人肾上皮细胞提取物培养

人肾上皮细胞提取物【Human Kidney : Normal Kidney Epithelial Cell Derivatives】

人肾上皮细胞提取物是从人肾上皮细胞提取的，人肾上皮细胞从正常人肾组织制备。正常人肾组织采集自各地方医院，采集工作根据IRB 和HIPAA批准的方案进行。所有的产品在发货之前均经过严格的QA/QC流程以确保其质量。这些产品可以直接用于基因克隆，表达图谱分析以及各种分子生物学实验的研究。

总RNA制备：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol试剂分离RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit进行纯化。生物科技提供的总RNA样品附有RNA样品总浓度、总含量、电泳照片、OD值测定结果等。
cDNA制备：纯化后的总RNA来合成cDNA第一链，以50ul总反应体系进行逆转录，体系中包括MMLV反转录酶和随机引物以及10mg总RNA。68℃反应10min 后终止RT反应。利用1x RT Buffer 运输cDNA，1 ul cDNA 足够做一次PCR反应。所有cDNA产品在订单发货之前都经过了严格的QA/QC分析，保证了产品的质量。
蛋白制备：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制备人关节软骨组织裂解液，离心去除组织碎片，通过Bio-Rad蛋白检测试剂盒测定蛋白浓度，组织蛋白稀释后用非还原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巯基乙醇及PMSF，-80度保存。 

 实验要点及说明：

1．本方法适用于贴壁细胞培养，而不适用于悬浮细胞培养，悬浮细胞可使用滴片法；
2．所使用的盖玻片应该为优质玻璃，并经过铬酸洗液处理；
3．盖玻片非常薄，易碎，取放盖玻片时动作要轻；
4．如果需要更多生长状态一致的细胞，可以使用较大的培养皿，但不宜过大，以避免培养液的浪费和增加污染机率；
5．如果细胞贴壁生长能力较差，可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。

操作要点：

1）将培养基在37℃水浴锅预热；准备一个15mL无菌的离心管，加入8mL预热培养基。
2）将冻存细胞从液氮罐中取出，快速放入37℃水浴锅中复温（可准备一洁净的烧杯，装满37℃的水，细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内，再逐步转移到水浴锅中）。轻轻晃动冻存管，使细胞能在1~2min内*解冻，使细胞能尽快通过易受损的温度段（-5~0℃）。注意冻存管管口不能没入水中，BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内，将管内细胞转移至准备好的离心管内，轻轻吹打液体，使细胞均匀分散，降低DMSO浓度，吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次，均转移至离心管内。
4）800rpm离心5min，弃上清，加入新鲜的培养基，吹打制成细胞悬液。
5）将细胞悬液转移至T25细胞瓶内，补加适量的培养基，轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀，放入温箱内培养。
6）第二天观察细胞贴壁生长情况，换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养，待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代，细胞活力恢复后才能进行后续的实验。

致病性蜡样芽孢杆菌双重实时荧光PCR检测试剂盒TTorososide A1656892

五种致泻性大肠埃希氏菌多重实时荧光PCR检测试剂盒（A版本）TTopiramate9729托吡酯

五种致泻性大肠埃希氏菌多重实时荧光PCR检测试剂盒（B版本）TTolvaptan168托伐普坦

副溶血性弧菌/tdh/trh毒力基因三重实时荧光PCR检测试剂盒TToltrazuril6043托曲珠利

副溶血性弧菌实时荧光PCR检测试剂盒TTolazoline hydrochloride597盐酸妥拉唑林
Pemetrexed  中文名：培美曲塞二钠  分子式：C20H21N5O6  度：98.0%  小鼠白介素2(IL-2)ELISAKit  

4-[2-(2-Amino-4,7-dihydro-4-oxo-1H-pymol[2,3-d]pyrimodin-5-yl)ethyl]benzoic acid methyl ester  中文名：  分子式：C16H16N4O3  度：98.0%  小鼠白介素4(IL-4)ELISAKit              

Pemetrexed di  中文名：培美曲塞二钠  分子式：C21H23N5Na2O6  度：98.0%  小鼠17-类固醇(17-KS)ELISA试剂盒  

Ethyl 5-amino-4-cyano-3-(2-ethoxy-2-oxoethyl)thiophene-2-carboxylate  中文名：  分子式：C12H14N2O4S  度：98.0%  小鼠17羟孕(17-OHP)ELISA试剂盒  

