人脐静脉平滑肌细胞提取物培养

人脐静脉平滑肌细胞提取物【Human Umbilical: Normal Umbilical Vein Smooth Muscle Cell Derivatives】

人脐静脉平滑肌细胞提取物是从人原代脐静脉平滑肌细胞提取的，人原代脐静脉平滑肌细胞从正常人脐静脉组织制备。正常人脐静脉组织采集自各地方医院，采集工作根据IRB 和 HIPAA批准的方案进行。所有的产品在发货之前均经过严格的QA/QC流程以确保其质量。这些产品可以直接用于基因克隆，表达图谱分析以及各种分子生物学实验的研究。

总RNA制备：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol试剂分离RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit进行纯化。生物科技提供的总RNA样品附有RNA样品总浓度、总含量、电泳照片、OD值测定结果等。
cDNA制备：纯化后的总RNA来合成cDNA第一链，以50ul总反应体系进行逆转录，体系中包括MMLV反转录酶和随机引物以及10mg总RNA。68℃反应10min 后终止RT反应。利用1x RT Buffer 运输cDNA，1 ul cDNA 足够做一次PCR反应。所有cDNA产品在订单发货之前都经过了严格的QA/QC分析，保证了产品的质量。
蛋白制备：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制备人关节软骨组织裂解液，离心去除组织碎片，通过Bio-Rad蛋白检测试剂盒测定蛋白浓度，组织蛋白稀释后用非还原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巯基乙醇及PMSF，-80度保存。

 实验要点及说明：

1．本方法适用于贴壁细胞培养，而不适用于悬浮细胞培养，悬浮细胞可使用滴片法；
2．所使用的盖玻片应该为优质玻璃，并经过铬酸洗液处理；
3．盖玻片非常薄，易碎，取放盖玻片时动作要轻；
4．如果需要更多生长状态一致的细胞，可以使用较大的培养皿，但不宜过大，以避免培养液的浪费和增加污染机率；
5．如果细胞贴壁生长能力较差，可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。

操作要点：

1）将培养基在37℃水浴锅预热；准备一个15mL无菌的离心管，加入8mL预热培养基。
2）将冻存细胞从液氮罐中取出，快速放入37℃水浴锅中复温（可准备一洁净的烧杯，装满37℃的水，细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内，再逐步转移到水浴锅中）。轻轻晃动冻存管，使细胞能在1~2min内*解冻，使细胞能尽快通过易受损的温度段（-5~0℃）。注意冻存管管口不能没入水中，BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内，将管内细胞转移至准备好的离心管内，轻轻吹打液体，使细胞均匀分散，降低DMSO浓度，吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次，均转移至离心管内。
4）800rpm离心5min，弃上清，加入新鲜的培养基，吹打制成细胞悬液。
5）将细胞悬液转移至T25细胞瓶内，补加适量的培养基，轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀，放入温箱内培养。
6）第二天观察细胞贴壁生长情况，换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养，待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代，细胞活力恢复后才能进行后续的实验。

玉米赤霉醇(右环十四酮酚)ELISA试剂盒96T hydrochloride738盐酸利多卡因

己烯雌酚 EILSA试剂盒96TLevodopa592左旋多巴

群勃龙 ELISA试剂盒96TLevamisole hydrochloride1659盐酸左旋咪唑

勃地酮 ELISA试剂盒96TLenalidomide1917322来那度胺

睾酮 ELISA试剂盒96TLeflunomide7562来氟米特
Oxandrolone  中文名：氧甲氢龙  分子式：C19H30O3  度：98.0%  小鼠C肽(C-Peptide)ELISA试剂盒  

Mesterolone  中文名：甲氢睾酮  分子式：C20H32O2  度：98.0%  小鼠C反应蛋白(CRP)ELISA试剂盒           

Testosterone undecanoate  中文名：十一酸睾酮  分子式：C30H48O3  度：98.0%  小鼠C-肽   英文名称：   C-peptide   规格：   48T/96T   英文缩写：   C-peptide

