大鼠皮下脂肪细胞提取物说明书

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大鼠皮下脂肪细胞提取物【Rat Fat: Normal Subcutaneous Fat CellsDerivatives】

大鼠皮下脂肪细胞提取物是从大鼠原代皮下脂肪细胞提取的，大鼠原代皮下脂肪细胞从正常大鼠脂肪组织制备。所有的产品在发货之前均经过严格的QA/QC流程以确保其质量。这些产品可以直接用于基因克隆，表达图谱分析以及各种分子生物学实验的研究。

总RNA制备：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol试剂分离RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit进行纯化。生物科技提供的总RNA样品附有RNA样品总浓度、总含量、电泳照片、OD值测定结果等。
cDNA制备：纯化后的总RNA来合成cDNA第一链，以50ul总反应体系进行逆转录，体系中包括MMLV反转录酶和随机引物以及10mg总RNA。68℃反应10min 后终止RT反应。利用1x RT Buffer 运输cDNA，1 ul cDNA 足够做一次PCR反应。所有cDNA产品在订单发货之前都经过了严格的QA/QC分析，保证了产品的质量。
蛋白制备：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制备人关节软骨组织裂解液，离心去除组织碎片，通过Bio-Rad蛋白检测试剂盒测定蛋白浓度，组织蛋白稀释后用非还原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巯基乙醇及PMSF，-80度保存。

细胞培养方法：

1、细胞传代：细胞密度达到80-90%时即可传代
①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%胰酶（T25瓶），使胰酶覆盖整个瓶或皿，盖好放入培养箱消化；
③1-2min后，显微镜下观察细胞，若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入*培养基终止消化；若细胞还是贴壁，放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止；
④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清；
⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中，T25培养瓶加6-8ml培养基；
⑥悬浮细胞直接离心收集，细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。
2、细胞复苏：
①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化，时间1min左右，加入4-5ml培养基混匀。
②在1000RPM左右条件下离心4min，弃上清,加1-2ml培养基吹匀，将细胞悬液加入培养瓶中，补加适量培养基。
3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种
①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次，加入1mL 0.25%胰蛋白酶（T25瓶）
②1-2min后，显微镜下观察细胞，大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入*培养基终止消化；
③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清，加1ml冻存液重悬细胞；
④将冻存管放入程序降温盒，放入-80℃冰箱，4小时后将冻存管转入液氮罐储存。

实验事项：

1. 试剂准备：所有试剂都必须在使用前达到室温，使用后请立即按照说明书要求保存试剂。  实验操作中请使用一次性的吸头，避免交叉污染。
2.   加样：加样或加试剂时，请注意在吸取标本 / 标准品，酶结合物或底物时，前一个孔与后一个孔加样之间的时间间隔如果太大，将会导致不同的“预孵育"时间，从而明显地影响到测量值的准确性及重复性。一次加样时间(包括标准品及所有样品)好控制在10分钟内，如标本数量多，推荐使用多道移液器加样。
3.   孵育：为防止样品蒸发，试验时将反应板放于铺有湿布的密闭盒内，酶标板加上盖或覆膜，以避免液体蒸发；洗板后应尽快进行下步操作，任何时侯都应避免酶标板处于干燥状态;同时应严格遵守给定的孵育时间和温度。
4.   洗涤：洗涤过程中反应孔中残留的洗涤液应在滤纸上充分拍干，勿将滤纸直接放入反应孔中吸水，同时要消除板底残留的液体和手指印，避免影响后的酶标仪读数。
5.  试剂配制：Detection A及Detection B在使用前请手甩几下或少时离心处理，以使管壁或瓶盖的液体沉积到管底。标准品、检测溶液A工作液、检测溶液B工作液请依据所需的量配置使用，并使用相应的稀释液配制，不能混淆。请确配置标准品及工作液，尽量不要微量配置(如吸取检测溶液A时，一次不要小于10μl)，以避免由于不准确稀释而造成的浓度误差；请勿重复使用已稀释过的标准品、检测溶液A工作液或检测溶液B工作液。
6.  反应时间的控制：加入底物后请定时观察反应孔的颜色变化(比如，每隔10分钟)，如颜色较深，请提前加入终止液终止反应，避免反应过强从而影响酶标仪光密度读数。
7.  底物：底物请避光保存，在储存和温育时避免强光直接照射。
    建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。
    如标本中待测物质含量过高，请先稀释后再测定，计算时请后乘以稀释倍数。

