以下是人副流感病毒通用PCR检测试剂盒说明书的订购信息： 产品名称 | 编号 | 分类 | 人副流感病毒通用PCR检测试剂盒说明书 | EY00P641 | PCR检测试剂盒 |
组成及试剂配制:
1、人副流感病毒通用PCR检测试剂盒说明书酶标板：一块（96孔）
2、 标准品（冻干品）： 2瓶，请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml，盖好后室温静置大约10分钟，同时反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为200 U/L，然后做系列倍比稀释（注：不要直接在板中进行倍比稀释），分别配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液：1×20ml。
4、 检测稀释液A：1×10ml。
5、 检测稀释液B：1×10ml。
需要自备的器材：
1．人副流感病毒通用PCR检测试剂盒说明书仪器：分析天平、离心机、荧光 PCR 扩增仪、组织研磨器、-20 ℃冰箱、可调移液器（2 µL、20µL、200 µL、1000 µL）。
2．耗材：荧光 PCR 反应管、眼科剪、眼科镊、生理盐水、1.5 mL 经焦碳酸二乙酯（DEPC）水
处理的灭菌离心管、吸头（10 µL、200 µL、1000 µL）、灭菌双蒸水。
人副流感病毒通用PCR检测试剂盒说明书具有下列特点：
1.即开即用，用户只需要提供样品 DNA 模板，操作简单，定量准确快速。
2. 引物经过优化，特异性强。预期的 PCR 产物长度为 560 bp。
3. PCR mix 中含上样染料，PCR 后可以直接上样电泳。
4. 提供阳性对照，便于分析试验结果。 反应五要素：
人副流感病毒通用PCR检测试剂盒说明书参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特异性反应的关键，PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物，利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则：
①引物长度： 15-30bp，常用为20bp左右。
②引物扩增跨度： 以200-500bp为宜，特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基：G+C含量以40-60%为宜，G+C太少扩增效果不佳，G+C过多易出现非特异条带。ATGC随机分布，避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构，避免两条引物间互补，特别是3'端的互补，否则会形成引物二聚体，产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基，特别是末及倒数第二个碱基，应严格要求配对，以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点， 被扩增的靶序列有适宜的酶切位点， 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性：引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量：每条引物的浓度0.1～1umol或10～100pmol，以低引物量产生所需要的结果为好，引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增，且可增加引物之间形成二聚体的机会。 多西他赛备注： 多烯紫杉醇 114977-28-5 Docetaxel分子式：C43H53NO14分子量：807.88 多西他赛备注： 抗坏血酸钙 5743-28-2 Ascorbic acid calcium salt dihydrate分子式：C12H14CAO12·2H2O分子量：426.34 备注： 乐杀螨 485-31-4 Binapacryl分子式：C15H18N2O6分子量：322.31 2-仲丁基-4,6-二基-3,3-二甲基酸酯备注： 13-乙酰基-9-羟基巴卡丁 III 142203-65-4 佳乐麝香 1222-05-5 分子式：C18H26O分子量：258.40 1,3,4,6,7,8-六氢-4,6,6,7,8,8-六甲基-环戊并G-2-苯并吡喃备注： 己唑醇 79983-71-4 Hexaconazole分子式：C14H17CL2N3O分子量：314.21 (RS)-2-(2,4-二基)-1-(1H-1,2,4-三唑-1-基)-己-2-醇备注： 磺乐灵 4726-14-1 Nitralin分子式：C13H19N3O6S分子量：19914 备注： 磺草唑胺 139528-85-1 Metosulam分子式：C14H13CL2N5O4S分子量：418.26
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