产品名称 | 大鼠脑成纤维细胞提取物培养 | 英文名称 | Rat Brain: Normal Brain Fibroblasts Derivatives | 货号 | EYX99273 |
大鼠脑成纤维细胞提取物【Rat Brain: Normal Brain Fibroblasts Derivatives】 大鼠脑成纤维细胞提取物是从大鼠原代脑成纤维细胞提取的,大鼠原代脑成纤维细胞从正常大鼠脑组织制备。所有的产品在发货之前均经过严格的QA/QC流程以确保其质量。这些产品可以直接用于基因克隆,表达图谱分析以及各种分子生物学实验的研究。 总RNA制备:利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol试剂分离RNA,然后用Qiagen RNA Clean Kit进行纯化。生物科技提供的总RNA样品附有RNA样品总浓度、总含量、电泳照片、OD值测定结果等。 cDNA制备:纯化后的总RNA来合成cDNA第一链,以50ul总反应体系进行逆转录,体系中包括MMLV反转录酶和随机引物以及10mg总RNA。68℃反应10min 后终止RT反应。利用1x RT Buffer 运输cDNA,1 ul cDNA 足够做一次PCR反应。所有cDNA产品在订单发货之前都经过了严格的QA/QC分析,保证了产品的质量。 蛋白制备:利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制备人关节软骨组织裂解液,离心去除组织碎片,通过Bio-Rad蛋白检测试剂盒测定蛋白浓度,组织蛋白稀释后用非还原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巯基乙醇及PMSF,-80度保存。 
实验要点及说明: 1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法; 2.所使用的盖玻片应该为优质玻璃,并经过铬酸洗液处理; 3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻; 4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率; 5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
 操作要点: 1)将培养基在37℃水浴锅预热;准备一个15mL无菌的离心管,加入8mL预热培养基。 2)将冻存细胞从液氮罐中取出,快速放入37℃水浴锅中复温(可准备一洁净的烧杯,装满37℃的水,细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内,再逐步转移到水浴锅中)。轻轻晃动冻存管,使细胞能在1~2min内*解冻,使细胞能尽快通过易受损的温度段(-5~0℃)。注意冻存管管口不能没入水中,BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。 3)用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内,将管内细胞转移至准备好的离心管内,轻轻吹打液体,使细胞均匀分散,降低DMSO浓度,吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次,均转移至离心管内。 4)800rpm离心5min,弃上清,加入新鲜的培养基,吹打制成细胞悬液。 5)将细胞悬液转移至T25细胞瓶内,补加适量的培养基,轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀,放入温箱内培养。 6)第二天观察细胞贴壁生长情况,换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养,待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代,细胞活力恢复后才能进行后续的实验。 大豆内源基因恒温核酸检测试剂盒24T/48TNeridienone B616716 玉米内源基因恒温核酸检测试剂盒24T/48TNeoprzewaquinone A579 牡蛎中沙门氏菌核酸检测试剂盒(无需过夜培养)24T/48TNeochlorogenic acid63新绿原酸 生菜中沙门氏菌核酸检测试剂盒(无需过夜培养)24T/48TNeochlorogenic acid methyl ester12345新绿原酸甲酯 牛奶中阪崎肠杆菌核酸检测试剂盒(无需过夜培养)24T/48TNefopam hydrochloride233277盐酸奈福泮 FTFungalDNAKit 100T 3-O-Methyl-Estrone 中文名:3-氧甲基基雌酮 分子式:C19H24O2 FoodDNAExactionKit 100T 3-Oxo-4-aza-5-alpha-androstane-17β-carboxylic acid 103335-55-3 中文名: 分子式:C19H29NO3 FMS样酪酸激酶 英文名称: Fms-related tyrosine kinase-3 规格: 48T/96T 英文缩写: Flt3 Memantine hydrochloride 中文名:盐酸美金刚胺 分子式:C12H22ClN Fluorescein 50g