细胞Many types of cells包装：5 × 105次方(1ml) ERA-2细胞，人恶性多发性畸胎瘤细胞 人癌阿霉素耐药细胞株,MCF/Adr细胞 台盼蓝TB 猴源细胞 IL1R2 Others Human 人 IL1R2 / CD121b 人细胞裂解液 (阳性对照)
大耳山羊肺细胞；LDG-1说明书CL-0403NCI-H524(人非小细胞肺癌细胞)5×106cells/瓶×2 ACBD6 Others Human 人 ACBD6 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 人脐静脉内皮细胞总RNAHUVEC NA Jecket细胞，淋巴瘤细胞 人肺腺癌细胞,SPC-A1细胞 EC109，人食管癌细胞 猫星形脑胶质细胞;PG-4(S+L-) ACP5 Others Human 人 ACP5 / AP 人细胞裂解液 (阳性对照)
注意事项：
1.一般客户拿到大耳山羊肺细胞；LDG-1说明书后，应该注意什么？
客户收到细胞先不开盖，放在培养箱静置若干小时后（看细胞密度而定）在倒置显微镜下观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照（建议受收细胞时的培养基拍一张照片，观察培养基的颜色和是否有漏液情况，显微镜下拍细胞100X，200X各一张），排除细胞本身污染的情况；收到细胞未开封，出现污染状况我们负责免费发送一株细胞。
收到细胞时如无异常情况，请在显微镜下观察细胞密度，如为贴壁细胞，未超过80%汇合度时，将培养瓶中培养液吸出，留下10ml培养液继续培养；超过80%汇合度时，请按细胞培养条件传代培养。如为悬浮细胞，吸出培养液、1000转/分钟离心2分钟，吸出上清，管底细胞用新鲜培养基悬浮细胞后移回培养瓶。
细胞出现问题，不予以重发的情况有哪些？
（1）客户造成细胞污染，不重发；
（2）客户不正确操作致细胞状态不好，不重发；
（3）非推荐细胞培养体系致的细胞状态不好，不重发；
（4）细胞状态不好，未提供细胞培养前3天照片的，不重发；
（5）细胞培养时经其它处理的，不重发；
（6）细胞收到2天内，未告知，不重发；
（7）视具体情况而定。 、ECACC、DSMZ、JCRB等，购买到货后，由我们实验室扩增、冻存，冻存的产品全部经过QC检测，100%进口来源，100%保证5代以内，活力>95%，无细菌、真菌、支原体污染。 购买客户请先与我司细胞销售人员核实订购的细胞名称、种属、货号、数量、协商细胞价格并预约发货期与提取方式。向销售人员索取细胞说明书并认真阅读以方便你的实验操作。
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SV40转化的非洲绿猴肾细胞;COS-1 HA Others H3N2 甲型流感 H3N2 (A/Perth/16/2009) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人细胞裂解液 (阳性对照) II型胶原酶(含100mL酶解缓冲液) 10mL TE-1人食管癌细胞 Human esophageal cancer cell line TE-1. RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS IL3 Protein Rat 重组大鼠 IL3 / ierleukin 3 蛋白 (His 标签) 人毛发干细胞(HHDPC)( 5×105 ) MLF, 小鼠淋巴成纤维细胞 Mouse
大耳山羊肾细胞；LDG-2价格CL-0402NCI-H520(人肺鳞癌细胞)5×106cells/瓶×2 IFNA1 Others Rat 大鼠 IFN-alpha / IFNA1 / IFN 人细胞裂解液 (阳性对照) 小鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞*培养基 100mL U266人骨髓瘤细胞 U266 human myeloma cell 1640+15% FBS IL33 Protein Canine 重组狗 IL33 / Ierleukin-33 / NF-HEV 蛋白 NCI-H2227(人小细胞肺癌细胞) 5×106cells/瓶×2 KG-1(白血病细胞)
收到大耳山羊肾细胞；LDG-2价格如何处理？
1、首先，观察细胞培养瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象。若有，请拍照，并及时与技（所拍照片将作为后续服务依据）。
2、用75%酒精擦拭细胞培养瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题，部分贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落；先不要打开培养瓶盖，将细胞置于细胞培养箱内静置培养2-4小时，以便稳定细胞状态。
3、仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如贴壁特性（贴壁/悬浮）、细胞形态、所用基础培养基、血清比例、所需细胞因子、传代比例、换液频率等。
4、静置完成后，取出细胞培养瓶，镜检、拍照，记录细胞状态（所拍照片将作为后续服务依据）；建议细胞传代培养后，定期拍照、记录细胞生长状态。
5、贴壁细胞：若细胞生长密度超过80%，可正常传代；若未超过80%，移除细胞培养瓶内培养基，预留5ml左右继续培养，直至细胞密度达80%左右再进行传代操作，瓶盖可稍微拧松。
6、悬浮细胞：将细胞培养瓶内液体全部转移至50ml无菌离心管内，1200rpm离心5min，离心后上清培养基可收集备用，管底细胞沉淀加入5ml培养基吹打、重悬。镜检时，若细胞密度超过80%，可将细胞悬液分至2个细胞培养瓶内培养，补加培养基至5ml；若细胞密度未超过80%，将细胞悬液移至原瓶继续培养，直至细胞密度达80%左右时再进行传代操作。 |
