小鼠冠状动脉内皮细胞提取物培养

小鼠冠状动脉内皮细胞提取物【Mouse Coronary Artery：NormalCoronary Artery Derivatives】

小鼠冠状动脉内皮细胞提取物是从小鼠原代冠状动脉内皮细胞提取的，小鼠原代冠状动脉内皮细胞从正常小鼠动脉组织制备。所有的产品在发货之前均经过严格的QA/QC流程以确保其质量。这些产品可以直接用于基因克隆，表达图谱分析以及各种分子生物学实验的研究。

总RNA制备：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol试剂分离RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit进行纯化。生物科技提供的总RNA样品附有RNA样品总浓度、总含量、电泳照片、OD值测定结果等。
cDNA制备：纯化后的总RNA来合成cDNA第一链，以50ul总反应体系进行逆转录，体系中包括MMLV反转录酶和随机引物以及10mg总RNA。68℃反应10min 后终止RT反应。利用1x RT Buffer 运输cDNA，1 ul cDNA 足够做一次PCR反应。所有cDNA产品在订单发货之前都经过了严格的QA/QC分析，保证了产品的质量。
蛋白制备：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制备人关节软骨组织裂解液，离心去除组织碎片，通过Bio-Rad蛋白检测试剂盒测定蛋白浓度，组织蛋白稀释后用非还原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巯基乙醇及PMSF，-80度保存。 

 实验要点及说明：

1．本方法适用于贴壁细胞培养，而不适用于悬浮细胞培养，悬浮细胞可使用滴片法；
2．所使用的盖玻片应该为优质玻璃，并经过铬酸洗液处理；
3．盖玻片非常薄，易碎，取放盖玻片时动作要轻；
4．如果需要更多生长状态一致的细胞，可以使用较大的培养皿，但不宜过大，以避免培养液的浪费和增加污染机率；
5．如果细胞贴壁生长能力较差，可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。

 运输和保存：

视天气状况和运输距离远近，公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。
1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中，置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输；收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养，如无法立刻进行复苏操作，冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。
2)T-25培养瓶充满*培养基后进行常温运输；收到细胞后请镜下观察细胞生长状态，如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作，如悬浮的细胞较多，请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。

操作要点：

1）将培养基在37℃水浴锅预热；准备一个15mL无菌的离心管，加入8mL预热培养基。
2）将冻存细胞从液氮罐中取出，快速放入37℃水浴锅中复温（可准备一洁净的烧杯，装满37℃的水，细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内，再逐步转移到水浴锅中）。轻轻晃动冻存管，使细胞能在1~2min内*解冻，使细胞能尽快通过易受损的温度段（-5~0℃）。注意冻存管管口不能没入水中，BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内，将管内细胞转移至准备好的离心管内，轻轻吹打液体，使细胞均匀分散，降低DMSO浓度，吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次，均转移至离心管内。
4）800rpm离心5min，弃上清，加入新鲜的培养基，吹打制成细胞悬液。
5）将细胞悬液转移至T25细胞瓶内，补加适量的培养基，轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀，放入温箱内培养。
6）第二天观察细胞贴壁生长情况，换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养，待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代，细胞活力恢复后才能进行后续的实验。

内酰胺酶 ELISA试剂盒96TN-Acetoacetylmorpholine166954N-乙酰吗啉

利巴韦林 ELISA试剂盒96TN-Methyl,7-dioxo-sulfamoyl,6-dihydroH-thieno[2,3-b]thiopyran-yl]acetamide143

沙拉沙星 ELISA试剂盒96TN6-Benzyladenine12149N6-苄基腺嘌呤

双氟沙星 ELISA试剂盒96TN6-Benzoyladenine059N6-苯甲酰基腺嘌呤

杆菌肽 ELISA试剂盒96TN6-Benzoyl'-O-(4,4'-dimethoxytrityl)'-deoxyadenosine643258N6-苯甲酰基'-O-(4,4'-二甲氧基三苯基)'-脱氧腺苷
L-Isoleucine   50g                 Vildagliptin  274901-16-5  中文名：维达列汀  分子式：C17H25N3O2 

Lipopolysaccharides,Escherichiacoli055:B5  Vildagliptin  中文名：维达列汀  分子式：C17H25N3O2 