动物/细胞基因组DNA提取试剂盒次6-Amino-methyl-nitrosouracil69728

酵母基因组DNA提取试剂盒次 6-Amino,3-dimethyluracil66421

昆虫基因组DNA提取试剂盒次 6,7-Dihydroneridienone A729596

土壤基因组DNA提取试剂盒 次 6,6'-Di-O-sinapoylsucrose6866156,6'- 二芥子酰基蔗糖

细菌基因组DNA提取试剂盒次6-(5-Chloropyridin-yl)-hydroxy,7-dihydroH-pyrrolo[3,4-b]pyrazin-one41
Gliquidone  33342-05-1  中文名：格列喹酮  分子式：C27H33N3O6S  度：98.0%  关键词：    豚鼠基质金属蛋白酶9elisa试剂盒   豚鼠基质金属蛋白酶9试剂盒   规格型号：96T/48T   豚鼠基质金属蛋白酶9试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：豚鼠基质金属蛋白酶9试剂盒、豚鼠基质金属蛋白酶9eisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。  

Glimepiride  93479-97-1  中文名：格列美脲  分子式：C24H34N4O5S  度：98.0%  关键词：    小鼠酸性粒细胞趋化因子elisa试剂盒   小鼠酸性粒细胞趋化因子试剂盒   规格型号：96T/48T   小鼠酸性粒细胞趋化因子试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：小鼠酸性粒细胞趋化因子试剂盒、小鼠酸性粒细胞趋化因子eisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。

Gliclazide  21187-98-4  中文名：格列齐特  分子式：C15H21N3O3S  度：98.0%  关键词：    小鼠小扁结合型甲胎蛋白elisa试剂盒   小鼠小扁结合型甲胎蛋白试剂盒   规格型号：96T/48T   小鼠小扁结合型甲胎蛋白试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：小鼠小扁结合型甲胎蛋白试剂盒、小鼠小扁结合型甲胎蛋白eisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。

Glaucogenin C mono-D-thevetoside  849201-84-9  中文名：  分子式：C28H40O9  度：98.0%  关键词：    小鼠表皮调节素elisa试剂盒   小鼠表皮调节素试剂盒   规格型号：96T/48T   小鼠表皮调节素试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：小鼠表皮调节素试剂盒、小鼠表皮调节素eisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。

Ginsenoyne K  141947-42-4  中文名：  分子式：C17H24O3  度：%  关键词：    豚鼠神经肽Aelisa试剂盒   豚鼠神经肽A试剂盒   规格型号：96T/48T   豚鼠神经肽A试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：豚鼠神经肽A试剂盒、豚鼠神经肽Aeisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。
苏丹蓝II/溶剂蓝35  Sudan Blue II/Solvent Blue 35  质量规格：BS 大鼠*状腺原氨酸(T3)试剂盒 Rat i-iodothyronine,T3 ELISA Kit

甲基红  Methyl red  质量规格：IND 大鼠色氨酸5羟化酶2(TPH2)试剂盒 Rat yptophan 5-hydroxylase 2,TPH2 ELISA kit

间甲基红  m-Methyl red  质量规格：IND 大鼠色氨酸羟化酶(TPH)试剂盒 Rat yptophan Hydroxylase,TPH ELISA Kit