5-Fluorouracil  中文名：  分子式：C4H3FN2O2  度：98.0%  小鼠17羟皮质类固醇(17-OHCS)ELISA试剂盒
皂土(膨润土)(Bentone SD-1,适于中至低极性溶剂)  Bentonite  质量规格：Bentone SD-1,适于中至低极性溶剂 犬透明质酸(HA)试剂盒 Canine Hyaluronic acid,HA ELISA Kit

皂土(膨润土)(Bentone SD-2,适于中高极性溶剂)  Bentonite  质量规格：Bentone SD-2,适于中高极性溶剂 犬透明质酸酶1(HAase 1)试剂盒 Canine Hyaluronidase 1,HAase 1 ELISA Kit

活性炭粉(AR,200目,粉末状,褐色)  Activated charcoal  质量规格：AR,200目,粉末状,褐色 犬透明质酸酶2(HAase 2)试剂盒 Canine Hyaluronidase 2,HAase 2 ELISA Kit

活性炭(CP,200目,粉末状,褐色)  Activated charcoal  质量规格：CP,200目,粉末状,褐色 犬透明质酸酶3(HAase 3)试剂盒 Canine Hyaluronidase 3,HAase 3 ELISA Kit

活性炭颗粒(AR,20-50目)  Activated charcoal  质量规格：AR,20-50目 犬透明质酸酶4(HAase 4)试剂盒 Canine Hyaluronidase 4,HAase 4 ELISA Kit

活性炭(电镀脱色,200目,from wood)  Activated charcoal  质量规格：电镀脱色,200目,from wood 犬维生素A(VA)ELISA检测试剂盒CanineVitaminA,VAELISAKit 96T/48T

活性炭(催化剂载体,8-16目)  Activated charcoal  质量规格：催化剂载体,8-16目 犬维生素A(VA)试剂盒 Dog Vitamin A,VA ELISA Kit

活性炭(净水、气体化,棒,φ1.0mm)  Activated charcoal  质量规格：净水、气体化,棒,φ1.0mm 犬维生素E(VE)ELISA检测试剂盒CanineVitaminE,VEELISAKit 96T/48T

活性炭(净水、气体化,10-24目)  Activated charcoal  质量规格：净水、气体化,10-24目 犬维生素E(VE)试剂盒 Canine Vitamin E,VE ELISA Kit

活性炭(电镀脱色,40-60目,from Nutshell)  Activated charcoal  质量规格：电镀脱色,40-60目,from Nutshell 犬维生素K1(VK1)ELISA检测试剂盒CanineVitaminK1,VK1ELISAKit 96T/48T
人肾上皮细胞提取物培养Stavudine  3056-17-5  中文名：司他夫定  分子式：C10H12N2O4    HumanAi-SomaticMuscleAibody,ASAELISAKit 人抗骨骼肌抗体(ASA)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

Albendazole  54965-21-8  中文名：阿苯达唑  分子式：C12H15N3O2S    Humancytokeratin20,CK-20ELISA试剂盒人细胞角蛋白20(CK-20)ELISA试剂盒规格：96T/48T

Fmoc-O-(benzylphospho)-L-threonine  175291-56-2  中文名：Fmoc-苏氨酸磷酸苄酯  分子式：C26H26NO8P    组织HSV(HERPESSIMPLX)病毒定性检测试剂盒20次

8-Phenyloctanol  10472-97-6  中文名：8-苯基辛醇  分子式：C14H22O    HumanPlateletFactor4,PF-4ELISAKit人血小板因子4(PF-4/CXCL4)ELISA试剂盒规格：96T/48T

8-Phenyloctanoic acid  26547-51-3  中文名：8-苯基辛酸  分子式：C14H20O2    兔子脂联素(ADP)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

运输和保存：
视天气状况和运输距离远近，公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。
1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中，置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输；收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养，如无法立刻进行复苏操作，冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。
2)T-25培养瓶充满*培养基后进行常温运输；收到细胞后请镜下观察细胞生长状态，如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作，如悬浮的细胞较多，请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。