人主动脉内皮细胞提取物培养

人主动脉内皮细胞提取物【Human Aorta: Normal Aortic Endothelial Cell Derivatives】

人主动脉内皮细胞提取物是从人原代主动脉内皮细胞提取的，人原代主动脉内皮细胞从正常人主动脉内皮组织制备。正常人主动脉内皮组织采集自各地方医院，采集工作根据IRB 和 HIPAA批准的方案进行。所有的产品在发货之前均经过严格的QA/QC流程以确保其质量。这些产品可以直接用于基因克隆，表达图谱分析以及各种分子生物学实验的研究。

总RNA制备：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol试剂分离RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit进行纯化。生物科技提供的总RNA样品附有RNA样品总浓度、总含量、电泳照片、OD值测定结果等。
cDNA制备：纯化后的总RNA来合成cDNA第一链，以50ul总反应体系进行逆转录，体系中包括MMLV反转录酶和随机引物以及10mg总RNA。68℃反应10min 后终止RT反应。利用1x RT Buffer 运输cDNA，1 ul cDNA 足够做一次PCR反应。所有cDNA产品在订单发货之前都经过了严格的QA/QC分析，保证了产品的质量。
蛋白制备：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制备人关节软骨组织裂解液，离心去除组织碎片，通过Bio-Rad蛋白检测试剂盒测定蛋白浓度，组织蛋白稀释后用非还原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巯基乙醇及PMSF，-80度保存。 

 实验要点及说明：

1．本方法适用于贴壁细胞培养，而不适用于悬浮细胞培养，悬浮细胞可使用滴片法；
2．所使用的盖玻片应该为优质玻璃，并经过铬酸洗液处理；
3．盖玻片非常薄，易碎，取放盖玻片时动作要轻；
4．如果需要更多生长状态一致的细胞，可以使用较大的培养皿，但不宜过大，以避免培养液的浪费和增加污染机率；
5．如果细胞贴壁生长能力较差，可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。

操作要点：

1）将培养基在37℃水浴锅预热；准备一个15mL无菌的离心管，加入8mL预热培养基。
2）将冻存细胞从液氮罐中取出，快速放入37℃水浴锅中复温（可准备一洁净的烧杯，装满37℃的水，细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内，再逐步转移到水浴锅中）。轻轻晃动冻存管，使细胞能在1~2min内*解冻，使细胞能尽快通过易受损的温度段（-5~0℃）。注意冻存管管口不能没入水中，BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内，将管内细胞转移至准备好的离心管内，轻轻吹打液体，使细胞均匀分散，降低DMSO浓度，吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次，均转移至离心管内。
4）800rpm离心5min，弃上清，加入新鲜的培养基，吹打制成细胞悬液。
5）将细胞悬液转移至T25细胞瓶内，补加适量的培养基，轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀，放入温箱内培养。
6）第二天观察细胞贴壁生长情况，换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养，待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代，细胞活力恢复后才能进行后续的实验。

植物组培盒 方形8-Anilino-naphthalenesulfonic acid8268-苯胺-萘磺酸

棕色玻璃瓶p-Anisic acid09对茴香酸

黄曲霉毒素M1快速检测卡（胶体金法）3,3',4,4'-Benzophenone tetracarboxylic dianhydride242183,3',4,4'-二苯甲酮四甲酸二酐

氯霉素快速检测卡（胶体金法）o-Anisic acid5795邻甲酸

三聚胺快速检测卡（胶体金法）1,2-Benzisothiazolin-one263431,2-苯并异噻唑-酮
Pazufloxacin mesilate  163680-77-1  中文名：甲磺酸帕珠沙星  分子式：C17H19FN2O7S    人脂肪分化相关蛋白(ADRP)ELISA试剂盒  

Strontium ranelate  135459-87-9  中文名：雷尼酸锶  分子式：C12H10N2O8S    人脂多糖结合蛋白(LBP)ELISA试剂盒  

N1-Methyl-4-nitrobenzene-1,2-diamine  41939-61-1  中文名：  分子式：C7H9N3O2    人脂多糖/内(LPS)ELISA试剂盒  