甲基红钠盐/酸性红2  Methyl Red  salt  质量规格：IND 大鼠色素上皮衍生因子(PEDF)ELISA检测试剂盒Ratpigmeepithelium-derivedfactor,PEDFELISAKit 96T/48T

西诺沙星；新恶酸  Cinoxacin  质量规格：>99%,进分 大鼠色素上皮衍生因子(PEDF)试剂盒 Rat pigme epithelium-derived factor,PEDF ELISA Kit

19-去甲-4-雄烯二酮  Norandrostenedione  质量规格：>99%,BR 大鼠山梨醇脱氢酶(SDH)试剂盒 Rat sorbitol dehydrogenase,SDH ELISA Kit

达格列净一水 ;达格列嗪水合物  Dapagliflozin propanediol hydrate  质量规格：>99% 大鼠上皮中性粒细胞活化肽78(ENA-78/CXCL5)ELISA检测试剂盒RatEpithelialneuophilactivatingpeptide78,ENA-78ELISAKit 96T/48T

安塞曲匹/胆脂转移蛋白阻滞剂  Anacetrapib;MK0859  质量规格：>98% 大鼠上皮中性粒细胞活化肽78(ENA-78/CXCL5)试剂盒 Rat Epithelial neuophil activating peptide 78,ENA-78 ELISA Kit

达比加群酯  Dabigatran etexilate  质量规格：>97% 大鼠神经降压素(S)试剂盒 Rat neurotensin,S ELISA kit

利伐沙班  Rivaroxaban  质量规格：度≥98% 大鼠神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)ELISA检测试剂盒Ratglialfibrillaryacidicprotein,GFAPELISAKit 96T/48T
大鼠皮下脂肪细胞提取物说明书山羊γ干扰素(IFN-γ)ELISA试剂盒              3-Benzalphthalide  中文名：3-亚苄基苯酞  分子式：C15H10O2 

山羊β内啡肽(β-EP)ELISAKit     3-Benzalphthalide  575-61-1  中文名：3-亚苄基苯酞  分子式：C15H10O2  度：98.0%  关键词： 

山羊β   英文名称：   β-Hydroxybyrate   规格：   48T/96T   英文缩写：   Β-OHB  3-Ethoxyandrosta-3,5-dien-17-one  中文名：3-乙氧基-雄甾-3,5-二烯-17-酮  分子式：C21H30O2  度：98.0%

山羊0酸化腺苷酸活化蛋白激酶elisa试剂盒   山羊0酸化腺苷酸活化蛋白激酶试剂盒   规格型号：96T/48T   山羊0酸化腺苷酸活化蛋白激酶试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：山羊0酸化腺苷酸活化蛋白激酶试剂盒、山羊0酸化腺苷酸活化蛋白激酶elisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。  3-Ethoxyandrosta-3,5-dien-17-one  972-46-3  中文名：3-乙氧基-雄甾-3,5-二烯-17-酮  分子式：C21H30O2  度：98.0%   

山梨醇脱氢酶测试盒   紫外分光光度法   50管/48样  3-Aminopiperidine dihydrochloride  334618-23-4  中文名：  分子式：C5H14Cl2N2

注意事项：

1. 接收到，肉眼观察细胞培养基颜色，显微镜观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照（建议收到时的培养瓶拍一张照片，显微镜拍收到时的细胞100X,200X各一张）。
2.用75%的酒精消毒（建议配置75%的酒精的水是灭菌过的）。
3.严格无菌操作，打开细胞培养瓶。
4.将细胞培养瓶内的培养基用吸管*吸出（严禁直接倾倒），放入另一无菌容器中（建议换新的培养基培养细胞）。
5.用PBS 2-3ml/次轻轻洗细胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,显微镜下观察细胞变圆，轻轻拍打培养瓶直到细胞脱落，加入终止液终止。
6.1000rpm，5min离心，重悬细胞。
7.换新的细胞培养瓶，37℃，5%CO2培养。