小鼠结肠平滑肌细胞提取物【Mouse Intestine: Normal Colonic Smooth Muscle Cell Derivatives】 小鼠结肠平滑肌细胞提取物是从小鼠结肠平滑肌细胞提取的,小鼠结肠平滑肌细胞从正常小鼠结肠组织制备。所有的产品在发货之前均经过严格的QA/QC流程以确保其质量。这些产品可以直接用于基因克隆,表达图谱分析以及各种分子生物学实验的研究。 总RNA制备:利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol试剂分离RNA,然后用Qiagen RNA Clean Kit进行纯化。生物科技提供的总RNA样品附有RNA样品总浓度、总含量、电泳照片、OD值测定结果等。 cDNA制备:纯化后的总RNA来合成cDNA第一链,以50ul总反应体系进行逆转录,体系中包括MMLV反转录酶和随机引物以及10mg总RNA。68℃反应10min 后终止RT反应。利用1x RT Buffer 运输cDNA,1 ul cDNA 足够做一次PCR反应。所有cDNA产品在订单发货之前都经过了严格的QA/QC分析,保证了产品的质量。 蛋白制备:利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制备人关节软骨组织裂解液,离心去除组织碎片,通过Bio-Rad蛋白检测试剂盒测定蛋白浓度,组织蛋白稀释后用非还原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巯基乙醇及PMSF,-80度保存。 产品名称 | 小鼠结肠平滑肌细胞提取物培养 | 英文名称 | Mouse Intestine: Normal Colonic Smooth Muscle Cell Derivatives | 货号 | EYX99117 |
实验要点及说明: 1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法; 2.所使用的盖玻片应该为优质玻璃,并经过铬酸洗液处理; 3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻; 4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率; 5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。 运输和保存: 视天气状况和运输距离远近,公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。 1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中,置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输;收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养,如无法立刻进行复苏操作,冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。 2)T-25培养瓶充满*培养基后进行常温运输;收到细胞后请镜下观察细胞生长状态,如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作,如悬浮的细胞较多,请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。 一.培养基及培养冻存条件准备: 1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。 2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。 3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
操作要点: 1)将培养基在37℃水浴锅预热;准备一个15mL无菌的离心管,加入8mL预热培养基。 2)将冻存细胞从液氮罐中取出,快速放入37℃水浴锅中复温(可准备一洁净的烧杯,装满37℃的水,细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内,再逐步转移到水浴锅中)。轻轻晃动冻存管,使细胞能在1~2min内*解冻,使细胞能尽快通过易受损的温度段(-5~0℃)。注意冻存管管口不能没入水中,BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。 3)用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内,将管内细胞转移至准备好的离心管内,轻轻吹打液体,使细胞均匀分散,降低DMSO浓度,吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次,均转移至离心管内。 4)800rpm离心5min,弃上清,加入新鲜的培养基,吹打制成细胞悬液。 5)将细胞悬液转移至T25细胞瓶内,补加适量的培养基,轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀,放入温箱内培养。 6)第二天观察细胞贴壁生长情况,换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养,待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代,细胞活力恢复后才能进行后续的实验。 