小鼠肾上皮细胞提取物【Mouse Kidney:Normal Kidney Derivatives】 小鼠肾上皮细胞提取物是从小鼠原代肾上皮细胞提取的,小鼠原代肾上皮细胞从正常小鼠肾组织制备。所有的产品在发货之前均经过严格的QA/QC流程以确保其质量。这些产品可以直接用于基因克隆,表达图谱分析以及各种分子生物学实验的研究。 总RNA制备:利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol试剂分离RNA,然后用Qiagen RNA Clean Kit进行纯化。生物科技提供的总RNA样品附有RNA样品总浓度、总含量、电泳照片、OD值测定结果等。 cDNA制备:纯化后的总RNA来合成cDNA第一链,以50ul总反应体系进行逆转录,体系中包括MMLV反转录酶和随机引物以及10mg总RNA。68℃反应10min 后终止RT反应。利用1x RT Buffer 运输cDNA,1 ul cDNA 足够做一次PCR反应。所有cDNA产品在订单发货之前都经过了严格的QA/QC分析,保证了产品的质量。 蛋白制备:利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制备人关节软骨组织裂解液,离心去除组织碎片,通过Bio-Rad蛋白检测试剂盒测定蛋白浓度,组织蛋白稀释后用非还原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巯基乙醇及PMSF,-80度保存。 产品名称 | 小鼠肾上皮细胞提取物培养 | 英文名称 | Mouse Kidney:Normal Kidney Derivatives | 货号 | EYX99137 |
实验要点及说明: 1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法; 2.所使用的盖玻片应该为优质玻璃,并经过铬酸洗液处理; 3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻; 4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率; 5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。 运输和保存: 视天气状况和运输距离远近,公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。 1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中,置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输;收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养,如无法立刻进行复苏操作,冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。 2)T-25培养瓶充满*培养基后进行常温运输;收到细胞后请镜下观察细胞生长状态,如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作,如悬浮的细胞较多,请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。 一.培养基及培养冻存条件准备: 1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。 2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。 3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
操作要点: 1)将培养基在37℃水浴锅预热;准备一个15mL无菌的离心管,加入8mL预热培养基。 2)将冻存细胞从液氮罐中取出,快速放入37℃水浴锅中复温(可准备一洁净的烧杯,装满37℃的水,细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内,再逐步转移到水浴锅中)。轻轻晃动冻存管,使细胞能在1~2min内*解冻,使细胞能尽快通过易受损的温度段(-5~0℃)。注意冻存管管口不能没入水中,BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。 3)用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内,将管内细胞转移至准备好的离心管内,轻轻吹打液体,使细胞均匀分散,降低DMSO浓度,吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次,均转移至离心管内。 4)800rpm离心5min,弃上清,加入新鲜的培养基,吹打制成细胞悬液。 5)将细胞悬液转移至T25细胞瓶内,补加适量的培养基,轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀,放入温箱内培养。 6)第二天观察细胞贴壁生长情况,换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养,待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代,细胞活力恢复后才能进行后续的实验。 牛奶总抗生素 ELISA试剂盒96TMiconazole nitrate228327硝酸咪康唑 阿维菌素 ELISA试剂盒96TMetronidazole4438甲硝唑 磺胺类 ELISA试剂盒96TMetoclopramide3642甲氧氯普胺 氧氟沙星 ELISA试剂盒96TMethyltestosterone588甲基睾酮 尼考胺 ELISA试剂盒96TMethylprednisolone833甲基泼尼松龙 Lurasidone 中文名:鲁拉西酮 分子式:C28H36N4O2S 度:98.0% 戊二 (50%) 100ml 1,2,3-Triacetyl-5-deoxy-D-ribose 中文名: 分子式:C11H16O7 度:98.0% Glaraldehydesolion 500ml Sertaconazole 中文名:舍他康唑 分子式:C20H15Cl3N2OS 度:98.0% 五羟色胺 (Serotonin/5-HT) 作用: ELISA 规格: 48T/96T 进口分装 Doxapram hydrochloride monohydrate 中文名:盐酸多沙普仑 分子式:C24H33ClN2O3 度:98.0% 分泌型白细胞蛋白酶抑制物 (SLPI) 作用: ELISA 规格: 48T/96T 进口分装 Quinestrol 中文名:炔雌醇环戊醚 分子式:C25H32O2 度:98.0% P 物质 (Substance P) 作用: ELISA 规格: 48T/96T 进口分装 盐酸阿莫罗芬/盐酸阿莫洛芬 (标准品) Amorolfine hydrochloride 质量规格:HPLC>98%,标准品 冰冻切片组织RHO蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒10/20 氨苄西林钠/氨苄青霉素钠 Ampicillin 质量规格:>900μg/mg, USP,BR 冰冻切片组织RUNX3蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒10/20 氨苄西林钠(标准品) Ampicillin 质量规格:标准品用于含量测定 冰冻切片组织RyR受体蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒10/20 扁桃苷/苦杏仁苷 Amygdalin 质量规格:>98%,BR 冰冻切片组织TNFALPHA蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒10/20 扁桃苷/苦杏仁苷(标准品) Amygdalin 质量规格:HPLC≥98%,标准品 冰冻切片组织TNFBETA蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒10/20 阿尼芬净 Anidulafungin 质量规格:>98%,BR 冰冻切片组织TSH-BETA蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒10/20 安丝菌素P-3(束丝放线菌) Ansamitocin P-3 质量规格:总含量>95% ,进分 冰冻切片组织TUBULIN蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒10/20 阿瑞吡坦;阿瑞匹坦 Aprepitant 质量规格:>98%;NK1受体拮抗剂 冰冻切片组织VEGF蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒10/20 泰诺福韦;替诺福韦 Tenofovir 质量规格:>98%,BR 冰冻切片组织αSMA蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒10/20 泰诺福韦;替诺福韦(标准品) Tenofovir 质量规格:HPLC≥99%,标准品 冰冻切片组织βAMYLOID蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒10/20 小鼠肾上皮细胞提取物培养动物组织/细胞总RNA提取试剂盒 Animal tissue / cell total RNA Exaction Kit Riligustilide 89354-45-0 中文名: 分子式:C24H28O4 度:98.0% 关键词: 东方体核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法) 48T Anthraflavic acid 84-60-6 中文名:二羟蒽醌 分子式:C14H8O4 丁酰胆碱酯酶检测 Glucose -6- phosphate dehydrogenase (G-6-PD) detection Prilocaine hydrochloride 1786-81-8 中文名:盐酸丙胺卡因 分子式:C13H21ClN2O 度:98.0% 关键词: 凋亡因子BAX 英文名称: apoptogen BAX 规格: 48T/96T 英文缩写: BAX Otophylloside B 106758-54-7 中文名:青阳参苷B 分子式:C49H78O16 凋亡相关因子配体 (Fas-L) 作用: ELISA 规格: 48T/96T 进口分装 Varenicline tartrate 375815-87-5 中文名:酒石酸伐仑克林 分子式:C17H19N3O6 度:98.0% 关键词: |