小鼠肠微血管细胞提取物【Mouse Intestinal: Normal Intestinal Microvascular Cell Derivatives】 小鼠肠微血管细胞提取物是从小鼠肠微血管细胞提取的,小鼠肠微血管细胞从正常小鼠肠微血管组织制备。所有的产品在发货之前均经过严格的QA/QC流程以确保其质量。这些产品可以直接用于基因克隆,表达图谱分析以及各种分子生物学实验的研究。 总RNA制备:利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol试剂分离RNA,然后用Qiagen RNA Clean Kit进行纯化。生物科技提供的总RNA样品附有RNA样品总浓度、总含量、电泳照片、OD值测定结果等。 cDNA制备:纯化后的总RNA来合成cDNA第一链,以50ul总反应体系进行逆转录,体系中包括MMLV反转录酶和随机引物以及10mg总RNA。68℃反应10min 后终止RT反应。利用1x RT Buffer 运输cDNA,1 ul cDNA 足够做一次PCR反应。所有cDNA产品在订单发货之前都经过了严格的QA/QC分析,保证了产品的质量。 蛋白制备:利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制备人关节软骨组织裂解液,离心去除组织碎片,通过Bio-Rad蛋白检测试剂盒测定蛋白浓度,组织蛋白稀释后用非还原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巯基乙醇及PMSF,-80度保存。 产品名称 | 小鼠肠微血管细胞提取物培养 | 英文名称 | Mouse Intestinal: Normal Intestinal Microvascular Cell Derivatives | 货号 | EYX99149 |

实验要点及说明: 1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法; 2.所使用的盖玻片应该为优质玻璃,并经过铬酸洗液处理; 3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻; 4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率; 5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。 运输和保存: 视天气状况和运输距离远近,公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。 1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中,置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输;收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养,如无法立刻进行复苏操作,冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。 2)T-25培养瓶充满*培养基后进行常温运输;收到细胞后请镜下观察细胞生长状态,如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作,如悬浮的细胞较多,请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。 一.培养基及培养冻存条件准备: 1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。 2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。 3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
 操作要点: 1)将培养基在37℃水浴锅预热;准备一个15mL无菌的离心管,加入8mL预热培养基。 2)将冻存细胞从液氮罐中取出,快速放入37℃水浴锅中复温(可准备一洁净的烧杯,装满37℃的水,细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内,再逐步转移到水浴锅中)。轻轻晃动冻存管,使细胞能在1~2min内*解冻,使细胞能尽快通过易受损的温度段(-5~0℃)。注意冻存管管口不能没入水中,BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。 3)用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内,将管内细胞转移至准备好的离心管内,轻轻吹打液体,使细胞均匀分散,降低DMSO浓度,吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次,均转移至离心管内。 4)800rpm离心5min,弃上清,加入新鲜的培养基,吹打制成细胞悬液。 5)将细胞悬液转移至T25细胞瓶内,补加适量的培养基,轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀,放入温箱内培养。 