4-Chlorodehydromethyltestosterone  中文名：4-氯去氢甲基睾酮  分子式：C20H27ClO2  度：98.0%  小鼠心肌肌钙蛋白   英文名称：   cardiac oponin 1   规格：   48T/96T   英文缩写：   cTn1

Cholesterol  中文名：胆固醇  分子式：C27H46O  度：98.0%  小鼠粒细胞集落刺激因子   英文名称：   granulocyte colony-stimulating factor   规格：   48T/96T   英文缩写：   G-CSF
柚皮素查尔酮  HPLC≥98% 20mg Mouse50%complemehemolysis,CH50ELISAKit小鼠血清总补体(CH50)ELISA试剂盒规格：96T/48T

右旋四氢巴马汀 HPLC≥98% 20mg Mouse50%complemehemolysis,CH50ELISA试剂盒小鼠血清总补体(CH50)ELISA试剂盒规格：96T/48T

鱼藤素 HPLC≥98% 20mg Mouse5-Hydroxyyptamine,5HTELISAKit小鼠5羟色胺(5-HT)ELISA试剂盒规格：96T/48T

羽扇豆醇 HPLC≥98% 20mg Mouse5-Hydroxyyptamine,5HTELISA试剂盒小鼠5羟色胺(5-HT)ELISA试剂盒规格：96T/48T

羽扇烯酮 HPLC≥98% 20mg Mouse5-Nucleotidase,5-ELISA试剂盒小鼠5核苷酸酶(5-)ELISA试剂盒规格：96T/48T

玉米黄素 HPLC≥85% 20mg Mouse6-keto-prostaglandin,6-K-PGELISAKit小鼠6同前列腺素(6-K-PG)ELISA试剂盒规格：96T/48T

育亨宾碱 HPLC≥98% 20mg Mouse6-keto-prostaglandin,6-K-PGELISA试剂盒小鼠6同前列腺素(6-K-PG)ELISA试剂盒规格：96T/48T

愈创甘油醚 HPLC≥98% 20mg Mouse6-keto-prostaglandinF1a,6-K-PGF1aELISAKit小鼠6同前列腺素F1a(6-keto-PGF1a)ELISA试剂盒规格：96T/48T

愈创木酚 HPLC≥98% 20mg Mouse6-keto-prostaglandinF1a,6-K-PGF1aELISA试剂盒小鼠6同前列腺素F1a(6-keto-PGF1a)ELISA试剂盒规格：96T/48T

鸢尾苷 HPLC≥98% 20mg Mouse8-Hydroxy-desoxyguanosine,8-OHdGELISAKit小鼠8羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)ELISA试剂盒规格：96T/48T
人脐静脉平滑肌细胞提取物培养Sulfadiazine  68-35-9  中文名：磺胺嘧啶  分子式：C10H10N4O2S    兔坏死因子-a(rabbit TNF-a)   作用：   ELISA   规格：   48T/96T   进口分装  

Rifampicin  13292-46-1  中文名：利福平  分子式：C43H58N4O12    兔干细胞因子(rabbit SCF)   作用：   ELISA   规格：   48T/96T   进口分装

Dyphylline  479-18-5  中文名：二羟丙茶碱  分子式：C10H14N4O4    兔转化生长因子-a(rabbit TGF-a)   作用：   ELISA   规格：   48T/96T   进口分装

Sulfamethazine  57-68-1  中文名：磺胺二甲嘧啶  分子式：C12H14N4O2S    兔转化生长因子-β1(rabbit TGF-b1)   作用：   ELISA   规格：   48T/96T   进口分装

Lomefloxacin hydrochloride  98079-52-8  中文名：盐酸洛美沙星  分子式：C17H20ClF2N3O3    兔转化生长因子-b2(rabbit TGF-b2)   作用：   ELISA   规格：   48T/96T   进口分装

 运输和保存：
视天气状况和运输距离远近，公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。
1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中，置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输；收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养，如无法立刻进行复苏操作，冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。
2)T-25培养瓶充满*培养基后进行常温运输；收到细胞后请镜下观察细胞生长状态，如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作，如悬浮的细胞较多，请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。