通用型单重荧光PCR 检测试剂盒48Minocycline hydrochloride136148 高致病性H5N1病毒双重荧光PCR 检测试剂盒48Nisoldipine636752尼索地平 H5N2病毒双重荧光PCR 检测试剂盒48Benzyl 2-aminoacetate p-sulfonate17386 H5病毒单重荧光PCR检测试剂盒482-Benzylacrylic acid56699 H7病毒单重荧光PCR检测试剂盒48Racecadotril8113消旋卡多曲 Methasterone 3381-88-2 中文名:甲基屈他雄酮 分子式:C21H34O2 度:98.0% 关键词: 小鼠脱氧酚/脱氧啉(DPD)ELISA试剂盒 Metamizole 68-89-3 中文名:安乃近 分子式:C13H16N3NaO4S 度:98.0% 关键词: 小鼠脱氢表雄酯(DHEA-S)ELISA试剂盒 Mesterolone 1424-00-6 中文名:甲氢睾酮 分子式:C20H32O2 度:98.0% 关键词: 小鼠脱氢表雄S7(DHEA-S7)ELISA试剂盒 Mestanolone 521-11-9 中文名:美雄诺龙 分子式:C20H32O2 度:98.0% 关键词: 小鼠脱氧酚elisa试剂盒 小鼠脱氧酚试剂盒 规格型号:96T/48T 小鼠脱氧酚试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:elisa试剂盒(进口分装),产品别名:小鼠脱氧酚试剂盒、小鼠脱氧酚eisa试剂盒 保存条件:2-8℃ 保质期:6个月。 Mequindox 13297-17-1 中文名:乙酰甲喹 分子式:C11H10N2O3 度:98.0% 小鼠粘蛋白elisa试剂盒 小鼠粘蛋白试剂盒 规格型号:96T/48T 小鼠粘蛋白试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:elisa试剂盒(进口分装),产品别名:小鼠粘蛋白试剂盒、小鼠粘蛋白eisa试剂盒 保存条件:2-8℃ 保质期:6个月。 盐酸镧六水(>99%,BR) Lanthanum (III) chloride, hexahydrate 质量规格:>99%,BR 动物组织肌质网横小管(TTube)分离试剂盒10 三氧化钼(>98%,BR) Molybdic oxide 质量规格:>98%,BR 动物组织肌质网三联体(IAD)分离试剂盒10 木瓜蛋白酶悬浮液 Papain 2x crystallized from papaya Latex 质量规格:比活度:>20 U/mg,BC 动物组织基因组DNA分离试剂盒50 苯磺酸钠(>98%,BR) benzenesulfonate 质量规格:>98%,BR 动物组织镁ATP酶(Mg++-ATPase)活性比色法定量检测试剂盒20 过氧化物歧化酶(SOD) Superoxide dismutase from Bovine Erythrocytes(SOD) 质量规格:比活度:>5000 U/mg,BC 动物组织膜性囊泡(RSOV和IOV)制备试剂盒20 三十烷醇(>98%,植物激素级) Triacontanol 质量规格:>98%,植物激素级 动物组织内质网粗提分离试剂盒10 4-羟基(>98.0%,BR) 4-Hydroxybenzaldehyde 质量规格:>98.0%,BR 动物组织羟脯氨酸(hydroxyproline)比色法定量检测试剂盒20 低内牛血清白蛋白 Albumin, from bovine pH 7.0 Low endotoxin 质量规格:>97%,Biotech Grade 动物组织羟脯氨酸(HYP)比色法定量检测试剂盒20 梭菌蛋白酶 Clostripain 质量规格:酶活:>50U/mg,进分 动物组织氢/ATP酶(H+/K+-ATPase)活性比色法定量检测试剂盒20 2'-脱氧鸟苷-5'-一二钠盐(分子生物学级) dGMP, 2'-Deoxyguanosine-5'-monophosphate di salt 质量规格:>98%,分子生物学级 动物组织氢ATP酶(H+-ATPase)活性比色法定量检测试剂盒20 小鼠结肠平滑肌细胞提取物培养表皮生长因子 英文名称: epidermal growth factor 规格: 48T/96T 英文缩写: EGF 3β,5α-Dihydroxyergosta-7,22-dien-6-one 14858-07-2 中文名: 分子式:C28H44O3 便携式余/总比色计 Poable / total colorimeter 4-(N-Methyl)-aminoantipyrine 中文名: 分子式:C12H15N3O 度:95.0% 便携式亚盐比色计 Poable niite colorimeic meter 4-(N-Methyl)-aminoantipyrine 中文名: 分子式:C12H15N3O 便携式臭氧比色计 Poable ozone colorimeic meter 4-(Phenylthio)benzyl alcohol 6317-56-2 中文名: 分子式:C13H12OS 半乳糖凝集素 7 ( Galectin-7 ) 作用: ELISA 规格: 48T/96T 进口分装 Aspirin 中文名:阿司匹林 分子式:C9H8O4 度:99.0% |