人呼吸道上皮细胞提取物【Human Airway: Normal Airway Epithelial Cell Derivatives】 人呼吸道上皮细胞提取物是从人原代呼吸道上皮细胞提取的,人原代呼吸道上皮细胞从正常人呼吸道上皮组织制备。正常人呼吸道上皮组织采集自各地方医院,采集工作根据IRB 和 HIPAA批准的方案进行。所有的产品在发货之前均经过严格的QA/QC流程以确保其质量。这些产品可以直接用于基因克隆,表达图谱分析以及各种分子生物学实验的研究。 总RNA制备:利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol试剂分离RNA,然后用Qiagen RNA Clean Kit进行纯化。生物科技提供的总RNA样品附有RNA样品总浓度、总含量、电泳照片、OD值测定结果等。 cDNA制备:纯化后的总RNA来合成cDNA第一链,以50ul总反应体系进行逆转录,体系中包括MMLV反转录酶和随机引物以及10mg总RNA。68℃反应10min 后终止RT反应。利用1x RT Buffer 运输cDNA,1 ul cDNA 足够做一次PCR反应。所有cDNA产品在订单发货之前都经过了严格的QA/QC分析,保证了产品的质量。 蛋白制备:利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制备人关节软骨组织裂解液,离心去除组织碎片,通过Bio-Rad蛋白检测试剂盒测定蛋白浓度,组织蛋白稀释后用非还原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巯基乙醇及PMSF,-80度保存。 产品名称 | 人呼吸道上皮细胞提取物 | 英文名称 | Human Airway: Normal Airway Epithelial Cell Derivatives | 货号 | EYX99003 |

实验要点及说明: 1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法; 2.所使用的盖玻片应该为优质玻璃,并经过铬酸洗液处理; 3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻; 4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率; 5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。 运输和保存: 视天气状况和运输距离远近,公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。 1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中,置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输;收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养,如无法立刻进行复苏操作,冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。 2)T-25培养瓶充满*培养基后进行常温运输;收到细胞后请镜下观察细胞生长状态,如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作,如悬浮的细胞较多,请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。 一.培养基及培养冻存条件准备: 1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。 2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。 3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
 操作要点: 1)将培养基在37℃水浴锅预热;准备一个15mL无菌的离心管,加入8mL预热培养基。 2)将冻存细胞从液氮罐中取出,快速放入37℃水浴锅中复温(可准备一洁净的烧杯,装满37℃的水,细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内,再逐步转移到水浴锅中)。轻轻晃动冻存管,使细胞能在1~2min内*解冻,使细胞能尽快通过易受损的温度段(-5~0℃)。注意冻存管管口不能没入水中,BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。 3)用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内,将管内细胞转移至准备好的离心管内,轻轻吹打液体,使细胞均匀分散,降低DMSO浓度,吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次,均转移至离心管内。 4)800rpm离心5min,弃上清,加入新鲜的培养基,吹打制成细胞悬液。 5)将细胞悬液转移至T25细胞瓶内,补加适量的培养基,轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀,放入温箱内培养。 6)第二天观察细胞贴壁生长情况,换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养,待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代,细胞活力恢复后才能进行后续的实验。 