产品名称 | 大鼠神经元细胞提取物培养 | 英文名称 | Rat Brain : Normal Neuron CellsDerivatives | 货号 | EYX99277 |
大鼠神经元细胞提取物【Rat Brain : Normal Neuron CellsDerivatives】 大鼠神经元细胞提取物是从大鼠原代神经元细胞提取的,大鼠原代神经元细胞从正常大鼠脑组织制备。所有的产品在发货之前均经过严格的QA/QC流程以确保其质量。这些产品可以直接用于基因克隆,表达图谱分析以及各种分子生物学实验的研究。 总RNA制备:利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol试剂分离RNA,然后用Qiagen RNA Clean Kit进行纯化。生物科技提供的总RNA样品附有RNA样品总浓度、总含量、电泳照片、OD值测定结果等。 cDNA制备:纯化后的总RNA来合成cDNA第一链,以50ul总反应体系进行逆转录,体系中包括MMLV反转录酶和随机引物以及10mg总RNA。68℃反应10min 后终止RT反应。利用1x RT Buffer 运输cDNA,1 ul cDNA 足够做一次PCR反应。所有cDNA产品在订单发货之前都经过了严格的QA/QC分析,保证了产品的质量。 蛋白制备:利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制备人关节软骨组织裂解液,离心去除组织碎片,通过Bio-Rad蛋白检测试剂盒测定蛋白浓度,组织蛋白稀释后用非还原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巯基乙醇及PMSF,-80度保存。 实验要点及说明: 1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法; 2.所使用的盖玻片应该为优质玻璃,并经过铬酸洗液处理; 3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻; 4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率; 5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
操作要点: 1)将培养基在37℃水浴锅预热;准备一个15mL无菌的离心管,加入8mL预热培养基。 2)将冻存细胞从液氮罐中取出,快速放入37℃水浴锅中复温(可准备一洁净的烧杯,装满37℃的水,细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内,再逐步转移到水浴锅中)。轻轻晃动冻存管,使细胞能在1~2min内*解冻,使细胞能尽快通过易受损的温度段(-5~0℃)。注意冻存管管口不能没入水中,BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。 3)用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内,将管内细胞转移至准备好的离心管内,轻轻吹打液体,使细胞均匀分散,降低DMSO浓度,吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次,均转移至离心管内。 4)800rpm离心5min,弃上清,加入新鲜的培养基,吹打制成细胞悬液。 5)将细胞悬液转移至T25细胞瓶内,补加适量的培养基,轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀,放入温箱内培养。 6)第二天观察细胞贴壁生长情况,换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养,待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代,细胞活力恢复后才能进行后续的实验。 大肠埃希氏菌O157:H7实时荧光PCR检测试剂盒TTimosaponin AIII4599知母皂苷AIII 小肠结肠炎耶尔森氏菌实时荧光PCR检测试剂盒TTigogenin77-剑麻皂素 空肠弯曲菌实时荧光PCR检测试剂盒TTigecycline269 创伤弧菌实时荧光PCR检测试剂盒TTiamulin552975泰妙菌素 溶藻弧菌实时荧光PCR检测试剂盒TTiagabine hydrochloride1458219盐酸噻加宾 Formestane 566-48-3 中文名:福美司坦 分子式:C19H26O3 度:98.0% 关键词: 小鼠抗红细胞抗体(RBC)ELISAKit Folic acid 59-30-3 中文名:叶酸 分子式:C19H19N7O6 度:98.0% 小鼠癌胚抗原(CEA/CD66)ELISAKit Fmoc-O-(benzylphospho)-L-threonine 175291-56-2 中文名:Fmoc-苏氨酸磷酸苄酯 分子式:C26H26NO8P 度:98.0% 关键词: 小鼠水通道蛋白elisa试剂盒 小鼠水通道蛋白试剂盒 规格型号:96T/48T 小鼠水通道蛋白试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:elisa试剂盒(进口分装),产品别名:小鼠水通道蛋白试剂盒、小鼠水通道蛋白eisa试剂盒 保存条件:2-8℃ 保质期:6个月。 