Quetiapine fumarate 111974-72-2 中文名:富马酸喹硫平 分子式:C46H54N6O8S2 Fluorescamine 500mg Quetiapine fumarate 中文名:富马酸喹硫平 分子式:C46H54N6O8S2 四苯硼钠 tetraphenylboron 质量规格:AR 人脯氨酸肽酶(PEPD)试剂盒 Human PEPD ELISA Kit 磺基水杨酸钠 sulfosalicylate 质量规格:AR 人葡萄球菌蛋白A(SPA)ELISA检测试剂盒HumanStaphylococalproteinA,SPAELISAKit 96T/48T 亚硝基红盐 Nitroso R Salt 质量规格:AR 人葡萄糖60酸异构酶(GPI)ELISA检测试剂盒Humanglucose-6-phosphateisomerase,GPIELISAKit 96T/48T 玫瑰红酸钠 Rhodizonic acid salt 质量规格:AR 人葡萄糖氧化酶(GOD)ELISA检测试剂盒Humanglucoseoxidase,GODELISAKit 96T/48T 靛蓝二磺酸钠 Indigo carmine 质量规格:AR 人葡萄糖转运蛋白1(GL1)ELISA检测试剂盒HumanGlucoseanspoer1,GL1ELISAKit 96T/48T 变色酸钠,铬变酸二钠 Chromotropic acid di salt dihydrate 质量规格:AR 人前白蛋白(PA)ELISA检测试剂盒Humanprealbumin,PAELISAKit 96T/48T 百里酚蓝钠盐 Bromothymol blue salt 质量规格:AR 人前胶原C端肽酶(PCP)ELISA检测试剂盒HumanprocollagenCpeptidase,PCPELISAKit 96T/48T 特地唑胺游离碱 Tedizolid free base 质量规格:>98%,BR 人前列环素(PGI)ELISA检测试剂盒Humanprostacycline,PGIELISAKit 96T/48T 特地唑胺;特地唑胺酯 Tedizolid phosphate;TR-701FA 质量规格:>99%;BR 人潜伏膜蛋白1(LMP-1)ELISA检测试剂盒Humanlatemembraneprotein-1,LMP-1ELISAKit 96T/48T 3-甲基-2-苯并噻唑酮腙盐酸盐,水合 MBTH hydrochloride hydrate 质量规格:>98%,BR 人强啡肽(Dyn)ELISA检测试剂盒Humandynorphin,DynELISAKit 96T/48T 大鼠脑成纤维细胞提取物培养生存素 (survivin) 作用: ELISA 规格: 48T/96T 进口分装 Anthraflavic acid 中文名:二羟蒽醌 分子式:C14H8O4 神经营养素3 英文名称: Neuroophin-3 规格: 48T/96T 英文缩写: -3 3-Hydroxychimaphilin 中文名:3-羟基梅笠草素 分子式:C12H10O3 神经营养素 4(-4) 作用: ELISA 规格: 96T * 3-Methyl-1-(2-piperidinophenyl)butylamine N-acetylglutamate salt 219921-94-5 中文名: 分子式:C23H37N3O5 度:98.0% 关键词: 神经营养素 4(-4) 作用: ELISA 规格: 48T/96T 进口分装 3-Methoxyfuran 3420-57-3 中文名: 分子式:C5H6O2 神经营养素 3(-3) 作用: ELISA 规格: 48T/96T 进口分装 3-Methoxyfuran 3420-57-3 中文名: 分子式:C5H6O2 度:99.0% 关键词: 中药对照品; 中药标准品; 植物提取物; 天然产物; 天然产物库 运输和保存: 视天气状况和运输距离远近,公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。 1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中,置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输;收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养,如无法立刻进行复苏操作,冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。 2)T-25培养瓶充满*培养基后进行常温运输;收到细胞后请镜下观察细胞生长状态,如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作,如悬浮的细胞较多,请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。 一.培养基及培养冻存条件准备: 1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。 2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。 3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。 |