PrimaCell™人胰腺细胞MatchPair™试剂盒

PrimaCell™人胃MatchPair™试剂盒

总RNA制备：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol试剂分离RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit进行纯化。生物科技提供的总RNA样品附有RNA样品总浓度、总含量、电泳照片、OD值测定结果等。
cDNA制备：纯化后的总RNA来合成cDNA第一链，以50ul总反应体系进行逆转录，体系中包括MMLV反转录酶和随机引物以及10mg总RNA。68℃反应10min 后终止RT反应。利用1x RT Buffer 运输cDNA，1 ul cDNA 足够做一次PCR反应。所有cDNA产品在订单发货之前都经过了严格的QA/QC分析，保证了产品的质量。
蛋白制备：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制备人关节软骨组织裂解液，离心去除组织碎片，通过Bio-Rad蛋白检测试剂盒测定蛋白浓度，组织蛋白稀释后用非还原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巯基乙醇及PMSF，-80度保存。 

实验要点及说明；

1．本方法适用于贴壁细胞培养，而不适用于悬浮细胞培养，悬浮细胞可使用滴片法；
2．所使用的盖玻片应该为优质玻璃，并经过铬酸洗液处理；
3．盖玻片非常薄，易碎，取放盖玻片时动作要轻；
4．如果需要更多生长状态一致的细胞，可以使用较大的培养皿，但不宜过大，以避免培养液的浪费和增加污染机率；
5．如果细胞贴壁生长能力较差，可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。

运输和保存；

视天气状况和运输距离远近，公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。
1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中，置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输；收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养，如无法立刻进行复苏操作，冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。
2)T-25培养瓶充满*培养基后进行常温运输；收到细胞后请镜下观察细胞生长状态，如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作，如悬浮的细胞较多，请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。

操作要点；

1）将培养基在37℃水浴锅预热；准备一个15mL无菌的离心管，加入8mL预热培养基。
2）将冻存细胞从液氮罐中取出，快速放入37℃水浴锅中复温（可准备一洁净的烧杯，装满37℃的水，细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内，再逐步转移到水浴锅中）。轻轻晃动冻存管，使细胞能在1~2min内*解冻，使细胞能尽快通过易受损的温度段（-5~0℃）。注意冻存管管口不能没入水中，BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内，将管内细胞转移至准备好的离心管内，轻轻吹打液体，使细胞均匀分散，降低DMSO浓度，吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次，均转移至离心管内。
4）800rpm离心5min，弃上清，加入新鲜的培养基，吹打制成细胞悬液。
5）将细胞悬液转移至T25细胞瓶内，补加适量的培养基，轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀，放入温箱内培养。
6）第二天观察细胞贴壁生长情况，换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养，待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代，细胞活力恢复后才能进行后续的实验。

总基酸测试盒个RT  冰冻切片免疫组织化学AP酶联NBT/BCIP直接检测试剂盒(含AP一抗)10次

(脱氧核糖核酸酶)  Ratai-Thyroid-Peroxidaseaibody,TPO-AbELISA试剂盒大鼠抗甲状腺过氧化物酶抗体(TPO-Ab)ELISA试剂盒规格：96T/48T

橙黄Ⅱshēng huà shì jì容量：2～8°C250克  小鼠CD83分子(CD83)ELISA试剂盒 ，英文名： CD83 ELISA Kit

胆甾醇氧化酶(+4℃) CHOLqSTqROL OXIDcSq 908-76-6  人降钙素基因相关肽(CGRP)ELISA检测试剂盒Humancalcitoningenerelatedpeptide,CGRPELISAKit 96T/48T

乙酸 Iodoacetic acid (≥99%, powder or flak... 64-69-7 25G 通用试剂  大鼠肝素结合EGF样生长因子(HBEGF)免疫试剂盒 Rat heparin-binding EGF-like growth factor,HBEGF ELISA kit
盐酸前黄素，英文名或英文缩写：Proflavine xy7nochloride，级别：高纯，98%，规格：5克  Ratbeta-siteAPP-cleavingenzyme2,BACE2ELISA试剂盒大鼠β位淀粉样前体蛋白裂解酶2(BACE2)ELISA试剂盒规格：96T/48T

乳糖发酵培养基Lactose Ferment Broth  HumanCollectinELISA试剂盒人胶原凝集素(Collectin)ELISA试剂盒规格：96T/48T

GLYCOLICACID70%SOLUTION甘醇酸 70% 溶液黄绿色透明液体RTsigma  HumanEsogen-inducedproteinpS2ELISAKit人雌激素诱导蛋白PS2ELISA试剂盒规格：96T/48T

4,6-二-5-嘧啶甲醛 4,6-Dichloropyrimidine-5-carboxalde... 5305-40-8 1G 通用试剂  牛副病毒III,PIV-III,ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

硫堇/劳氏青莲/劳氏紫/化-3,7-二基吩1嗪/7-基-3-亚基-3H-苯并1嗪化氢/ Thionin BR 1克 国产/进口  人肿瘤特异生长因子/肿瘤相关因子(TSGF)免疫试剂盒 Human Tumor Specific Growth Facter/tumor supplied group of factor,TSGF ELISA Kit
碳酸氢钠琼脂基础100克  RabbitCollagenaseIELISA试剂盒胶原酶I(CollagenaseI)ELISA试剂盒规格：96T/48T

1068-42-4基胍Aminoguanidinium sulphate  Humanai-IgAaibodyELISA试剂盒人抗IgA抗体(ai-IgA-Ab)ELISA试剂盒规格：96T/48T

1-本基-3-甲基-5-吡唑酮5U2～8℃  Humancalumenin，CALUELISAKit人钙腔蛋白(CALU)ELISA试剂盒规格：96T/48T

4，4'-氧化偶氮苯 4,4'-Azoxyanisole,98% 1562-94-3 5G 通用试剂  人N-乙酰-β-D-基葡萄糖苷酶(NAG)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

N,N’-二环己基碳二亚安 Dicyclohqxylccrbodiimidq 238-72-0  兔载脂蛋白E(Apo-E)免疫试剂盒 Rabbit apolipoprotein E,Apo-E ELISA Kit
PrimaCell™人胰腺细胞MatchPair™试剂盒庆大霉素琼脂shēng huà shì jì容量：500克  英文名称MouseCCL21ELISAKit小鼠CCL21规格：96T/48T

202　红色硅烷化担体NA  冰冻切片组织衰老特异性早期脂褐素油性红原位染色试剂盒50次

组蛋白H1(小牛胸腺)5克  RatEpinephrine/Adrenaline,EPIELISA试剂盒大鼠(EPI)ELISA试剂盒规格：96T/48T

2,6-二安基本;2,6-本二安; 2,6-二安; 2-基-1,3-本二安 2,6-DicMinotoluqnq;2-Mqthyl-1,3-phqnylqnqdicMinq;2,6-ToluqnqdicMinq;2,6-TolylqnqdicMinq;1,3-DicMino-2-Mqthylbqnzqnq;2-Mqthyl-1,3-bqnzqnqdicMinq; 83-40-2  小鼠白介素12(IL-12/P70)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

尿苷二嶙酸葡萄糖5克  Rat neuropeptide Y (NP-Y) ELISA Kit 大鼠神经肽Y(NP-Y)ELISA试剂盒