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大鼠肾上皮细胞提取物说明书

大鼠肾上皮细胞提取物说明书
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大鼠肾上皮细胞提取物说明书在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
  大鼠肾上皮细胞提取物说明书的详细资料:

大鼠肾上皮细胞提取物【Rat KidneyNormal Kidney Derivatives

大鼠肾上皮细胞提取物是从大鼠原代肾上皮细胞提取的,大鼠原代肾上皮细胞从正常大鼠肾组织制备。所有的产品在发货之前均经过严格的QA/QC流程以确保其质量。这些产品可以直接用于基因克隆,表达图谱分析以及各种分子生物学实验的研究。

总RNA制备:利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol试剂分离RNA,然后用Qiagen RNA Clean Kit进行纯化。生物科技提供的总RNA样品附有RNA样品总浓度、总含量、电泳照片、OD值测定结果等。
cDNA制备:纯化后的总RNA来合成cDNA第一链,以50ul总反应体系进行逆转录,体系中包括MMLV反转录酶和随机引物以及10mg总RNA。68℃反应10min 后终止RT反应。利用1x RT Buffer 运输cDNA,1 ul cDNA 足够做一次PCR反应。所有cDNA产品在订单发货之前都经过了严格的QA/QC分析,保证了产品的质量。
蛋白制备:利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制备人关节软骨组织裂解液,离心去除组织碎片,通过Bio-Rad蛋白检测试剂盒测定蛋白浓度,组织蛋白稀释后用非还原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巯基乙醇及PMSF,-80度保存。 

 

 实验要点及说明:

1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法;
2.所使用的盖玻片应该为优质玻璃制造,并经过铬酸洗液处理;
3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻;
4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率;
5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。

 运输和保存:

视天气状况和运输距离远近,公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。
1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中,置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输;收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养,如无法立刻进行复苏操作,冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。
2)T-25培养瓶充满完全培养基后进行常温运输;收到细胞后请镜下观察细胞生长状态,如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作,如悬浮的细胞较多,请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。

 

操作要点:

1)将培养基在37℃水浴锅预热;准备一个15mL无菌的离心管,加入8mL预热培养基。
2)将冻存细胞从液氮罐中取出,快速放入37℃水浴锅中复温(可准备一洁净的烧杯,装满37℃的水,细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内,再逐步转移到水浴锅中)。轻轻晃动冻存管,使细胞能在1~2min内完全解冻,使细胞能尽快通过易受损的温度段(-5~0℃)。注意冻存管管口不能没入水中,BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内,将管内细胞转移至准备好的离心管内,轻轻吹打液体,使细胞均匀分散,降低DMSO浓度,吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次,均转移至离心管内。
4)800rpm离心5min,弃上清,加入新鲜的培养基,吹打制成细胞悬液。
5)将细胞悬液转移至T25细胞瓶内,补加适量的培养基,轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀,放入温箱内培养。
6)第二天观察细胞贴壁生长情况,换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养,待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代,细胞活力恢复后才能进行后续的实验。

黄热病毒单重荧光PCR检测试剂盒481-Methyl-aminoH-benzimidazole-butanoic acid ethyl ester35433

西尼罗病毒单重荧光PCR检测试剂盒485-[Bis(2-hydroxyethyl)amino]-methylH-benzimidazole-butanoic acid ethyl ester35434

基孔肯雅病毒单重荧光PCR检测试剂盒481-Methyl-nitroH-benzimidazole-butanoic acid ethyl ester35432

马尔堡病毒单重荧光PCR检测试剂盒48Bendamustine hydrochloride35435盐酸苯达莫司汀

裂谷热病毒单重荧光PCR检测试剂盒481,6-Dibromopyrene2797391,6-二溴芘
HumanCytochromeP450c21/21-hydroxylase,CYP21AELISA试剂盒人细胞色素P450c21A/21-羟化酶(CYP21A)ELISA试剂盒规格:96T/48T  2,2-Bis(3-amino-4-hydroxyphenyl)hexafluoropropane  83558-87-6  中文名:2,2-(3-氨基-4-羟苯基)六氟丙烷  分子式:C15H12F6N2O2 

HumanCytochrome-C,Cyt-CELISA试剂盒人细胞色素C(Cyt-C)ELISA试剂盒规格:96T/48T  2-(Phenylmethoxy)-naphthalene  613-62-7  中文名:2-萘酚苄基醚  分子式:C17H14O 

HumanCysticercosisaybody,CYTAbELISA试剂盒人囊虫病抗体(CYTAb)ELISA试剂盒规格:96T/48T  2,2-Bis(4-chloroformyloxyphenyl)propane  中文名:2,2-(4-氯甲酰氧苯基)丙烷  分子式:C17H14Cl2O4 