Lectin,fromiticumvulgaris                    Trenbolone heptanoate  N  中文名：  分子式：C25H34O3 

Lectin,fromArachisHypogaea(pean)  Trenbolone heptanoate  中文名：  分子式：C25H34O3 

Kisser封片液   10ml  Anthraquinone  中文名：蒽醌  分子式：C14H8O2  度：98.0%
亚油酸胆酯(>95.0%(T))  Cholesterol Linoleate  质量规格：>95.0%(T) 小鼠再生胰岛衍生蛋白3α(REG3α)ELISA试剂盒 ，英文名： REG3α ELISA Kit

棕榈酸胆酯(>97.0%(T))  Cholesterol Palmitate  质量规格：>97.0%(T) 小鼠再生胰岛衍生蛋白3γ(REG3γ)ELISA试剂盒 ，英文名： REG3γ ELISA Kit

正辛酸胆酯(>95.0%(GC))  Cholesterol n-Octanoate  质量规格：>95.0%(GC) 小鼠早期生长应答因子1(EGR1)ELISA试剂盒 ，英文名： EGR1 ELISA Kit

油酸胆酯(>85.0%(GC))  Cholesterol Oleate  质量规格：>85.0%(GC) 小鼠早期生长应答因子2(EGR2)ELISA试剂盒 ，英文名： EGR2 ELISA Kit

氯化胆(来自牛脂)(>87.0%(GC))  Cholesteryl Chloride from Beef Fat  质量规格：>87.0%(GC) 小鼠早期生长应答因子4(EGR4)ELISA试剂盒 ，英文名： EGR4 ELISA Kit

反-肉桂酸胆酯(>96.0%(HPLC)(T))  Cholesterol trans-Cinnamate  质量规格：>96.0%(HPLC)(T) 小鼠粘蛋白/粘液素1(MUC1)ELISA试剂盒 ，英文名： MUC1 ELISA Kit

癸酸胆酯  Cholesterol Decanoate  质量规格： 小鼠粘蛋白/粘液素2(MUC2)ELISA试剂盒 ，英文名： MUC2 ELISA Kit

氢化肉桂酸胆酯(>95.0%(GC))  Cholesterol Hydrocinnamate  质量规格：>95.0%(GC) 小鼠粘蛋白/粘液素5AC(MUC5AC)ELISA检测试剂盒MouseMucin-5subtypeAC,MUC5ACELISAKit 96T/48T

胆酯(>95.0%(GC))  Cholesterol Laurate  质量规格：>95.0%(GC) 小鼠粘蛋白/粘液素5AC(MUC5AC)ELISA试剂盒 ，英文名： MUC5AC ELISA Kit

豆蔻酸胆酯(>98.0%(T))  Cholesterol Myristate  质量规格：>98.0%(T) 小鼠粘蛋白/粘液素5B(MUC5B)ELISA试剂盒 ，英文名： MUC5B ELISA Kit
小鼠冠状动脉内皮细胞提取物培养干细胞因子受体 (SCF R)   作用：   ELISA   规格：   48T/96T   进口分装     Paris Saponin VII  68124-04-9  中文名：重楼皂苷VII  分子式：C51H82O21 

干细胞因子受体   英文名称：   stem cell factor receptor   规格：   48T/96T   英文缩写：   SCF R  Parecoxib   198470-85-8  中文名：帕瑞考昔钠  分子式：C19H17N2NaO4S 

干细胞因子 (SCF)   作用：   ELISA   规格：   48T/96T   进口分装  Paris Saponin VII  68124-04-9  中文名：重楼皂苷VII  分子式：C51H82O21  度：98.0%  关键词： 

干细胞因子   英文名称：   stem cell factor   规格：   48T/96T   英文缩写：   SCF  Parecoxib   198470-85-8  中文名：帕瑞考昔钠  分子式：C19H17N2NaO4S  度：98.0%  关键词： 

干扰素α受体   英文名称：   Human Ierferon α Receptor   规格：   48T/96T   英文缩写：   IFNαR  Pramipexole dihydrochloride  104632-25-9  中文名：盐酸普拉克索  分子式：C10H19Cl2N3S