Lapatinib  231277-92-2  中文名：拉帕替尼  分子式：C29H26ClFN4O4S    人脂蛋白脂酶(LPL)ELISA试剂盒           

Clopidogrel bisulfate  135046-48-9  中文名：硫酸氢氯吡格雷  分子式：C16H18ClNO6S2    人脂多糖结合蛋白(LBP)ELISAKit
远志皂苷元 HPLC≥98% 20mg Mouseai-alpha-FodrinIgG/IgA,α-FodrinIgG/IgAELISA试剂盒小鼠抗α-胞衬蛋白抗体IgG/IgA(α-FodrinIgG/IgA)ELISA试剂盒规格：96T/48T

月桂氮卓酮 GC≥98% 0.1ml Mouseai-cardiolipinaibodyIgA,ACA-IgAELISAKit小鼠抗心0脂抗体IgA(ACA-IgA)ELISA试剂盒规格：96T/48T

月桂烯（香叶烯） GC≥80% （HPLC≥95%） 0.5mL Mouseai-cardiolipinaibodyIgA,ACA-IgAELISA试剂盒小鼠抗心0脂抗体IgA(ACA-IgA)ELISA试剂盒规格：96T/48T

芸苔素内酯 HPLC≥95% 20mg Mouseai-cardiolipinaibodyIgG,ACA-IgGELISA试剂盒小鼠抗心0脂抗体IgG(ACA-IgG)ELISA试剂盒规格：96T/48T

芸香柚皮苷 HPLC≥98% 20mg Mouseai-cardiolipinaibodyIgM,ACA-IgMELISA试剂盒小鼠抗心0脂抗体IgM(ACA-IgM)ELISA试剂盒规格：96T/48T

孕甾烯醇酮; HPLC≥98% 20mg Mouseai-cenolandcenosomeaibody,ACAELISA试剂盒小鼠抗中性粒/中心体抗体(ACA)ELISA试剂盒规格：96T/48T

皂皮酸 HPLC≥98% 20mg Mouseaidiuretichormone/vasopressin/argininevasopressin,ADH/VP/AVPELISA试剂盒小鼠抗利尿激素/血管加压素/精氨酸加压素(ADH/VP/AVP)ELISA试剂盒规格：96T/48T

泽兰黄酮 HPLC≥98% 20mg Mouseai-EndomysialAibodyIgA,EMAIgAELISA试剂盒小鼠抗肌内膜抗体IgA(EMAIgA)ELISA试剂盒规格：96T/48T

泽泻醇A HPLC≥98% 20mg Mouseai-endothelialcellaibody,AECAELISA试剂盒小鼠抗内皮细胞抗体(AECA)ELISA试剂盒规格：96T/48T

泽泻醇A醋酸酯; HPLC≥98% 20mg MouseAi-glucoprotein210,GP210ELISA试剂盒小鼠抗核膜糖蛋白210抗体(gp210)ELISA试剂盒规格：96T/48T
人主动脉内皮细胞提取物培养Stigmasta-4,22,25-trien-3-one  中文名：  分子式：C29H44O    Aipain,Dihydrochloride   1g              

Stigmast-5-ene-3β,7α,16β-triol  中文名：  分子式：C29H50O3    植物25羟基维生素D3elisa试剂盒   植物25羟基维生素D3试剂盒   规格型号：96T/48T   植物25羟基维生素D3试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：植物25羟基维生素D3试剂盒、植物25羟基维生素D3eisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。

Stigmast-4-ene-3β,6β-diol  中文名：豆甾-4-烯-3β,6β-二醇  分子式：C29H50O2    鱼孕激素elisa试剂盒   鱼孕激素试剂盒   规格型号：96T/48T   鱼孕激素试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：鱼孕激素试剂盒、鱼孕激素eisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。

Stigmast-4-ene-3,6-dione  中文名：豆甾-4-烯-3,6-二酮  分子式：C29H46O2    鱼类状腺原酸elisa试剂盒   鱼类状腺原酸试剂盒   规格型号：96T/48T   鱼类状腺原酸试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：鱼类状腺原酸试剂盒、鱼类状腺原酸eisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。

Stellasterol  中文名：星鱼甾醇  分子式：C28H46O    鱼类皮质醇elisa试剂盒   鱼类皮质醇试剂盒   规格型号：96T/48T   鱼类皮质醇试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：鱼类皮质醇试剂盒、鱼类皮质醇eisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。

运输和保存：
视天气状况和运输距离远近，公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。
1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中，置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输；收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养，如无法立刻进行复苏操作，冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。
2)T-25培养瓶充满*培养基后进行常温运输；收到细胞后请镜下观察细胞生长状态，如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作，如悬浮的细胞较多，请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。