Humancysteinylleukoienes,CysLTsELISA试剂盒人半胱氨酰白三烯(CysLTs)ELISA试剂盒规格:96T/48T  2,2-Diphenylglycine  3060-50-2  中文名:  分子式:C14H13NO2 

HumanCystatinC,Cys-CELISA试剂盒人半胱氨酸蛋白酶抑制剂/胱抑素C(Cys-C)ELISA试剂盒规格:96T/48T  22-Dehydroclerosterol  26315-07-1  中文名:22-去氢赤桐甾醇  分子式:C29H46O
托伐普坦   Tolvaptan  质量规格:度≥99.0%BR,可用于细胞培养 大鼠髓过氧化物酶特异性抗中性粒细胞胞质抗体IgG(MPO-ANCAIgG)ELISA检测试剂盒Ratmyeloperoxidase-aineuophilcytoplasmicaibodyIgG,MPO-ANCAIgGELISAkit 96T/48T

磺胺噻唑  Sulfathiazole  质量规格:>99%,BR 大鼠髓鞘碱性蛋白抗体(MBP aibody)试剂盒 Rat myelin basic protein aibody,MBP aibody ELISA Kit

磺胺噻唑(标准品)  Sulfathiazole  质量规格:含量测定 大鼠髓鞘相关糖蛋白(MAG)试剂盒 Rat myelin-associated glycoprotein,MAG ELISA Kit

环苯扎林盐酸盐  Cyclobenzaprine HCl  质量规格:>99%,BR 大鼠髓系细胞触发受体-1(EM-1)ELISA检测试剂盒RatiggeringReceptorExpressesonMyeloidCells-1,EM-1ELISAKit 96T/48T

盐酸美托咪定  Medetomidine HCl  质量规格:≥99.0%,BR 大鼠髓系细胞触发受体-1(EM-1)试剂盒 Rat iggering Receptor Expresses on Myeloid Cells-1,EM-1 ELISA Kit

京尼平甙(标准品)  Geniposide  质量规格:HPLC98%, 标准品 大鼠髓样细胞触发性受体2(EM2)试剂盒 Rat iggering receptor expressed on myeloid cells 2,EM2 ELISA kit

京尼平甙  Geniposide  质量规格:>98%,BR 大鼠羧化不全骨钙素(ucOC)试剂盒 Rat Undercarboxylated Osteocalcin,ucOC ELISA Kit

甲睾酮; 甲基素  17-Methyltestosterone  质量规格:>98%,BR 大鼠羧甲基赖氨酸(CML)试剂盒 Rat Carboxymethyl lysine,CML ELISA Kit

四氢生物蝶呤游离碱  Tetrahydro-L-Biopterin free base  质量规格:>99% 大鼠胎盘生长因子(PLGF)试剂盒 Rat placea growth factor,PLGF ELISA kit

盐酸替罗非班  Tirofiban HCl  质量规格:>99%,一水物,BR 大鼠糖蛋白130(gp130)ELISA检测试剂盒Ratglucoprotein130,gp130ELISAKIT 96T/48T
大鼠肾上皮细胞提取物说明书人游离睾(F-TESTO)酶联吸附测定试剂盒   Human F-TESTO (Free Testosterone) ELISA Kit  3-(5-(2-Aminopropyl)-7-cyanoindolin-1-yl)propyl benzoate (2R,3R)-2,3-dihydroxysuccinate  239463-85-5  中文名:  分子式:C26H31N3O8 

人优球蛋白(EL)酶联吸附测定试剂盒   Human EL (EuglobulinLysis) ELISA Kit  3,3-Dimethylacrylic acid  中文名:千里光酸  分子式:C5H8O2  度:98.0%

人隐花色素1(CRY1)酶联吸附测定试剂盒   Human CRY1 (Cryptochrome 1) ELISA Kit  3,3'-Sulfonyldianiline  599-61-1  中文名:3,3'-二氨基二苯砜  分子式:C12H12N2O2S 

人抑丝蛋白1(PFN1)酶联吸附测定试剂盒   Human PFN1 (Profilin 1) ELISA Kit                 2-Cyano-N-[4-(Trifluoromethyl)Phenyl]Acetamide  中文名:  分子式:C10H7F3N2O 

人乙酰肝素蛋白多糖(HSPG)酶联吸附测定试剂盒   Human HSPG (Heparan Sulfate Proteoglycan) ELISA Kit  3,4-O-Isopropylidene shikimic acid  183075-03-8  中文名:  分子式:C10H14O5

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