Fluoronaphthalene 321-38-0 中文名: 分子式:C10H7F 度:98.0% 小鼠抗胰蛋白酶elisa试剂盒 小鼠抗胰蛋白酶试剂盒 规格型号:96T/48T 小鼠抗胰蛋白酶试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:elisa试剂盒(进口分装),产品别名:小鼠抗胰蛋白酶试剂盒、小鼠抗胰蛋白酶eisa试剂盒 保存条件:2-8℃ 保质期:6个月。 Fluorocytosine 2022-85-7 中文名: 分子式:C4H4FN3O 度:98.0% 关键词: 小鼠己糖激酶elisa试剂盒 小鼠己糖激酶试剂盒 规格型号:96T/48T 小鼠己糖激酶试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:elisa试剂盒(进口分装),产品别名:小鼠己糖激酶试剂盒、小鼠己糖激酶eisa试剂盒 保存条件:2-8℃ 保质期:6个月。 顺式-孟鲁司特 cis-Montelukast 质量规格:美国进口 植物细胞染色体分离试剂盒20 21(R)-羟基孟鲁司特 21(R)-Hydroxy Montelukast 质量规格:美国进口 植物细胞色素C释放凋亡检测试剂盒10 21(S)-羟基孟鲁司特 21(S)-Hydroxy Montelukast 质量规格:美国进口 植物细胞色素C氧化酶活性测定试剂盒20 孟鲁司特二环己基胺盐 Montelukast Dicyclohexylamine Salt 质量规格:美国进口 植物细胞周期G0期同步(SYNCHRONY)处理试剂盒10 孟鲁司特1,2-二醇(非对映) Montelukast 1,2-Diol(Mixture of Diastereomers) 质量规格:美国进口 植物氧化应激活性氧(ROS)光泽精化学发光法定量检测试剂盒50 ent-孟鲁司特钠盐 ent-Montelukast Salt 质量规格:美国进口 植物叶绿体F型ATP酶(FtypeATPase)活性比色法定量检测试剂盒20 双嘧达莫二-O-β-D-葡萄糖苷酸 Dipyridamole Di-O-β-D-glucuronide 质量规格:美国进口 植物叶绿体外膜功能检测试剂盒20 双嘧达莫-D20 (主要的) Dipyridamole-D20 (Major) 质量规格:美国进口 植物叶绿体总蛋白定量检测试剂盒20 双嘧达莫单-O-β-D-葡萄糖苷酸 Dipyridamole Mono-O-β-D-glucuronide 质量规格:美国进口 植物叶片活性叶绿体分离试剂盒20 酮基他米巴罗汀 Keto Tamibarotene 质量规格:美国进口 植物乙醇酸氧化酶(glycolateoxidase)活性比色法定量检测试剂盒20 大鼠神经元细胞提取物培养嗜酸粒细胞直接计数液 Product name said 3-tert-Butoxycarbony-2-(4-anisyl)-4-phenyl-5-oxazolidinecarboxylic acid 196404-55-4 中文名: 分子式:C22H25NO6 度:98.0% 关键词: 嗜肺军团杆菌(LP)核酸检测试剂盒 48T 3-Quinuclidinone 3731-38-2 中文名:3-奎宁环酮 分子式:C7H11NO 度:98.0% 关键词: 视网膜母细胞瘤蛋白1 英文名称: Human Retinoblastoma Protein 1 规格: 48T/96T 英文缩写: RBP1 4,4'-Bis(5-methyl-2-benzoxazolyl)stilbene 2397-00-4 中文名:4,4'-双(5-甲基-2-苯并恶唑基)芪 分子式:C30H22N2O2 食品DNA提取试剂盒 50T 3-Oxo-4-aza-5-alpha-androstane-17β-carboxylic acid 103335-55-3 中文名: 分子式:C19H29NO3 度:98.0% 关键词: 十六烷基基溴化胺 50g 3-O-Methyl-Estrone 1624-62-0 中文名:3-氧甲基基雌酮 分子式:C19H24O2 度:98.0% 关键词: 运输和保存: 视天气状况和运输距离远近,公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。 1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中,置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输;收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养,如无法立刻进行复苏操作,冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。 2)T-25培养瓶充满*培养基后进行常温运输;收到细胞后请镜下观察细胞生长状态,如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作,如悬浮的细胞较多,请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。 一.培养基及培养冻存条件准备: 1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。 2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。 3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。 |