组成及试剂配制: 1、气肿疽梭菌(CC)核酸检测试剂盒说明书酶标板:一块(96孔) 2、 标准品(冻干品): 2瓶,请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml,盖好后室温静置大约10分钟,同时反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为200 U/L,然后做系列倍比稀释(注:不要直接在板中进行倍比稀释),分别配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。 3、 样品稀释液:1×20ml。 4、 检测稀释液A:1×10ml。 5、 检测稀释液B:1×10ml。
需要自备的器材: 1.气肿疽梭菌(CC)核酸检测试剂盒说明书仪器:分析天平、离心机、荧光 PCR 扩增仪、组织研磨器、-20 ℃冰箱、可调移液器(2 µL、20µL、200 µL、1000 µL)。 2.耗材:荧光 PCR 反应管、眼科剪、眼科镊、生理盐水、1.5 mL 经焦碳酸二乙酯(DEPC)水 处理的灭菌离心管、吸头(10 µL、200 µL、1000 µL)、灭菌双蒸水。 气肿疽梭菌(CC)核酸检测试剂盒说明书具有下列特点: 1.即开即用,用户只需要提供样品 DNA 模板,操作简单,定量准确快速。 2. 引物经过优化,特异性强。预期的 PCR 产物长度为 560 bp。 3. PCR mix 中含上样染料,PCR 后可以直接上样电泳。 4. 提供阳性对照,便于分析试验结果。 以下是气肿疽梭菌(CC)核酸检测试剂盒说明书的订购信息: 产品名称 | 编号 | 分类 | 气肿疽梭菌(CC)核酸检测试剂盒说明书 | EY00P1442 | 核酸检测试剂盒 |
肾上腺髓质素(ADM)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) * 规格: 48T/96T 肾上腺髓质素(ADM)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) * 规格: 48T/96T 肾上腺髓质素(ADM)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) * 规格: 48T/96T 肾上腺髓质素(ADM)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) * 规格: 48T/96T 肾上腺髓质素(ADM)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) * 规格: 48T/96T 肾上腺髓质素2(ADM2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) * 规格: 48T/96T 粘脂蛋白2(MCOLN2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) * 规格: 48T/96T 粘脂蛋白3(MCOLN3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) * 规格: 48T/96T 粘着斑激酶(FAK)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) * 规格: 48T/96T 粘蛋白1(MUC1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) * 规格: 48T/96T 粘蛋白1(MUC1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) * 规格: 48T/96T 粘蛋白1(MUC1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) * 规格: 48T/96T 气肿疽梭菌(CC)核酸检测试剂盒说明书重组人 Glutaminyl cyclase / QPCT 蛋白 (His 标签)QPCT ProteinHuman 重组人 CALR / Calreticulin 蛋白 (His 标签)CALR ProteinHuman 重组人 CALR / Calreticulin 蛋白 (Fc 标签)CALR ProteinHuman 重组人 CALU / Calumenin 蛋白 (His 标签)CALU ProteinHuman 重组人 NKG2D / CD314 蛋白 (aa 78-216, His 标签)KLRK1 ProteinHuman 重组人 ROBO2 蛋白 (His 标签)ROBO2 ProteinHuman 重组人 TETHERIN / BST2 / CD317 蛋白 (His 标签)BST2 ProteinHuman 重组人 PNLIP 蛋白 (His 标签)PNLIP ProteinHuman 重组人 Gastric intrinsic factor / GIF 蛋白 (His 标签)GIF ProteinHuman 重组人 IZUMO1 蛋白 (His 标签)IZUMO1 ProteinHuman 重组人 B7-H5 / Gi24 / VISTA 蛋白 (His 标签)C10ORF54 ProteinHuman 反应五要素: 气肿疽梭菌(CC)核酸检测试剂盒说明书参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+ 引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则: ①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。 ②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。 ③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。 ④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。 ⑤引物3'端的碱基,特别是末及倒数第二个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。 ⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。 ⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。 引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。 |