6)第二天观察细胞贴壁生长情况,换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养,待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代,细胞活力恢复后才能进行后续的实验。 猫疱疹病毒1型实时荧光PCR检测试剂盒Otophylloside B 4'''-O-β-D-cymaropyranoside1714225 兔瘟RT-PCR检测试剂盒/Otophylloside B 4'''-O-α-L-cymaropyranoside1714222 支原体PCR检测试剂盒Ornidazole167732奥硝唑 衣原体实时荧光PCR检测试剂盒Ophiopogonin D9456194麦冬皂苷D 哺乳动物呼肠孤病毒实时荧光RT-PCR检测试剂盒Ondansetron996142昂丹司琼 Levamisole hydrochloride 中文名:盐酸左旋咪唑 分子式:C11H13ClN2S 猪蛋白激酶A(PKA)ELISA试剂盒 Lenalidomide 中文名:来那度胺 分子式:C13H13N3O3 猪胆囊收缩素/肠促胰酶肽(CCK)ELISA试剂盒 Leflunomide 中文名:来氟米特 分子式:C12H9F3N2O2 猪单核细胞增多性李斯特菌素(listeriolysin)ELISA试剂盒 L-Dihydroorotic acid 中文名:L-4,5-二氢乳清酸 分子式:C5H6N2O4 猪凋亡相关因子elisa试剂盒 猪凋亡相关因子试剂盒 规格型号:96T/48T 猪凋亡相关因子试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:elisa试剂盒(进口分装),产品别名:猪凋亡相关因子试剂盒、猪凋亡相关因子eisa试剂盒 保存条件:2-8℃ 保质期:6个月。 L-Carnosine 中文名:L-肌肽 分子式:C9H14N4O3 猪地塞米松elisa试剂盒 猪地塞米松试剂盒 规格型号:96T/48T 猪地塞米松试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:elisa试剂盒(进口分装),产品别名:猪地塞米松试剂盒、猪地塞米松eisa试剂盒 保存条件:2-8℃ 保质期:6个月。 血红素(>95%,BR) Hematin 质量规格:>95%,BR 动物源性食品山羊源试剂盒20 聚乙二醇800 PEG 800 质量规格:BR 动物源性食品鼠源试剂盒20 炔雌醚;炔雌醇环戊醚 Quinestrol 质量规格:USP 动物源性食品鸭源试剂盒20 二酯酶 (比活度:>20 U/mg,BC) Phosphodiesterase I from Crotalus adamanteus Venom 质量规格:比活度:>20 U/mg,BC 动物源性食品羊源试剂盒20 化丙啶(>95% (HPLC),BC) Propidium iodide 质量规格:>95% (HPLC),BC 动物源性食品猪源试剂盒20 十二烷基苯磺酸钠(>95%,Tech Grade) dodecylbenzenesulfonate 质量规格:>95%,Tech Grade 动物源性饲料牛源试剂盒20 硅酸钠九水(>98%,BR) silicate hydrate 质量规格:>98%,BR 动物源性饲料羊源试剂盒20 5--3-吲哚基-β-D-吡喃半乳糖苷(>98%,BR) Bluo-Gal 质量规格:>98%,BR 动物源性饲料样品处理试剂盒20 氢二钠二水 Di hydrogen phosphate dihydrate 质量规格:>99%,BR 动物脂肪组织细胞分离培养试剂盒10 中性蛋白酶 Neutral Protease from Bacillus polymyxa 质量规格:酶活:20万u/g 动物直肠组织细胞分离培养试剂盒10 小鼠肠微血管细胞提取物培养谷酰胺、谷酸(两种均可测) Glamine and glamic acid (two can be measured) 3-Methyl-1-(2-piperidinophenyl)butylamine N-acetylglutamate salt 中文名: 分子式:C23H37N3O5 谷酰胺 英文名称: ansglaminase 规格: 48T/96T 英文缩写: TG p-Nitrohydrocinnamic acid 16642-79-8 中文名: 分子式:C9H9NO4 谷酸测试盒 Glamate test kit 3-Methyl-1-(2-piperidinophenyl)butylamine N-acetylglutamate salt 中文名: 分子式:C23H37N3O5 度:98.0% 谷胱甘肽还原酶elisa试剂盒 谷胱甘肽还原酶试剂盒 规格型号:96T/48T 谷胱甘肽还原酶试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:elisa试剂盒(进口分装),产品别名:谷胱甘肽还原酶试剂盒、谷胱甘肽还原酶elisa试剂盒 保存条件:2-8℃ 保质期:6个月。 6-Aminoquinoxaline 6298-37-9 中文名:6-氨基喹喔啉 分子式:C8H7N3 谷胱甘肽还原酶(GR)测试盒 紫外分光光度法 50管/48样 Venlaine hydrochloride 99300-78-4 中文名:盐酸文拉法辛 分子式:C17H28ClNO2 |