猪蓝耳PRRS抗体快速检测卡N-Acetylsulfanilyl chloride121-对乙酰胺基 猪口蹄疫FMDV抗体快速检测卡Exemestane786依西美坦 猪流行性腹泻PED抗体快速检测卡Hemapolin426甲基环硫雄醇中间体 E 口蹄疫O型抗体快速检测卡Formestane5668福美司坦 猪流感抗体快速检测卡4-Chlorotestosterone acetate8559醋酸氯睾酮 Periplogenin 中文名:杠柳苷元 分子式:C23H34O5 度:98.0% 兔糖化血红蛋白A1celisa试剂盒 兔糖化血红蛋白A1c试剂盒 规格型号:96T/48T 兔糖化血红蛋白A1c试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:elisa试剂盒(进口分装),产品别名:兔糖化血红蛋白A1c试剂盒、兔糖化血红蛋白A1c elisa试剂盒 保存条件:2-8℃ 保质期:6个月。 Periplocogenin 中文名: 分子式:C28H42O6 度:98.0% 兔胎盘生长因子elisa试剂盒 兔胎盘生长因子试剂盒 规格型号:96T/48T 兔胎盘生长因子试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:elisa试剂盒(进口分装),产品别名:兔胎盘生长因子试剂盒、兔胎盘生长因子elisa试剂盒 保存条件:2-8℃ 保质期:6个月。 Wallicoside 中文名:断节参苷 分子式:C61H98O26 度:98.0% 兔纤溶酶抗纤溶酶复合物(PAP)ELISA试剂盒 Periplocoside N 中文名: 分子式:C27H44O6 度:98.0% 兔细胞间粘附分子1(ICAM-1)ELISA试剂盒 Trillin 中文名:延龄草苷 分子式:C33H52O8 度:99.0% 兔透明质酸(HA)ELISA试剂盒 脂酰布洛芬-β-D-葡萄糖苷酸 Ibuprofen Acyl-β-D-glucuronide 质量规格:美国进口 英文名称MousemajorhistocompatibilitycomplexELISAKit小鼠组织相容性复合物(MHC)规格:96T/48T 外消旋2-羟基布洛芬 rac 2-Hydroxy Ibuprofen 质量规格:美国进口 英文名称MouseMBPELISAKit小鼠髓0脂碱蛋白(MBP)规格:96T/48T 1-羟基布洛芬(布洛芬杂质))(非对映) 1-Hydroxy Ibuprofen (Ibuprofen Impurity L)(Mixture of Diastereomers) 质量规格:美国进口 英文名称MouseMD2ELISAKit小鼠髓样分化蛋白-2(MD2)规格:96T/48T 1-含氧的布洛芬 1-Oxo Ibuprofen 质量规格:美国进口 英文名称MouseMGα1ELISAKit小鼠α1微球蛋白(MGα1)规格:96T/48T 羧酸布洛芬(非对映) Ibuprofen Carboxylic Acid(Mixture of Diastereomers) 质量规格:美国进口 英文名称MouseMGβ2ELISAKit小鼠β2微球蛋白(MGβ2)规格:96T/48T 外消旋α-羟基布洛芬 rac α-Hydroxy Ibuprofen 质量规格:美国进口 英文名称MousemicroalbunminuriaELISAKIT小鼠微量白蛋白尿(ALB)规格:96T/48T (R)-布洛芬 (R)-Ibuprofen 质量规格:美国进口 英文名称MouseMotilinELISAKit小鼠胃动素(MTL)规格:96T/48T (S)-布洛芬 (S)-Ibuprofen 质量规格:美国进口 英文名称MouseNF-kBELISAKit小鼠NF-kB规格:96T/48T 依那普利 Enalapril 质量规格:美国进口 英文名称MouseniicoxidesyhaseELISAKIT小鼠合成酶(NOS)规格:96T/48T 1,3-二苄基-5-氟尿嘧啶 1,3-Dibenzyl-5-fluorouracil 质量规格:美国进口 英文名称MouseNN-T4ELISAKit小鼠新生甲状腺素(NN-T4)规格:96T/48T 人呼吸道上皮细胞提取物Sitostenone 1058-61-3 中文名:豆甾-4-烯-3-酮 分子式:C29H48O 度:96.0% 关键词: 苏里南苦木; 火炬松; 豆甾烷; 中药对照品; 中药标准品; 植物提取物; 天然产物; 天然产物库 小鼠氧化低密度脂蛋白(OxLDL)ELISA试剂盒 Sitagliptin phosphate 654671-78-0 中文名:无水磷酸西他列汀 分子式:C16H18F6N5O5P 度:98.0% 关键词: 小鼠牙本质涎0蛋白 英文名称: Mouse Dein Sialophosphoprotein 规格: 48T/96T 英文缩写: DSP Sitafloxacin 127254-12-0 中文名:西他沙星 分子式:C19H18ClF2N3O3 度:98.5% 小鼠DNA抗体 英文名称: Mouse Deoxyribonucleic Acid Aibody 规格: 48T/96T 英文缩写: DNA.Ab Silodosin 160970-54-7 中文名:西洛多辛 分子式:C25H32F3N3O4 度:98.0% 关键词: 小鼠氧化酶 英文名称: Mouse Diamine Oxidase 规格: 48T/96T 英文缩写: DAO 171599-83-0 中文名:枸橼酸 分子式:C28H38N6O11S 度:98.0% 关键词: 小鼠多巴胺受体D1 英文名称: Mouse Dopamine receptor D1 规格: 48T/96T 英文缩写: DRD1 |